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Etude de stabilité d’un mélange de morphine, kétamine et lorazépam utilisé en soins palliatifs / Laura Defrene
Titre : Etude de stabilité d’un mélange de morphine, kétamine et lorazépam utilisé en soins palliatifs Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Laura Defrene, Auteur ; Luc Blockx, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2019 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale CHU UCL Namur Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Ce travail de fin d’étude s’intéresse à l’étude de stabilité physique et chimique d’un mélange composé de morphine, kétamine et lorazépam. Ce mélange est administré dans le cadre de soins palliatifs dont le but est de soulager des personnes souffrant de maladies douloureuses et incurables.
A ce jour, le mélange est reconstitué par le personnel infirmier au moment de l’injection. Néanmoins, la préparation centralisée du mélange par la pharmacie de l’hôpital comporterait de nombreux avantages tels qu’une production en lots, un gain de temps pour les infirmiers, une meilleure qualité du produit et une diminution des erreurs d’imprécision. Pour ce faire, il est nécessaire de connaitre les conditions de stockage du mélange et donc d’évaluer sa stabilité physique et chimique. Dans le cadre de ce projet, la stabilité est étudiée à 5±3°C pendant une durée d’un mois et ceci à 2 concentrations différentes couramment utilisées.
La stabilité physique est étudiée via différents tests effectués périodiquement tout au long du mois. Une mesure du pH et d’absorbances sont effectuées ainsi que différents contrôles visuels permettant de voir l’apparition d’éventuels cristaux ou impuretés. Ces différents tests ont permis de conclure que le mélange de basses concentrations était physiquement stable pendant 7 jours tandis que celui de hautes concentrations ne l’était que pendant 4 jours.
L’évaluation de la stabilité chimique consiste en l’analyse de l’évolution des concentrations des 3 composés au cours du temps. Pour cela, une méthode de dosage des 3 molécules d’intérêts a été mise au point puis validée. Une diminution maximale de 10% par rapport à la concentration initiale est tolérée afin de considérer le mélange stable. Une régression linéaire avec un intervalle de confiance à 95% a permis de conclure que le mélange de basses concentrations était chimiquement stable durant 3 jours tandis que le mélange de hautes concentrations n’était stable qu’un seul jour.
L’ensemble des résultats obtenus indique que le mélange de basses concentrations peut être stocké à 5±3°C durant 3 jours tandis que le mélange de hautes concentrations ne peut pas être stocké.Note de contenu : Présentation du lieu de stage
Introduction ................................................................................................................................... 10
Partie théorique
1. Présentation du mélange ........................................................................................................ 11 Constituants du mélange et rôle clinique ........................................................................ 11
La morphine .................................................................................................................... 11
La kétamine .................................................................................................................... 12
Le lorazépam .................................................................................................................. 13
2. Préparation centralisée .......................................................................................................... 14
3. Dosage du mélange ............................................................................................................... 14 L’UHPLC ....................................................................................................................... 14
Appareillage .................................................................................................................... 16
3.2.1. Gestionnaire de solvant quaternaire ........................................................................ 16
3.2.2. Gestionnaire des échantillons .................................................................................. 17
3.2.3. Four de la colonne ................................................................................................... 17
3.2.4. Détecteur ................................................................................................................. 18
4. Développement de la méthode chromatographique .............................................................. 20 Colonne ........................................................................................................................... 20
Phase mobile ................................................................................................................... 21
Températures de travail .................................................................................................. 21
Débit ............................................................................................................................... 21
Longueurs d’ondes utilisées ........................................................................................... 22
Concentration en analytes ............................................................................................... 22
5. Validation de la méthode ....................................................................................................... 22 Droite de calibration ....................................................................................................... 22
Linéarité .......................................................................................................................... 23
Reproductibilité .............................................................................................................. 23
Limite de détection et de quantification ......................................................................... 23
Dégradation forcée ......................................................................................................... 24
6. Tests de stabilité .................................................................................................................... 24 Stabilité physique ........................................................................................................... 24
Stabilité chimique ........................................................................................................... 25
7. Objectif .................................................................................................................................. 25
Partie pratique
1. Matériel ................................................................................................................................. 27
1.1. Produits pharmaceutiques ............................................................................................... 27
1.2. Stabilité physique ........................................................................................................... 27
1.2.1. Mesure de l’absorbance ........................................................................................... 27
1.2.2. Mesure du pH .......................................................................................................... 27
1.2.3. Contrôle visuel sur fond blanc et sur fond noir ....................................................... 27
1.2.4. Observation au microscope ..................................................................................... 28
1.3. Stabilité chimique ........................................................................................................... 28
2. Méthode ................................................................................................................................. 28
2.1. Méthode chromatographique .......................................................................................... 28
2.2. Validation de la méthode ................................................................................................ 29
2.2.1. Droite de calibration ................................................................................................ 29
2.2.2. Linéarité .................................................................................................................. 30
2.2.3. Reproductibilité ....................................................................................................... 31
2.2.4. Limite de quantification et de détection .................................................................. 31
2.2.5. Dégradation forcée .................................................................................................. 32
2.3. Tests de stabilité ............................................................................................................. 34
2.3.1. Stabilité physique .................................................................................................... 34
2.3.2. Stabilité chimique .................................................................................................... 35
3. Résultats ................................................................................................................................ 35
3.1. Développement de la méthode ....................................................................................... 35
3.1.1. Colonne ................................................................................................................... 35
3.1.2. Phase mobile ........................................................................................................... 36
3.1.3. Température de travail ............................................................................................ 36
3.1.4. Débit et temps d’analyse ......................................................................................... 37
3.1.5. Longueurs d’ondes de travail .................................................................................. 37
3.1.6. Concentration en analytes et volume injecté ........................................................... 37
3.2. Validation de la méthode ................................................................................................ 37
3.2.1. Droite de calibration ................................................................................................ 37
3.2.2. Linéarité .................................................................................................................. 39
3.2.3. Reproductibilité ....................................................................................................... 39
3.2.4. Limite de détection et de quantification .................................................................. 40
3.2.5. Dégradation forcée .................................................................................................. 40
3.3. Tests de stabilités ............................................................................................................ 41
3.3.1. Stabilité physique .................................................................................................... 41
3.3.2. Stabilité chimique .................................................................................................... 45
Conclusion ..................................................................................................................................... 48
Table des figures ........................................................................................................................... 49
Table des tableaux ......................................................................................................................... 50
Bibliographie ................................................................................................................................. 51
Table des annexes .......................................................................................................................... 55Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=79987 Etude de stabilité d’un mélange de morphine, kétamine et lorazépam utilisé en soins palliatifs [TFE / Mémoire] / Laura Defrene, Auteur ; Luc Blockx, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2019.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale CHU UCL Namur Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Ce travail de fin d’étude s’intéresse à l’étude de stabilité physique et chimique d’un mélange composé de morphine, kétamine et lorazépam. Ce mélange est administré dans le cadre de soins palliatifs dont le but est de soulager des personnes souffrant de maladies douloureuses et incurables.
A ce jour, le mélange est reconstitué par le personnel infirmier au moment de l’injection. Néanmoins, la préparation centralisée du mélange par la pharmacie de l’hôpital comporterait de nombreux avantages tels qu’une production en lots, un gain de temps pour les infirmiers, une meilleure qualité du produit et une diminution des erreurs d’imprécision. Pour ce faire, il est nécessaire de connaitre les conditions de stockage du mélange et donc d’évaluer sa stabilité physique et chimique. Dans le cadre de ce projet, la stabilité est étudiée à 5±3°C pendant une durée d’un mois et ceci à 2 concentrations différentes couramment utilisées.
La stabilité physique est étudiée via différents tests effectués périodiquement tout au long du mois. Une mesure du pH et d’absorbances sont effectuées ainsi que différents contrôles visuels permettant de voir l’apparition d’éventuels cristaux ou impuretés. Ces différents tests ont permis de conclure que le mélange de basses concentrations était physiquement stable pendant 7 jours tandis que celui de hautes concentrations ne l’était que pendant 4 jours.
L’évaluation de la stabilité chimique consiste en l’analyse de l’évolution des concentrations des 3 composés au cours du temps. Pour cela, une méthode de dosage des 3 molécules d’intérêts a été mise au point puis validée. Une diminution maximale de 10% par rapport à la concentration initiale est tolérée afin de considérer le mélange stable. Une régression linéaire avec un intervalle de confiance à 95% a permis de conclure que le mélange de basses concentrations était chimiquement stable durant 3 jours tandis que le mélange de hautes concentrations n’était stable qu’un seul jour.
L’ensemble des résultats obtenus indique que le mélange de basses concentrations peut être stocké à 5±3°C durant 3 jours tandis que le mélange de hautes concentrations ne peut pas être stocké.Note de contenu : Présentation du lieu de stage
Introduction ................................................................................................................................... 10
Partie théorique
1. Présentation du mélange ........................................................................................................ 11 Constituants du mélange et rôle clinique ........................................................................ 11
La morphine .................................................................................................................... 11
La kétamine .................................................................................................................... 12
Le lorazépam .................................................................................................................. 13
2. Préparation centralisée .......................................................................................................... 14
3. Dosage du mélange ............................................................................................................... 14 L’UHPLC ....................................................................................................................... 14
Appareillage .................................................................................................................... 16
3.2.1. Gestionnaire de solvant quaternaire ........................................................................ 16
3.2.2. Gestionnaire des échantillons .................................................................................. 17
3.2.3. Four de la colonne ................................................................................................... 17
3.2.4. Détecteur ................................................................................................................. 18
4. Développement de la méthode chromatographique .............................................................. 20 Colonne ........................................................................................................................... 20
Phase mobile ................................................................................................................... 21
Températures de travail .................................................................................................. 21
Débit ............................................................................................................................... 21
Longueurs d’ondes utilisées ........................................................................................... 22
Concentration en analytes ............................................................................................... 22
5. Validation de la méthode ....................................................................................................... 22 Droite de calibration ....................................................................................................... 22
Linéarité .......................................................................................................................... 23
Reproductibilité .............................................................................................................. 23
Limite de détection et de quantification ......................................................................... 23
Dégradation forcée ......................................................................................................... 24
6. Tests de stabilité .................................................................................................................... 24 Stabilité physique ........................................................................................................... 24
Stabilité chimique ........................................................................................................... 25
7. Objectif .................................................................................................................................. 25
Partie pratique
1. Matériel ................................................................................................................................. 27
1.1. Produits pharmaceutiques ............................................................................................... 27
1.2. Stabilité physique ........................................................................................................... 27
1.2.1. Mesure de l’absorbance ........................................................................................... 27
1.2.2. Mesure du pH .......................................................................................................... 27
1.2.3. Contrôle visuel sur fond blanc et sur fond noir ....................................................... 27
1.2.4. Observation au microscope ..................................................................................... 28
1.3. Stabilité chimique ........................................................................................................... 28
2. Méthode ................................................................................................................................. 28
2.1. Méthode chromatographique .......................................................................................... 28
2.2. Validation de la méthode ................................................................................................ 29
2.2.1. Droite de calibration ................................................................................................ 29
2.2.2. Linéarité .................................................................................................................. 30
2.2.3. Reproductibilité ....................................................................................................... 31
2.2.4. Limite de quantification et de détection .................................................................. 31
2.2.5. Dégradation forcée .................................................................................................. 32
2.3. Tests de stabilité ............................................................................................................. 34
2.3.1. Stabilité physique .................................................................................................... 34
2.3.2. Stabilité chimique .................................................................................................... 35
3. Résultats ................................................................................................................................ 35
3.1. Développement de la méthode ....................................................................................... 35
3.1.1. Colonne ................................................................................................................... 35
3.1.2. Phase mobile ........................................................................................................... 36
3.1.3. Température de travail ............................................................................................ 36
3.1.4. Débit et temps d’analyse ......................................................................................... 37
3.1.5. Longueurs d’ondes de travail .................................................................................. 37
3.1.6. Concentration en analytes et volume injecté ........................................................... 37
3.2. Validation de la méthode ................................................................................................ 37
3.2.1. Droite de calibration ................................................................................................ 37
3.2.2. Linéarité .................................................................................................................. 39
3.2.3. Reproductibilité ....................................................................................................... 39
3.2.4. Limite de détection et de quantification .................................................................. 40
3.2.5. Dégradation forcée .................................................................................................. 40
3.3. Tests de stabilités ............................................................................................................ 41
3.3.1. Stabilité physique .................................................................................................... 41
3.3.2. Stabilité chimique .................................................................................................... 45
Conclusion ..................................................................................................................................... 48
Table des figures ........................................................................................................................... 49
Table des tableaux ......................................................................................................................... 50
Bibliographie ................................................................................................................................. 51
Table des annexes .......................................................................................................................... 55Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=79987 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Evaluation comparative de 6 kits commerciaux pour la détection de l’hémoglobine dans les selles / Marie Lavaert
Titre : Evaluation comparative de 6 kits commerciaux pour la détection de l’hémoglobine dans les selles Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Marie Lavaert, Auteur ; Alaeddine Meghraoui, Directeur de la recherche ; Véronique Yvette Miendje Deyi, Directeur de la recherche ; Luc Blockx, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2020 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Contexte : La présence du sang dans les selles est un indicateur de plusieurs pathologies gastro-intestinales, dont le cancer du côlon. Les tests qualitatifs immuno-chromatographiques sont souvent utilisés afin d’orienter le clinicien à faire des examens complémentaires et diagnostiquer de manière précoce ces pathologies.
But : Le but de cette étude est de comparer les performances de 6 kits commerciaux : Bionexia® FOBplus (BioMérieux), FOB-test® (Ultimed), Hemdetect® immo i-FOB (Diplomed), Proflow® FOB (Prolab Diagnostics), Bioline® SD FOB (Abott), Hemoccult® (Beckman Coulter). Cela permettra de remplacer au LHUB-ULB le kit Bionexia® FOBplus (BioMérieux) qui ne sera plus commercialisé.
Matériels/méthodes : Les échantillons sont prélevés dans la routine de manière aléatoire et testés à l’aide des 6 kits à comparer. Les échantillons présentant des disparités sont testés sur l’OC Sensor pour quantifier l’hémoglobine présent dans les selles. Le résultat final permet de comptabiliser les faux positifs, faux négatifs, vrai positifs et vrai négatifs et ainsi calculer les performances analytiques de chaque kit.
Résultats : L’étude a été effectuée sur 138 tests avec un pourcentage de positivité de 34.7%. Hemdetect® immo i-FOB, FOB-Test® et Proflow® FOB montrent les meilleures performances car leurs sensibilités et spécificités sont plus ou moins équilibrées. Un effet de saturation a également été prouvé pour le Proflow®FOB provoquant une diminution d’intensité de la bande test (T) à des fortes concentrations d’hémoglobine. Nous notons que les pathologies retrouvées chez les patients positifs sont pour 62.5% d’entre-elles liées à un problème gastro-intestinal dont seulement 1 patient présentant un cancer du côlon.
Conclusion : Le choix final du test à implémenter au laboratoire se porte sur FOB-Test®, puisqu’il présente les meilleures performances analytiques (sensibilité : 91.3%, spécificité : 95.65), une bonne spécificité en comparaison avec Hemdetect® et l’effet de saturation est détectable puisqu’il touche également la ligne contrôle (C).Note de contenu : Table des matières
1 Présentation du lieu de stage .................................................................................................................. 1
2 Introduction ............................................................................................................................................. 1
2.1 Contexte général.............................................................................................................................. 2
2.1.1 Types de saignements gastro-intestinaux ................................................................................. 2
2.1.2 Les pathologies liées à une présence du sang dans les selles ................................................... 3
2.1.2.1 Maladies hémorroïdaires : ................................................................................................. 3
2.1.2.2 Rectocolite hémorragique ou colite ulcéreuse : ................................................................ 3
2.1.2.3 Maladie de Crohn : ............................................................................................................. 3
2.1.2.4 Cancers colorectaux : ......................................................................................................... 4
2.1.2.4.1 Données anatomiques ................................................................................................... 4
2.1.2.4.2 Les types de cancer colorectal ....................................................................................... 5
2.1.2.4.3 Stade d’un cancer colorectal : ....................................................................................... 6
2.1.2.4.4 Quels sont les symptômes du cancer colorectal ?......................................................... 8
2.1.2.4.5 Quelles sont les personnes à risque ? ............................................................................ 8
2.1.2.4.6 Les tests de dépistage du cancer colorectal .................................................................. 9
2.1.2.4.7 Traitements .................................................................................................................. 12
2.1.3 Détection de l’hémoglobine dans les selles ............................................................................ 12
2.1.3.1 Principe de l’immuno-chromatographie .......................................................................... 13
2.2 But de l’étude ................................................................................................................................ 14
3 Matériels et méthodes .......................................................................................................................... 15
3.1 Echantillons .................................................................................................................................... 15
3.2 Les différents kits commerciaux utilisés ........................................................................................ 15
3.2.1 Bionexia FOBplus® ................................................................................................................... 16
3.2.2 Comparaison des différents kits commerciaux testés............................................................. 17
3.3 Détection quantitative de l’hémoglobine par l’OC Sensor ............................................................ 18
3.4 Définition de cas ............................................................................................................................ 19
3.5 Méthodes statistiques ................................................................................................................... 19
3.5.1 La sensibilité............................................................................................................................. 19
3.5.2 La spécificité............................................................................................................................. 20
3.5.3 La valeur prédictive positive (VPP) .......................................................................................... 20
3.5.4 La valeur prédictive négative (VPN) ........................................................................................ 20
3.5.5 Sexe ratio et âge médian ......................................................................................................... 20
3.5.6 Comparaison statistique .......................................................................................................... 21
3.6 Tableau de contingence ................................................................................................................. 21
4 Résultats et discussion ........................................................................................................................... 22
4.1 Données sur les prélèvements et les patients ............................................................................... 22
4.2 Performances analytiques des différents kits ............................................................................... 23
4.2.1 Comparaison et interprétation des performances analytiques des différents kits ................ 25
4.3 Analyse du tableau clinique des patients positifs ......................................................................... 27
4.4 Effet de saturation ......................................................................................................................... 29
4.5 Effet de l’homogénéisation ........................................................................................................... 31
4.6 Facilité d’exécution et problèmes pratiques ................................................................................. 32
5 Conclusion .............................................................................................................................................. 33
6 Références ............................................................................................................................................. 35
7 Annexes .................................................................................................................................................. 39
Abstract .......................................................................................................................................................... 44Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89141 Evaluation comparative de 6 kits commerciaux pour la détection de l’hémoglobine dans les selles [TFE / Mémoire] / Marie Lavaert, Auteur ; Alaeddine Meghraoui, Directeur de la recherche ; Véronique Yvette Miendje Deyi, Directeur de la recherche ; Luc Blockx, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2020.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Contexte : La présence du sang dans les selles est un indicateur de plusieurs pathologies gastro-intestinales, dont le cancer du côlon. Les tests qualitatifs immuno-chromatographiques sont souvent utilisés afin d’orienter le clinicien à faire des examens complémentaires et diagnostiquer de manière précoce ces pathologies.
But : Le but de cette étude est de comparer les performances de 6 kits commerciaux : Bionexia® FOBplus (BioMérieux), FOB-test® (Ultimed), Hemdetect® immo i-FOB (Diplomed), Proflow® FOB (Prolab Diagnostics), Bioline® SD FOB (Abott), Hemoccult® (Beckman Coulter). Cela permettra de remplacer au LHUB-ULB le kit Bionexia® FOBplus (BioMérieux) qui ne sera plus commercialisé.
Matériels/méthodes : Les échantillons sont prélevés dans la routine de manière aléatoire et testés à l’aide des 6 kits à comparer. Les échantillons présentant des disparités sont testés sur l’OC Sensor pour quantifier l’hémoglobine présent dans les selles. Le résultat final permet de comptabiliser les faux positifs, faux négatifs, vrai positifs et vrai négatifs et ainsi calculer les performances analytiques de chaque kit.
Résultats : L’étude a été effectuée sur 138 tests avec un pourcentage de positivité de 34.7%. Hemdetect® immo i-FOB, FOB-Test® et Proflow® FOB montrent les meilleures performances car leurs sensibilités et spécificités sont plus ou moins équilibrées. Un effet de saturation a également été prouvé pour le Proflow®FOB provoquant une diminution d’intensité de la bande test (T) à des fortes concentrations d’hémoglobine. Nous notons que les pathologies retrouvées chez les patients positifs sont pour 62.5% d’entre-elles liées à un problème gastro-intestinal dont seulement 1 patient présentant un cancer du côlon.
Conclusion : Le choix final du test à implémenter au laboratoire se porte sur FOB-Test®, puisqu’il présente les meilleures performances analytiques (sensibilité : 91.3%, spécificité : 95.65), une bonne spécificité en comparaison avec Hemdetect® et l’effet de saturation est détectable puisqu’il touche également la ligne contrôle (C).Note de contenu : Table des matières
1 Présentation du lieu de stage .................................................................................................................. 1
2 Introduction ............................................................................................................................................. 1
2.1 Contexte général.............................................................................................................................. 2
2.1.1 Types de saignements gastro-intestinaux ................................................................................. 2
2.1.2 Les pathologies liées à une présence du sang dans les selles ................................................... 3
2.1.2.1 Maladies hémorroïdaires : ................................................................................................. 3
2.1.2.2 Rectocolite hémorragique ou colite ulcéreuse : ................................................................ 3
2.1.2.3 Maladie de Crohn : ............................................................................................................. 3
2.1.2.4 Cancers colorectaux : ......................................................................................................... 4
2.1.2.4.1 Données anatomiques ................................................................................................... 4
2.1.2.4.2 Les types de cancer colorectal ....................................................................................... 5
2.1.2.4.3 Stade d’un cancer colorectal : ....................................................................................... 6
2.1.2.4.4 Quels sont les symptômes du cancer colorectal ?......................................................... 8
2.1.2.4.5 Quelles sont les personnes à risque ? ............................................................................ 8
2.1.2.4.6 Les tests de dépistage du cancer colorectal .................................................................. 9
2.1.2.4.7 Traitements .................................................................................................................. 12
2.1.3 Détection de l’hémoglobine dans les selles ............................................................................ 12
2.1.3.1 Principe de l’immuno-chromatographie .......................................................................... 13
2.2 But de l’étude ................................................................................................................................ 14
3 Matériels et méthodes .......................................................................................................................... 15
3.1 Echantillons .................................................................................................................................... 15
3.2 Les différents kits commerciaux utilisés ........................................................................................ 15
3.2.1 Bionexia FOBplus® ................................................................................................................... 16
3.2.2 Comparaison des différents kits commerciaux testés............................................................. 17
3.3 Détection quantitative de l’hémoglobine par l’OC Sensor ............................................................ 18
3.4 Définition de cas ............................................................................................................................ 19
3.5 Méthodes statistiques ................................................................................................................... 19
3.5.1 La sensibilité............................................................................................................................. 19
3.5.2 La spécificité............................................................................................................................. 20
3.5.3 La valeur prédictive positive (VPP) .......................................................................................... 20
3.5.4 La valeur prédictive négative (VPN) ........................................................................................ 20
3.5.5 Sexe ratio et âge médian ......................................................................................................... 20
3.5.6 Comparaison statistique .......................................................................................................... 21
3.6 Tableau de contingence ................................................................................................................. 21
4 Résultats et discussion ........................................................................................................................... 22
4.1 Données sur les prélèvements et les patients ............................................................................... 22
4.2 Performances analytiques des différents kits ............................................................................... 23
4.2.1 Comparaison et interprétation des performances analytiques des différents kits ................ 25
4.3 Analyse du tableau clinique des patients positifs ......................................................................... 27
4.4 Effet de saturation ......................................................................................................................... 29
4.5 Effet de l’homogénéisation ........................................................................................................... 31
4.6 Facilité d’exécution et problèmes pratiques ................................................................................. 32
5 Conclusion .............................................................................................................................................. 33
6 Références ............................................................................................................................................. 35
7 Annexes .................................................................................................................................................. 39
Abstract .......................................................................................................................................................... 44Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89141 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Mise au point du dosage du cortisol libre urinaire par UHPLC et détection de masse / Quentin Dhesse
Titre : Mise au point du dosage du cortisol libre urinaire par UHPLC et détection de masse Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Quentin Dhesse, Auteur ; Luc Blockx, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2021 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : CHU UCL Namur Mont Godinne Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Ce travail de fin d’études consiste à la mise au point du dosage de cortisol urinaire par UHPLC et par détection de masse. Actuellement, le laboratoire n’effectue pas le dosage du cortisol urinaire au sein de ses installations. Les échantillons à analyser sont envoyés à un autre laboratoire. Afin d’éviter cet envoi et étant donné que le laboratoire dispose du matériel nécessaire à ce type d’analyse, il a été décidé de mettre au point une méthode de dosage du cortisol. Le choix de l’utilisation de l’UHPLC par rapport à l’HPLC se base sur le fait qu’il consomme moins de phase mobile et qu’il permet des temps d’analyses plus courts. Le détecteur employé est le QDa qui permet de détecter les molécules d’intérêts en fonction de leur masse permettant d’éliminer de nombreux pics interférents. Pour la mise en place de ce dosage, un protocole de base a été choisi à partir de la littérature existante. Les conditions chromatographiques ont d’abord été mises au point et optimisées par l’analyse de solutions pures. Dans ce protocole, il a fallu mettre en place une extraction et optimiser celles-ci : pH de l’échantillon, nature du solvant d’élution et les conditions de l’évaporation du solvant d’élution. Les résultats de la mise au point sont l’obtention de chromatogrammes où les pics d’intérêts sont isolés et quantifiables. La méthode doit être validée pour pouvoir être mise en routine au sein du laboratoire et pour cela, la limite de détection, la limite de quantification, la linéarité, la répétabilité, la reproductibilité, la robustesse, la contamination, la récupération et la corrélation ont été analysées. Tous les paramètres ont été validés sauf la corrélation par manque d’analyse. La suite de ce travail de fin d’études est la validation de la corrélation afin de compléter la validation de la méthode de dosage qui permettra de réaliser celui-ci au sein du laboratoire. Note de contenu : Table des matières
Présentation du lieu de stage.................................................................................................................................... 7
Introduction :............................................................................................................................................................. 8
Partie théorique......................................................................................................................................................... 9
1. Le cortisol ...................................................................................................................................................... 9
2. Dosage du cortisol urinaire.......................................................................................................................... 10
2.1. Indication............................................................................................................................................. 10
2.2. Méthode de dosage............................................................................................................................. 10
2.3. Valeurs de références.......................................................................................................................... 11
3. Syndrome de Cushing.................................................................................................................................. 11
3.1. Signes cliniques.................................................................................................................................... 11
3.2. Cause du syndrome de Cushing........................................................................................................... 12
3.3. Tests de diagnostic .............................................................................................................................. 12
3.4. Le traitement ....................................................................................................................................... 14
4. Fonctionnement de l’HPLC ET UHPLC ......................................................................................................... 14
4.1. Théorie de la chromatographie ........................................................................................................... 14
4.2. Comparaison de l’HPLC ET l’UHPLC ..................................................................................................... 14
4.3. Appareillage......................................................................................................................................... 15
5. Développement de méthode ...................................................................................................................... 19
5.1. Conditions chromatographiques ......................................................................................................... 19
5.2. Extraction de l’analyte......................................................................................................................... 21
6. Validation de méthode ................................................................................................................................ 23
6.1. La limite de détection .......................................................................................................................... 23
6.2. La limite de quantification................................................................................................................... 24
6.3. La linéarité ........................................................................................................................................... 24
6.4. La répétabilité...................................................................................................................................... 25
6.5. La reproductibilité ............................................................................................................................... 25
6.6. La robustesse ....................................................................................................................................... 26
6.7. La contamination................................................................................................................................. 26
6.8. La récupération.................................................................................................................................... 27
6.9. La corrélation....................................................................................................................................... 28
Partie pratique......................................................................................................................................................... 29
1. Objectif et stratégie..................................................................................................................................... 29
2. Matériel et méthode ................................................................................................................................... 30
2.1. Matériel ............................................................................................................................................... 30
2.2. Méthode .............................................................................................................................................. 31
3. Résultats et discussion ................................................................................................................................ 33
3.1. Développement de la méthode chromatographique.......................................................................... 33
3.2. Validation de la méthode chromatographique ................................................................................... 43
Conclusion ............................................................................................................................................................... 54
Bibliographie............................................................................................................................................................ 55
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=100363 Mise au point du dosage du cortisol libre urinaire par UHPLC et détection de masse [TFE / Mémoire] / Quentin Dhesse, Auteur ; Luc Blockx, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2021.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Langues : Français (fre)
Mots-clés : CHU UCL Namur Mont Godinne Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Ce travail de fin d’études consiste à la mise au point du dosage de cortisol urinaire par UHPLC et par détection de masse. Actuellement, le laboratoire n’effectue pas le dosage du cortisol urinaire au sein de ses installations. Les échantillons à analyser sont envoyés à un autre laboratoire. Afin d’éviter cet envoi et étant donné que le laboratoire dispose du matériel nécessaire à ce type d’analyse, il a été décidé de mettre au point une méthode de dosage du cortisol. Le choix de l’utilisation de l’UHPLC par rapport à l’HPLC se base sur le fait qu’il consomme moins de phase mobile et qu’il permet des temps d’analyses plus courts. Le détecteur employé est le QDa qui permet de détecter les molécules d’intérêts en fonction de leur masse permettant d’éliminer de nombreux pics interférents. Pour la mise en place de ce dosage, un protocole de base a été choisi à partir de la littérature existante. Les conditions chromatographiques ont d’abord été mises au point et optimisées par l’analyse de solutions pures. Dans ce protocole, il a fallu mettre en place une extraction et optimiser celles-ci : pH de l’échantillon, nature du solvant d’élution et les conditions de l’évaporation du solvant d’élution. Les résultats de la mise au point sont l’obtention de chromatogrammes où les pics d’intérêts sont isolés et quantifiables. La méthode doit être validée pour pouvoir être mise en routine au sein du laboratoire et pour cela, la limite de détection, la limite de quantification, la linéarité, la répétabilité, la reproductibilité, la robustesse, la contamination, la récupération et la corrélation ont été analysées. Tous les paramètres ont été validés sauf la corrélation par manque d’analyse. La suite de ce travail de fin d’études est la validation de la corrélation afin de compléter la validation de la méthode de dosage qui permettra de réaliser celui-ci au sein du laboratoire. Note de contenu : Table des matières
Présentation du lieu de stage.................................................................................................................................... 7
Introduction :............................................................................................................................................................. 8
Partie théorique......................................................................................................................................................... 9
1. Le cortisol ...................................................................................................................................................... 9
2. Dosage du cortisol urinaire.......................................................................................................................... 10
2.1. Indication............................................................................................................................................. 10
2.2. Méthode de dosage............................................................................................................................. 10
2.3. Valeurs de références.......................................................................................................................... 11
3. Syndrome de Cushing.................................................................................................................................. 11
3.1. Signes cliniques.................................................................................................................................... 11
3.2. Cause du syndrome de Cushing........................................................................................................... 12
3.3. Tests de diagnostic .............................................................................................................................. 12
3.4. Le traitement ....................................................................................................................................... 14
4. Fonctionnement de l’HPLC ET UHPLC ......................................................................................................... 14
4.1. Théorie de la chromatographie ........................................................................................................... 14
4.2. Comparaison de l’HPLC ET l’UHPLC ..................................................................................................... 14
4.3. Appareillage......................................................................................................................................... 15
5. Développement de méthode ...................................................................................................................... 19
5.1. Conditions chromatographiques ......................................................................................................... 19
5.2. Extraction de l’analyte......................................................................................................................... 21
6. Validation de méthode ................................................................................................................................ 23
6.1. La limite de détection .......................................................................................................................... 23
6.2. La limite de quantification................................................................................................................... 24
6.3. La linéarité ........................................................................................................................................... 24
6.4. La répétabilité...................................................................................................................................... 25
6.5. La reproductibilité ............................................................................................................................... 25
6.6. La robustesse ....................................................................................................................................... 26
6.7. La contamination................................................................................................................................. 26
6.8. La récupération.................................................................................................................................... 27
6.9. La corrélation....................................................................................................................................... 28
Partie pratique......................................................................................................................................................... 29
1. Objectif et stratégie..................................................................................................................................... 29
2. Matériel et méthode ................................................................................................................................... 30
2.1. Matériel ............................................................................................................................................... 30
2.2. Méthode .............................................................................................................................................. 31
3. Résultats et discussion ................................................................................................................................ 33
3.1. Développement de la méthode chromatographique.......................................................................... 33
3.2. Validation de la méthode chromatographique ................................................................................... 43
Conclusion ............................................................................................................................................................... 54
Bibliographie............................................................................................................................................................ 55
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=100363 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Mise au point d'une méthode chromatographique pour doser un mélange quaternaire utilisé en anesthésie et étudier sa stabilité physico-chimique / Océane Charles
Titre : Mise au point d'une méthode chromatographique pour doser un mélange quaternaire utilisé en anesthésie et étudier sa stabilité physico-chimique Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Océane Charles, Auteur ; Luc Blockx, Directeur de la recherche Année de publication : 2018 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=66100 Mise au point d'une méthode chromatographique pour doser un mélange quaternaire utilisé en anesthésie et étudier sa stabilité physico-chimique [TFE / Mémoire] / Océane Charles, Auteur ; Luc Blockx, Directeur de la recherche . - 2018.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=66100 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire La procalcitonine, un marqueur incontournable en 2019 ? Le point de vue d’un hôpital périphérique / Lucie Cariaux
Titre : La procalcitonine, un marqueur incontournable en 2019 ? Le point de vue d’un hôpital périphérique Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Lucie Cariaux, Auteur ; Luc Blockx, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2019 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale CNDG Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : La procalcitonine est une protéine sécrétée en réponse à une inflammation systémique sévère, en particulier bactérienne. Sa cinétique rapide et son court temps de demi-vie lui permettent de jouer un rôle dans le diagnostic de sepsis, l’initiation et le suivi de l’antibiothérapie qui en découle, mais également dans la prise en charge des patients BPCO en exacerbation aiguë.
Dans cette étude menée à la Clinique Notre-Dame de Grâce, le dosage de la PCT a été réalisé sur deux automates différents : le Mini Vidas et l’Atellica. Le Mini Vidas utilise le principe immunoenzymatique de type sandwich avec une détection finale en fluorescence. L’Atellica fait appel à un immunodosage de type sandwich basé sur le principe de chimiluminescence.
Nous avons vérifié qu’il n’y avait pas de différence statistiquement significative entre ces deux méthodes de dosage, qui présentent une supériorité en termes de spécificité et de sensibilité par rapport à la CRP pour le diagnostic de sepsis.
Les algorithmes proposés par le laboratoire ont permis de guider le clinicien dans la prise en charge du patient septique et en particulier le monitoring de l’antibiothérapie.
Le dosage de la PCT a également permis d’identifier une cause bactérienne aux exacerbations aiguës chez des patients BPCO, sur un échantillonnage plus restreint.
Les conclusions de notre étude confirment l’efficacité de la PCT pour ces trois indications. Cependant, son dosage n’est pas encore réalisé en routine à la CNDG. L’une des explications possibles pourrait être le non-remboursement de ce test onéreux.Note de contenu : Remerciements
Présentation du lieu de stage ..................................................................................................... 6
Introduction générale................................................................................................................. 7
Contexte général ........................................................................................................................ 8
1. Biomarqueurs sanguins de l’inflammation .................................................................... 8
1.1 Vitesse de sédimentation ........................................................................................ 8
1.2 Protéine C-réactive .................................................................................................. 9
1.2.1 Structure ........................................................................................................... 9
1.2.2 Origine .............................................................................................................. 9
1.2.3 Cinétique ........................................................................................................... 9
1.2.4 Avantages ....................................................................................................... 10
1.2.5 Inconvénients ................................................................................................. 10
1.3 Interleukine-6 ......................................................................................................... 10
1.4 TNF-α ...................................................................................................................... 11
2. Procalcitonine ............................................................................................................... 11
2.1 Structure ................................................................................................................ 11
2.2 Origine .................................................................................................................... 12
2.3 Rôle physiopathologique ....................................................................................... 13
2.4 Cinétique ................................................................................................................ 13
2.5 Dosage .................................................................................................................... 14
2.5.1 Méthode semi-quantitative ............................................................................ 14
2.5.2 Méthode quantitative .................................................................................... 15
2.6 Applications cliniques ............................................................................................ 15
2.6.1 PCT et sepsis ................................................................................................... 15
2.6.2 PCT et BPCO .................................................................................................... 18
2.6.3 PCT et méningite............................................................................................. 20
2.6.4 Autres causes influençant la concentration de PCT ....................................... 21
Objectifs et stratégie ................................................................................................................ 22
Matériel et méthodes .............................................................................................................. 23
1. Echantillon .................................................................................................................... 23
1.1 Mini Vidas ............................................................................................................... 23
1.2 Atellica .................................................................................................................... 23
1.3 Préparation des échantillons ................................................................................. 23
2. Mini Vidas ..................................................................................................................... 24
2.1 Principe .................................................................................................................. 24
2.2 Matériel .................................................................................................................. 25
2.3 Méthode ................................................................................................................. 26
2.3.1 Calibration ...................................................................................................... 26
2.3.2 Protocole......................................................................................................... 26
3. Atellica .......................................................................................................................... 27
3.1 Principe .................................................................................................................. 27
3.2 Matériel .................................................................................................................. 28
3.3 Méthode ................................................................................................................. 28
3.3.1 Calibration ...................................................................................................... 28
3.3.2 Protocole......................................................................................................... 29
4. Algorithmes .................................................................................................................. 30
4.1 Diagnostic sepsis .................................................................................................... 30
4.2 Suivi de l’antibiothérapie ....................................................................................... 31
4.3 Diagnostic et initiation antibiothérapie des BPCO ................................................ 32
Résultats et discussions ............................................................................................................ 33
1. Diagnostic sepsis .......................................................................................................... 33
1.1 Description population .......................................................................................... 33
1.2 Comparaison de méthodes .................................................................................... 34
1.3 Interprétation des résultats de PCT sur le Mini Vidas ........................................... 36
1.3.1 Les vrais positifs .............................................................................................. 37
1.3.2 Les vrais négatifs ............................................................................................. 38
1.3.3 Les cas discordants ......................................................................................... 39
2. Suivi antibiothérapie .................................................................................................... 40
3. Diagnostic BPCO ........................................................................................................... 42
Conclusions ............................................................................................................................... 43
Liste des tableaux et liste des figures ....................................................................................... 44
Bibliographie ............................................................................................................................ 46
Annexes
6Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=79985 La procalcitonine, un marqueur incontournable en 2019 ? Le point de vue d’un hôpital périphérique [TFE / Mémoire] / Lucie Cariaux, Auteur ; Luc Blockx, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2019.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale CNDG Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : La procalcitonine est une protéine sécrétée en réponse à une inflammation systémique sévère, en particulier bactérienne. Sa cinétique rapide et son court temps de demi-vie lui permettent de jouer un rôle dans le diagnostic de sepsis, l’initiation et le suivi de l’antibiothérapie qui en découle, mais également dans la prise en charge des patients BPCO en exacerbation aiguë.
Dans cette étude menée à la Clinique Notre-Dame de Grâce, le dosage de la PCT a été réalisé sur deux automates différents : le Mini Vidas et l’Atellica. Le Mini Vidas utilise le principe immunoenzymatique de type sandwich avec une détection finale en fluorescence. L’Atellica fait appel à un immunodosage de type sandwich basé sur le principe de chimiluminescence.
Nous avons vérifié qu’il n’y avait pas de différence statistiquement significative entre ces deux méthodes de dosage, qui présentent une supériorité en termes de spécificité et de sensibilité par rapport à la CRP pour le diagnostic de sepsis.
Les algorithmes proposés par le laboratoire ont permis de guider le clinicien dans la prise en charge du patient septique et en particulier le monitoring de l’antibiothérapie.
Le dosage de la PCT a également permis d’identifier une cause bactérienne aux exacerbations aiguës chez des patients BPCO, sur un échantillonnage plus restreint.
Les conclusions de notre étude confirment l’efficacité de la PCT pour ces trois indications. Cependant, son dosage n’est pas encore réalisé en routine à la CNDG. L’une des explications possibles pourrait être le non-remboursement de ce test onéreux.Note de contenu : Remerciements
Présentation du lieu de stage ..................................................................................................... 6
Introduction générale................................................................................................................. 7
Contexte général ........................................................................................................................ 8
1. Biomarqueurs sanguins de l’inflammation .................................................................... 8
1.1 Vitesse de sédimentation ........................................................................................ 8
1.2 Protéine C-réactive .................................................................................................. 9
1.2.1 Structure ........................................................................................................... 9
1.2.2 Origine .............................................................................................................. 9
1.2.3 Cinétique ........................................................................................................... 9
1.2.4 Avantages ....................................................................................................... 10
1.2.5 Inconvénients ................................................................................................. 10
1.3 Interleukine-6 ......................................................................................................... 10
1.4 TNF-α ...................................................................................................................... 11
2. Procalcitonine ............................................................................................................... 11
2.1 Structure ................................................................................................................ 11
2.2 Origine .................................................................................................................... 12
2.3 Rôle physiopathologique ....................................................................................... 13
2.4 Cinétique ................................................................................................................ 13
2.5 Dosage .................................................................................................................... 14
2.5.1 Méthode semi-quantitative ............................................................................ 14
2.5.2 Méthode quantitative .................................................................................... 15
2.6 Applications cliniques ............................................................................................ 15
2.6.1 PCT et sepsis ................................................................................................... 15
2.6.2 PCT et BPCO .................................................................................................... 18
2.6.3 PCT et méningite............................................................................................. 20
2.6.4 Autres causes influençant la concentration de PCT ....................................... 21
Objectifs et stratégie ................................................................................................................ 22
Matériel et méthodes .............................................................................................................. 23
1. Echantillon .................................................................................................................... 23
1.1 Mini Vidas ............................................................................................................... 23
1.2 Atellica .................................................................................................................... 23
1.3 Préparation des échantillons ................................................................................. 23
2. Mini Vidas ..................................................................................................................... 24
2.1 Principe .................................................................................................................. 24
2.2 Matériel .................................................................................................................. 25
2.3 Méthode ................................................................................................................. 26
2.3.1 Calibration ...................................................................................................... 26
2.3.2 Protocole......................................................................................................... 26
3. Atellica .......................................................................................................................... 27
3.1 Principe .................................................................................................................. 27
3.2 Matériel .................................................................................................................. 28
3.3 Méthode ................................................................................................................. 28
3.3.1 Calibration ...................................................................................................... 28
3.3.2 Protocole......................................................................................................... 29
4. Algorithmes .................................................................................................................. 30
4.1 Diagnostic sepsis .................................................................................................... 30
4.2 Suivi de l’antibiothérapie ....................................................................................... 31
4.3 Diagnostic et initiation antibiothérapie des BPCO ................................................ 32
Résultats et discussions ............................................................................................................ 33
1. Diagnostic sepsis .......................................................................................................... 33
1.1 Description population .......................................................................................... 33
1.2 Comparaison de méthodes .................................................................................... 34
1.3 Interprétation des résultats de PCT sur le Mini Vidas ........................................... 36
1.3.1 Les vrais positifs .............................................................................................. 37
1.3.2 Les vrais négatifs ............................................................................................. 38
1.3.3 Les cas discordants ......................................................................................... 39
2. Suivi antibiothérapie .................................................................................................... 40
3. Diagnostic BPCO ........................................................................................................... 42
Conclusions ............................................................................................................................... 43
Liste des tableaux et liste des figures ....................................................................................... 44
Bibliographie ............................................................................................................................ 46
Annexes
6Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=79985 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Valodation du kit Xpert® MTB/RIF Ultra sur le GeneXpert dx pour la détection de la bactérie Mycobacterium tuberculosis et sa résistance à la rifampicine dans les prélèvements respiratoires / Ikrame Zekhnini
PermalinkVérification des performances analytiques de 2 kits commerciaux pour le dosage des vitamines A/E et du bêta-carotène par chromatographie liquide (HPLC-UV) / Cemile Develi
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