Centre de Documentation Campus Montignies
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Lundi : 8h-18h30
Mardi : 8h-17h30
Mercredi 9h-16h30
Jeudi : 8h-18h30
Vendredi : 8h30-12h30 et 13h-14h30
Votre centre de documentation sera fermé du 28 octobre au 3 novembre
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Etude de la relation entre stress oxydatif et tabagisme. Evolution chez les fumeurs en cours de sevrage / GUILLAUME HOUSIAUX
Titre : Etude de la relation entre stress oxydatif et tabagisme. Evolution chez les fumeurs en cours de sevrage Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : GUILLAUME HOUSIAUX, Auteur Année de publication : 2013 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : BIOLOGIE MÉDICALE STRESS OXYDATIF TABAGISME.FUMEE DE TABAC NICOTINE ANTIOXYDANTS CHROMATOGRAPHIE COLORIMETRIE ELISA Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65258 Etude de la relation entre stress oxydatif et tabagisme. Evolution chez les fumeurs en cours de sevrage [TFE / Mémoire] / GUILLAUME HOUSIAUX, Auteur . - 2013.
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Langues : Français (fre)
Mots-clés : BIOLOGIE MÉDICALE STRESS OXYDATIF TABAGISME.FUMEE DE TABAC NICOTINE ANTIOXYDANTS CHROMATOGRAPHIE COLORIMETRIE ELISA Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65258 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Etude de la résistance à la Bléomycine induite par la protéine TMEM45A dans les cellules cancéreuses HepG2 / SOPHIE CRÈVECOEUR
Titre : Etude de la résistance à la Bléomycine induite par la protéine TMEM45A dans les cellules cancéreuses HepG2 Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : SOPHIE CRÈVECOEUR, Année de publication : 2016 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : Biologie médicale UNamur CBS URBC cancer hépatocarcinome radiothérapie traitement étoposide cisplatine bléomycine apoptose cellulaire caspases apoptose intrinsèque apoptose extrinsèque résistance cellulaire pompes à éfflux hypoxie hypoxie tumorale hypoxie chronique hypoxie aigüe HIF angiogenèse tumorale TMEM45A siRNA culture cellulaire comptage cellulaire activité métabolique spectrophotométrie étude cellulaire cytotoxicité LDH Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières
Remerciements
Présentation du lieu de stage ………………………………………………………………………………………………………………… 9
Introduction générale ……………………………………………………………………………………………………………………………11
Contexte général …………………………………………………………………………………………………………………………………. 13
1. Le cancer : généralités .................................................................................................................... 13
1.1. L’hépatocarcinome ................................................................................................................. 13
1.2. Les différents moyens de traitement ...................................................................................... 14
1.2.1. Chirurgie …………………………………………………………………………………………………………………………14
1.2.2. Radiothérapie ………………………………………………………………………………………………………………...14
1.2.3. Chimiothérapie ……………………………………………………………………………………………………………… 15
1.2.4. Thérapie ciblée ……………………………………………………………………………………………………………….16
1.3. Les molécules anticancéreuses ............................................................................................... 17
1.3.1. Etoposide ……………………………………………………………………………………………………………………….17
1.3.2. Cisplatine ……………………………………………………………………………………………………………………….17
1.3.3. Bléomycine …………………………………………………………………………………………………………………….18
2. L’apoptose cellulaire ....................................................................................................................... 19
2.1. L’apoptose ............................................................................................................................... 19
2.2. Les caspases ............................................................................................................................ 19
2.3. Les voies de signalisation de l’apoptose ................................................................................. 20
2.3.1. L'apoptose intrinsèque …………………………………………………………………………………………………..20
2.3.2. L'apoptose extrinsèque …………………………………………………………………………………………………. 20
2.4. L’apoptose et les cellules cancéreuses ................................................................................... 21
3. La résistance .................................................................................................................................... 21
3.1. Résistance cellulaire aux anticancéreux ................................................................................. 21
3.2. Mécanismes de résistance ...................................................................................................... 21
3.2.1. Les pompes à éfflux ………………………………………………………………………………………………………..22
3.2.2. Modification de la cible ………………………………………………………………………………………………….22
4. L’hypoxie et la résistance ................................................................................................................ 22
4.1. L’hypoxie ................................................................................................................................. 22
4.1.1. Hypoxie tumorale …………………………………………………………………………………………………………. 22
4.1.2. Hypoxie chronique ………………………………………………………………………………………………………… 23
6 | P a g e
4.1.3. Hypoxie aiguë ………………………………………………………………………………………………………………...25
4.2. HIF ........................................................................................................................................... 25
4.2.1. Caractéristiques …………………………………………………………………………………………………………….25
4.2.2. HIF, résistances et croissance tumorale ………………………………………………………………………….25
4.3. Angiogenèse tumorale ............................................................................................................ 26
4.4. Résistance en condition d’hypoxie ......................................................................................... 26
5. TMEM45A ....................................................................................................................................... 27
5.1. Découverte .............................................................................................................................. 27
5.2. Caractéristiques ...................................................................................................................... 28
5.3. TMEM45A et l’hypoxie ............................................................................................................ 28
5.4. TMEM45A et le cancer ............................................................................................................ 29
5.5. siRNA ....................................................................................................................................... 30
Objectifs et stratégies …………………………………………………………………………………………………………………………..33
Matériel et méthodes …………………………………………………………………………………………………………………………..35
1. Techniques de culture cellulaire ..................................................................................................... 35
1.1. Matériel biologique ................................................................................................................. 35
1.2. Travail en conditions stériles .................................................................................................. 36
1.3. Comptage cellulaire ................................................................................................................ 36
2. Techniques d’étude cellulaire ......................................................................................................... 37
2.1. Test d’activité métabolique ................................................................................................... 37
2.1.1. Test d'activité métabolique ; MTT .………………………………………………………………………………….37
2.1.2. But .……………………………………………………………………………………………………………………………….. 37
2.1.3. Principe …………………………………………………………………………………………………………………………..37
2.1.4. Spectrophotométrie ……………………………………………………………………………………………………….38
2.2. Test à l’Iodure de Propidium, IP .............................................................................................. 39
2.2.1. Test de résistance …………………………………………………………………………………………………………..39
2.2.2. But ………………………………………………………………………………………………………………………………… 39
2.2.3. Principe …………………………………………………………………………………………………………………………..39
2.2.4. Hypoxie …………………………………………………………………………………………………………………………. 40
2.2.5. Fluorimétrie ……………………………………………………………………………………………………………………41
2.3. LDH .......................................................................................................................................... 42
2.3.1. Test de cytotoxicité ………………………………………………………………………………………………………..42
7 | P a g e
2.3.2. But ……………………………………………………………………………………………………………………………….. 42
2.3.3. Principe ………………………………………………………………………………………………………………………….42
2.3.4. Lactate déshydrogénase …………………………………………………………………………………………………43
Résultats et discussion ………………………………………………………………………………………………………………………….45
1ère étape : établir la concentration de travail en Bléomycine : test MTT …………………………………………….45
1. Procédure générale ......................................................................................................................... 45
1.1. Jour 1 ....................................................................................................................................... 45
1.2. Jour 2 ....................................................................................................................................... 46
1.3. Jour 3 ....................................................................................................................................... 47
2. Conditions expérimentales ............................................................................................................. 47
3. Résultats .......................................................................................................................................... 48
2ème étape : mise en évidence d'une résistance via un test de viabilité cellulaire : Iodure de Propidium (IP) ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 51
1. Procédure générale ......................................................................................................................... 51
1.1. Jour 1 ....................................................................................................................................... 51
1.2. Jour 2 ....................................................................................................................................... 51
1.3. Jour 3 ....................................................................................................................................... 51
2. Conditions expérimentales ............................................................................................................. 52
3. Résultats .......................................................................................................................................... 52
3ème étape : confirmation de la résistance via un test de cytotoxicité : LDH ………………………………………. 54
1. Procédure générale ......................................................................................................................... 54
1.1. Jour 1 ....................................................................................................................................... 54
1.2. Jour 2 ....................................................................................................................................... 54
1.3. Jour 3 ....................................................................................................................................... 54
2. Conditions expérimentales ............................................................................................................. 54
3. Résultats ........................................................................................................................................ 566
Conclusions ............................................................................................................................................. 59
Perspectives ............................................................................................................................................ 59
Table des abréviations …………………………………………………………………………………………………………………………. 63
Bibliographie ……………………………………………………………………………………………………………………………………….. 65
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65665 Etude de la résistance à la Bléomycine induite par la protéine TMEM45A dans les cellules cancéreuses HepG2 [TFE / Mémoire] / SOPHIE CRÈVECOEUR, . - 2016.
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Langues : Français (fre)
Mots-clés : Biologie médicale UNamur CBS URBC cancer hépatocarcinome radiothérapie traitement étoposide cisplatine bléomycine apoptose cellulaire caspases apoptose intrinsèque apoptose extrinsèque résistance cellulaire pompes à éfflux hypoxie hypoxie tumorale hypoxie chronique hypoxie aigüe HIF angiogenèse tumorale TMEM45A siRNA culture cellulaire comptage cellulaire activité métabolique spectrophotométrie étude cellulaire cytotoxicité LDH Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières
Remerciements
Présentation du lieu de stage ………………………………………………………………………………………………………………… 9
Introduction générale ……………………………………………………………………………………………………………………………11
Contexte général …………………………………………………………………………………………………………………………………. 13
1. Le cancer : généralités .................................................................................................................... 13
1.1. L’hépatocarcinome ................................................................................................................. 13
1.2. Les différents moyens de traitement ...................................................................................... 14
1.2.1. Chirurgie …………………………………………………………………………………………………………………………14
1.2.2. Radiothérapie ………………………………………………………………………………………………………………...14
1.2.3. Chimiothérapie ……………………………………………………………………………………………………………… 15
1.2.4. Thérapie ciblée ……………………………………………………………………………………………………………….16
1.3. Les molécules anticancéreuses ............................................................................................... 17
1.3.1. Etoposide ……………………………………………………………………………………………………………………….17
1.3.2. Cisplatine ……………………………………………………………………………………………………………………….17
1.3.3. Bléomycine …………………………………………………………………………………………………………………….18
2. L’apoptose cellulaire ....................................................................................................................... 19
2.1. L’apoptose ............................................................................................................................... 19
2.2. Les caspases ............................................................................................................................ 19
2.3. Les voies de signalisation de l’apoptose ................................................................................. 20
2.3.1. L'apoptose intrinsèque …………………………………………………………………………………………………..20
2.3.2. L'apoptose extrinsèque …………………………………………………………………………………………………. 20
2.4. L’apoptose et les cellules cancéreuses ................................................................................... 21
3. La résistance .................................................................................................................................... 21
3.1. Résistance cellulaire aux anticancéreux ................................................................................. 21
3.2. Mécanismes de résistance ...................................................................................................... 21
3.2.1. Les pompes à éfflux ………………………………………………………………………………………………………..22
3.2.2. Modification de la cible ………………………………………………………………………………………………….22
4. L’hypoxie et la résistance ................................................................................................................ 22
4.1. L’hypoxie ................................................................................................................................. 22
4.1.1. Hypoxie tumorale …………………………………………………………………………………………………………. 22
4.1.2. Hypoxie chronique ………………………………………………………………………………………………………… 23
6 | P a g e
4.1.3. Hypoxie aiguë ………………………………………………………………………………………………………………...25
4.2. HIF ........................................................................................................................................... 25
4.2.1. Caractéristiques …………………………………………………………………………………………………………….25
4.2.2. HIF, résistances et croissance tumorale ………………………………………………………………………….25
4.3. Angiogenèse tumorale ............................................................................................................ 26
4.4. Résistance en condition d’hypoxie ......................................................................................... 26
5. TMEM45A ....................................................................................................................................... 27
5.1. Découverte .............................................................................................................................. 27
5.2. Caractéristiques ...................................................................................................................... 28
5.3. TMEM45A et l’hypoxie ............................................................................................................ 28
5.4. TMEM45A et le cancer ............................................................................................................ 29
5.5. siRNA ....................................................................................................................................... 30
Objectifs et stratégies …………………………………………………………………………………………………………………………..33
Matériel et méthodes …………………………………………………………………………………………………………………………..35
1. Techniques de culture cellulaire ..................................................................................................... 35
1.1. Matériel biologique ................................................................................................................. 35
1.2. Travail en conditions stériles .................................................................................................. 36
1.3. Comptage cellulaire ................................................................................................................ 36
2. Techniques d’étude cellulaire ......................................................................................................... 37
2.1. Test d’activité métabolique ................................................................................................... 37
2.1.1. Test d'activité métabolique ; MTT .………………………………………………………………………………….37
2.1.2. But .……………………………………………………………………………………………………………………………….. 37
2.1.3. Principe …………………………………………………………………………………………………………………………..37
2.1.4. Spectrophotométrie ……………………………………………………………………………………………………….38
2.2. Test à l’Iodure de Propidium, IP .............................................................................................. 39
2.2.1. Test de résistance …………………………………………………………………………………………………………..39
2.2.2. But ………………………………………………………………………………………………………………………………… 39
2.2.3. Principe …………………………………………………………………………………………………………………………..39
2.2.4. Hypoxie …………………………………………………………………………………………………………………………. 40
2.2.5. Fluorimétrie ……………………………………………………………………………………………………………………41
2.3. LDH .......................................................................................................................................... 42
2.3.1. Test de cytotoxicité ………………………………………………………………………………………………………..42
7 | P a g e
2.3.2. But ……………………………………………………………………………………………………………………………….. 42
2.3.3. Principe ………………………………………………………………………………………………………………………….42
2.3.4. Lactate déshydrogénase …………………………………………………………………………………………………43
Résultats et discussion ………………………………………………………………………………………………………………………….45
1ère étape : établir la concentration de travail en Bléomycine : test MTT …………………………………………….45
1. Procédure générale ......................................................................................................................... 45
1.1. Jour 1 ....................................................................................................................................... 45
1.2. Jour 2 ....................................................................................................................................... 46
1.3. Jour 3 ....................................................................................................................................... 47
2. Conditions expérimentales ............................................................................................................. 47
3. Résultats .......................................................................................................................................... 48
2ème étape : mise en évidence d'une résistance via un test de viabilité cellulaire : Iodure de Propidium (IP) ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 51
1. Procédure générale ......................................................................................................................... 51
1.1. Jour 1 ....................................................................................................................................... 51
1.2. Jour 2 ....................................................................................................................................... 51
1.3. Jour 3 ....................................................................................................................................... 51
2. Conditions expérimentales ............................................................................................................. 52
3. Résultats .......................................................................................................................................... 52
3ème étape : confirmation de la résistance via un test de cytotoxicité : LDH ………………………………………. 54
1. Procédure générale ......................................................................................................................... 54
1.1. Jour 1 ....................................................................................................................................... 54
1.2. Jour 2 ....................................................................................................................................... 54
1.3. Jour 3 ....................................................................................................................................... 54
2. Conditions expérimentales ............................................................................................................. 54
3. Résultats ........................................................................................................................................ 566
Conclusions ............................................................................................................................................. 59
Perspectives ............................................................................................................................................ 59
Table des abréviations …………………………………………………………………………………………………………………………. 63
Bibliographie ……………………………………………………………………………………………………………………………………….. 65
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65665 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Etude du rôle de l’ectonucléotidase CD73 dans un modèle inflammatoire intestinal / CHRISTOPHE VANHAVER
Titre : Etude du rôle de l’ectonucléotidase CD73 dans un modèle inflammatoire intestinal Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : CHRISTOPHE VANHAVER, Auteur Année de publication : 2013 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : BIOLOGIE MÉDICALE ECTONUCLEOTIDASE CD73 INTESTIN REPONSE IMMUNITAIRE TOXOPLASMA GONDII WESTERN BLOT HPLC PERMEABILITE EPITHELIALE PURIFICATION LYMPHOCYTE T COLORATION : INTRACELLULAIRE,EXTRACELLULAIRE Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65271 Etude du rôle de l’ectonucléotidase CD73 dans un modèle inflammatoire intestinal [TFE / Mémoire] / CHRISTOPHE VANHAVER, Auteur . - 2013.
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Langues : Français (fre)
Mots-clés : BIOLOGIE MÉDICALE ECTONUCLEOTIDASE CD73 INTESTIN REPONSE IMMUNITAIRE TOXOPLASMA GONDII WESTERN BLOT HPLC PERMEABILITE EPITHELIALE PURIFICATION LYMPHOCYTE T COLORATION : INTRACELLULAIRE,EXTRACELLULAIRE Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65271 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Etude du rôle du facteur de transcription Dmrt4 dans le développement du cortex cérébral chez la souris / ÉMILIE POSSONI
Titre : Etude du rôle du facteur de transcription Dmrt4 dans le développement du cortex cérébral chez la souris Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : ÉMILIE POSSONI, Auteur Année de publication : 2016 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Institut de Biologie et de Médecine Moléculaires IBMM Gosselies transcription Dmrt4 cortex cérébral souris Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières
REMERCIEMENTS
PRESENTATION DU LIEU DE STAGE
INTRODUCTION GÉNÉRALE ................................................................................................................ 7
CONTEXTE THEORIQUE ...................................................................................................................... 8
1. Généralités sur le cortex cérébral .............................................................................................. 8
1.1 Origine embryonnaire du cortex cérébral ............................................................................ 9
1.2 Subdivisions du cortex cérébral ......................................................................................... 11
1.2.1 Le néocortex ................................................................................................................ 12
1.2.2 L’archicortex ................................................................................................................ 15
1.2.3 Le paléocortex ............................................................................................................. 15
2. Mécanismes impliqués dans la mise en place des aires du néocortex .................................... 15
2.1 Signaux provenant des centres organisateurs ................................................................... 15
2.1.1 L’hème cortical ............................................................................................................ 16
2.1.2 La plaque commissurale .............................................................................................. 17
2.1.3 L’anti-hème cortical..................................................................................................... 18
2.2 Facteurs de transcription impliqués dans la mise en place des aires ................................ 20
3. Corticogenèse ........................................................................................................................... 22
3.1 Déroulement de la corticogenèse ...................................................................................... 22
3.2 Les gènes proneuraux ........................................................................................................ 23
4. Famille des gènes Dmrt ............................................................................................................ 23
4.1 Sous famille A des gènes Dmrt ........................................................................................... 24
4.1.1 Dmrt3 et Dmrt5 ........................................................................................................... 25
4.1.2 Dmrt4 .......................................................................................................................... 26
5. Phénotype des souris Dmrt4 « knock-out » ............................................................................. 27
OBJECTIFS ET STRATEGIE .................................................................................................................. 29
MATERIEL ET METHODES ................................................................................................................. 31
1. Lignées de souris ...................................................................................................................... 31
1.1 Obtention des souris Dmrt4Δ/Δ ........................................................................................... 31
1.2 Génotypage ........................................................................................................................ 32
1.2.1 Extraction d’ADN ......................................................................................................... 32
1.2.2 PCR Dmrt4Δ .................................................................................................................. 33
1.2.3 PCR Dmrt4LoxP ............................................................................................................ 35
2. Prélèvements et conservations des échantillons ..................................................................... 36
2.1 Fécondation et prélèvement .............................................................................................. 36
2.2 Conservation des embryons ............................................................................................... 36
2.3 Coupes au cryostat ............................................................................................................. 37
2.4 Conservation des cerveaux entiers .................................................................................... 37
3. Hybridation in situ (HIS) ........................................................................................................... 37
3.1 Préparation des sondes ...................................................................................................... 38
3.2 HIS sur cryosections ........................................................................................................... 38
3.3 HIS sur cerveaux entiers (Whole-mount) ........................................................................... 40
4. RT-qPCR .................................................................................................................................... 42
4.1 Extraction D’ARNs .............................................................................................................. 42
4.2 Transcription inverse .......................................................................................................... 42
4.3 PCR quantitative (qPCR) ..................................................................................................... 42
RESULTATS ET DISCUSSION .............................................................................................................. 45
1. Dmrt4 et la formation des aires primaires du néocortex ......................................................... 45
1.1 L’absence de Dmrt4 n’affecte pas la formation des aires du néocortex ........................... 45
1.2 Aucune variation significative de la surface des hémisphères cérébraux à P7 chez les souris Dmrt4Δ/Δ ......................................................................................................................... 47
2. Dmrt4 et le centre organisateur correspondant à l’anti-hème................................................ 47
2.1 L’expression de Sfrp2 ne semble pas varier chez les souris Dmrt4Δ/Δ à E12.5. .................. 47
2.2 L’expression de Dbx1 semble légèrement diminuée chez les souris Dmrt4Δ/Δ à E12.5 ..... 48
3. Dmrt4 et son rôle dans la corticogenèse ................................................................................. 49
3.1 L’expression du gène proneural Ascl1 semble perturbée au cours du développement embryonnaire chez les embryons Dmrt4Δ/Δ ............................................................................. 49
3.2 L’expression de Ngn2 semble diminuée chez les embryons Dmrt4Δ/Δ au cours de la corticogenèse ........................................................................................................................... 51
4. Potentiel rôle de Dmrt4 dans les ganglions crâniaux ............................................................... 52
4.1 Différence de patron d’expression de Sfrp2 au niveau du ganglion trigeminal ................. 52
4.2 Défaut de génération des neurones au niveaux des ganglions crâniaux chez les souris Dmrt4Δ/Δ .................................................................................................................................... 53
5. RT-qPCR .................................................................................................................................... 54
CONCLUSION ET PERSPECTIVES ....................................................................................................... 57
ABREVIATIONS .................................................................................................................................. 59
GLOSSAIRE ........................................................................................................................................ 61
LISTE DES FIGURES ........................................................................................................................... 63
BIBLIOGRAPHIE ................................................................................................................................. 65Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65689 Etude du rôle du facteur de transcription Dmrt4 dans le développement du cortex cérébral chez la souris [TFE / Mémoire] / ÉMILIE POSSONI, Auteur . - 2016.
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Mots-clés : biologie médicale Institut de Biologie et de Médecine Moléculaires IBMM Gosselies transcription Dmrt4 cortex cérébral souris Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières
REMERCIEMENTS
PRESENTATION DU LIEU DE STAGE
INTRODUCTION GÉNÉRALE ................................................................................................................ 7
CONTEXTE THEORIQUE ...................................................................................................................... 8
1. Généralités sur le cortex cérébral .............................................................................................. 8
1.1 Origine embryonnaire du cortex cérébral ............................................................................ 9
1.2 Subdivisions du cortex cérébral ......................................................................................... 11
1.2.1 Le néocortex ................................................................................................................ 12
1.2.2 L’archicortex ................................................................................................................ 15
1.2.3 Le paléocortex ............................................................................................................. 15
2. Mécanismes impliqués dans la mise en place des aires du néocortex .................................... 15
2.1 Signaux provenant des centres organisateurs ................................................................... 15
2.1.1 L’hème cortical ............................................................................................................ 16
2.1.2 La plaque commissurale .............................................................................................. 17
2.1.3 L’anti-hème cortical..................................................................................................... 18
2.2 Facteurs de transcription impliqués dans la mise en place des aires ................................ 20
3. Corticogenèse ........................................................................................................................... 22
3.1 Déroulement de la corticogenèse ...................................................................................... 22
3.2 Les gènes proneuraux ........................................................................................................ 23
4. Famille des gènes Dmrt ............................................................................................................ 23
4.1 Sous famille A des gènes Dmrt ........................................................................................... 24
4.1.1 Dmrt3 et Dmrt5 ........................................................................................................... 25
4.1.2 Dmrt4 .......................................................................................................................... 26
5. Phénotype des souris Dmrt4 « knock-out » ............................................................................. 27
OBJECTIFS ET STRATEGIE .................................................................................................................. 29
MATERIEL ET METHODES ................................................................................................................. 31
1. Lignées de souris ...................................................................................................................... 31
1.1 Obtention des souris Dmrt4Δ/Δ ........................................................................................... 31
1.2 Génotypage ........................................................................................................................ 32
1.2.1 Extraction d’ADN ......................................................................................................... 32
1.2.2 PCR Dmrt4Δ .................................................................................................................. 33
1.2.3 PCR Dmrt4LoxP ............................................................................................................ 35
2. Prélèvements et conservations des échantillons ..................................................................... 36
2.1 Fécondation et prélèvement .............................................................................................. 36
2.2 Conservation des embryons ............................................................................................... 36
2.3 Coupes au cryostat ............................................................................................................. 37
2.4 Conservation des cerveaux entiers .................................................................................... 37
3. Hybridation in situ (HIS) ........................................................................................................... 37
3.1 Préparation des sondes ...................................................................................................... 38
3.2 HIS sur cryosections ........................................................................................................... 38
3.3 HIS sur cerveaux entiers (Whole-mount) ........................................................................... 40
4. RT-qPCR .................................................................................................................................... 42
4.1 Extraction D’ARNs .............................................................................................................. 42
4.2 Transcription inverse .......................................................................................................... 42
4.3 PCR quantitative (qPCR) ..................................................................................................... 42
RESULTATS ET DISCUSSION .............................................................................................................. 45
1. Dmrt4 et la formation des aires primaires du néocortex ......................................................... 45
1.1 L’absence de Dmrt4 n’affecte pas la formation des aires du néocortex ........................... 45
1.2 Aucune variation significative de la surface des hémisphères cérébraux à P7 chez les souris Dmrt4Δ/Δ ......................................................................................................................... 47
2. Dmrt4 et le centre organisateur correspondant à l’anti-hème................................................ 47
2.1 L’expression de Sfrp2 ne semble pas varier chez les souris Dmrt4Δ/Δ à E12.5. .................. 47
2.2 L’expression de Dbx1 semble légèrement diminuée chez les souris Dmrt4Δ/Δ à E12.5 ..... 48
3. Dmrt4 et son rôle dans la corticogenèse ................................................................................. 49
3.1 L’expression du gène proneural Ascl1 semble perturbée au cours du développement embryonnaire chez les embryons Dmrt4Δ/Δ ............................................................................. 49
3.2 L’expression de Ngn2 semble diminuée chez les embryons Dmrt4Δ/Δ au cours de la corticogenèse ........................................................................................................................... 51
4. Potentiel rôle de Dmrt4 dans les ganglions crâniaux ............................................................... 52
4.1 Différence de patron d’expression de Sfrp2 au niveau du ganglion trigeminal ................. 52
4.2 Défaut de génération des neurones au niveaux des ganglions crâniaux chez les souris Dmrt4Δ/Δ .................................................................................................................................... 53
5. RT-qPCR .................................................................................................................................... 54
CONCLUSION ET PERSPECTIVES ....................................................................................................... 57
ABREVIATIONS .................................................................................................................................. 59
GLOSSAIRE ........................................................................................................................................ 61
LISTE DES FIGURES ........................................................................................................................... 63
BIBLIOGRAPHIE ................................................................................................................................. 65Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65689 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Etude du rôle potentiel de la prolyl-hydroxylase 2 dans l’indiction des lymphocytes T régulateurs / Charlotte FELTEN
Titre : Etude du rôle potentiel de la prolyl-hydroxylase 2 dans l’indiction des lymphocytes T régulateurs Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Charlotte FELTEN, Auteur ; Muriel Moser, Directeur de la recherche Année de publication : 2017 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Institut de Biologie et de médecine moléculaire Unité d'immunologie. Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : immunité innée; réponse inflammatoire;immunité adaptative; immunité humorale; immunité cellulaire; lymphocytes; interleukine; cytokine; Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65837 Etude du rôle potentiel de la prolyl-hydroxylase 2 dans l’indiction des lymphocytes T régulateurs [TFE / Mémoire] / Charlotte FELTEN, Auteur ; Muriel Moser, Directeur de la recherche . - 2017.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Institut de Biologie et de médecine moléculaire Unité d'immunologie. Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : immunité innée; réponse inflammatoire;immunité adaptative; immunité humorale; immunité cellulaire; lymphocytes; interleukine; cytokine; Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65837 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Etude du rôle de la protéine PicC de Brucella abortus. / SABRINA DELMOITIE
PermalinkEtude du rôle du transporteur monocarboxylate MCT1 dans la prolifération et la fonction du lymphocyte T / Inès Zoraï
PermalinkEtude du second messager di-GMP cyclique dans la croissance de Bruxella abortus / Antoine Gerodez
PermalinkÉtude de la spécificité de la Transportine chez Drosophila melanogaster / SÉBASTIEN ROSAR
PermalinkEtude de stabilité d’une combinaison fixe en pravastine et fénofibrate / Maxime DEPREE
PermalinkEtude de la stabilité de l'ésoméprazole en perfusion après congélation et décongélation par micro-ondes / MONMART Elise
PermalinkEtude de stabilité d’un mélange de morphine, kétamine et lorazépam utilisé en soins palliatifs / Laura Defrene
PermalinkEtude structurale et fonctionnelle de la 1-déoxy-D-xykulose-5-phosphate réductoisomérase – Like de Brucella abortus, une enzyme impliquée dans la biosynthèse des isoprénoïdes / TATIANA SULIMOWSKI
PermalinkEtude structurale et fonctionnelle de l'arginase type I humaine, une nouvelle cible potentielle pour le traitement du cancer / Gregory DEPRET
PermalinkEtude structurale de la PHGDH humaine : production, purification et cristallogenèse de la protéine ; mutagenèse dirigée au sein du site actif / Sophie Rousseau
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