Centre de Documentation Campus Montignies
Horaires :
Lundi : 8h-18h30
Mardi : 8h-18h30
Mercredi 9h-16h30
Jeudi : 8h-18h30
Vendredi : 8h-16h30
Attention, votre centre de documentation sera fermι du 27/04 au 12/05 inclus.
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Etude de la rιsistance ΰ la Blιomycine induite par la protιine TMEM45A dans les cellules cancιreuses HepG2 / SOPHIE CRΘVECOEUR
Titre : Etude de la rιsistance ΰ la Blιomycine induite par la protιine TMEM45A dans les cellules cancιreuses HepG2 Type de document : TFE / Mιmoire Auteurs : SOPHIE CRΘVECOEUR, Annιe de publication : 2016 Note gιnιrale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Franηais (fre) Mots-clιs : Biologie mιdicale UNamur CBS URBC cancer hιpatocarcinome radiothιrapie traitement ιtoposide cisplatine blιomycine apoptose cellulaire caspases apoptose intrinsθque apoptose extrinsθque rιsistance cellulaire pompes ΰ ιfflux hypoxie hypoxie tumorale hypoxie chronique hypoxie aigόe HIF angiogenθse tumorale TMEM45A siRNA culture cellulaire comptage cellulaire activitι mιtabolique spectrophotomιtrie ιtude cellulaire cytotoxicitι LDH Index. dιcimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matiθres
Remerciements
Prιsentation du lieu de stage 9
Introduction gιnιrale 11
Contexte gιnιral . 13
1. Le cancer : gιnιralitιs .................................................................................................................... 13
1.1. Lhιpatocarcinome ................................................................................................................. 13
1.2. Les diffιrents moyens de traitement ...................................................................................... 14
1.2.1. Chirurgie 14
1.2.2. Radiothιrapie ...14
1.2.3. Chimiothιrapie 15
1.2.4. Thιrapie ciblιe .16
1.3. Les molιcules anticancιreuses ............................................................................................... 17
1.3.1. Etoposide .17
1.3.2. Cisplatine .17
1.3.3. Blιomycine .18
2. Lapoptose cellulaire ....................................................................................................................... 19
2.1. Lapoptose ............................................................................................................................... 19
2.2. Les caspases ............................................................................................................................ 19
2.3. Les voies de signalisation de lapoptose ................................................................................. 20
2.3.1. L'apoptose intrinsθque ..20
2.3.2. L'apoptose extrinsθque . 20
2.4. Lapoptose et les cellules cancιreuses ................................................................................... 21
3. La rιsistance .................................................................................................................................... 21
3.1. Rιsistance cellulaire aux anticancιreux ................................................................................. 21
3.2. Mιcanismes de rιsistance ...................................................................................................... 21
3.2.1. Les pompes ΰ ιfflux ..22
3.2.2. Modification de la cible .22
4. Lhypoxie et la rιsistance ................................................................................................................ 22
4.1. Lhypoxie ................................................................................................................................. 22
4.1.1. Hypoxie tumorale . 22
4.1.2. Hypoxie chronique 23
6 | P a g e
4.1.3. Hypoxie aiguλ ...25
4.2. HIF ........................................................................................................................................... 25
4.2.1. Caractιristiques .25
4.2.2. HIF, rιsistances et croissance tumorale .25
4.3. Angiogenθse tumorale ............................................................................................................ 26
4.4. Rιsistance en condition dhypoxie ......................................................................................... 26
5. TMEM45A ....................................................................................................................................... 27
5.1. Dιcouverte .............................................................................................................................. 27
5.2. Caractιristiques ...................................................................................................................... 28
5.3. TMEM45A et lhypoxie ............................................................................................................ 28
5.4. TMEM45A et le cancer ............................................................................................................ 29
5.5. siRNA ....................................................................................................................................... 30
Objectifs et stratιgies ..33
Matιriel et mιthodes ..35
1. Techniques de culture cellulaire ..................................................................................................... 35
1.1. Matιriel biologique ................................................................................................................. 35
1.2. Travail en conditions stιriles .................................................................................................. 36
1.3. Comptage cellulaire ................................................................................................................ 36
2. Techniques dιtude cellulaire ......................................................................................................... 37
2.1. Test dactivitι mιtabolique ................................................................................................... 37
2.1.1. Test d'activitι mιtabolique ; MTT . .37
2.1.2. But . .. 37
2.1.3. Principe ..37
2.1.4. Spectrophotomιtrie .38
2.2. Test ΰ lIodure de Propidium, IP .............................................................................................. 39
2.2.1. Test de rιsistance ..39
2.2.2. But 39
2.2.3. Principe ..39
2.2.4. Hypoxie . 40
2.2.5. Fluorimιtrie 41
2.3. LDH .......................................................................................................................................... 42
2.3.1. Test de cytotoxicitι ..42
7 | P a g e
2.3.2. But .. 42
2.3.3. Principe .42
2.3.4. Lactate dιshydrogιnase 43
Rιsultats et discussion .45
1θre ιtape : ιtablir la concentration de travail en Blιomycine : test MTT .45
1. Procιdure gιnιrale ......................................................................................................................... 45
1.1. Jour 1 ....................................................................................................................................... 45
1.2. Jour 2 ....................................................................................................................................... 46
1.3. Jour 3 ....................................................................................................................................... 47
2. Conditions expιrimentales ............................................................................................................. 47
3. Rιsultats .......................................................................................................................................... 48
2θme ιtape : mise en ιvidence d'une rιsistance via un test de viabilitι cellulaire : Iodure de Propidium (IP) . 51
1. Procιdure gιnιrale ......................................................................................................................... 51
1.1. Jour 1 ....................................................................................................................................... 51
1.2. Jour 2 ....................................................................................................................................... 51
1.3. Jour 3 ....................................................................................................................................... 51
2. Conditions expιrimentales ............................................................................................................. 52
3. Rιsultats .......................................................................................................................................... 52
3θme ιtape : confirmation de la rιsistance via un test de cytotoxicitι : LDH . 54
1. Procιdure gιnιrale ......................................................................................................................... 54
1.1. Jour 1 ....................................................................................................................................... 54
1.2. Jour 2 ....................................................................................................................................... 54
1.3. Jour 3 ....................................................................................................................................... 54
2. Conditions expιrimentales ............................................................................................................. 54
3. Rιsultats ........................................................................................................................................ 566
Conclusions ............................................................................................................................................. 59
Perspectives ............................................................................................................................................ 59
Table des abrιviations . 63
Bibliographie .. 65
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65665 Etude de la rιsistance ΰ la Blιomycine induite par la protιine TMEM45A dans les cellules cancιreuses HepG2 [TFE / Mιmoire] / SOPHIE CRΘVECOEUR, . - 2016.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Franηais (fre)
Mots-clιs : Biologie mιdicale UNamur CBS URBC cancer hιpatocarcinome radiothιrapie traitement ιtoposide cisplatine blιomycine apoptose cellulaire caspases apoptose intrinsθque apoptose extrinsθque rιsistance cellulaire pompes ΰ ιfflux hypoxie hypoxie tumorale hypoxie chronique hypoxie aigόe HIF angiogenθse tumorale TMEM45A siRNA culture cellulaire comptage cellulaire activitι mιtabolique spectrophotomιtrie ιtude cellulaire cytotoxicitι LDH Index. dιcimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matiθres
Remerciements
Prιsentation du lieu de stage 9
Introduction gιnιrale 11
Contexte gιnιral . 13
1. Le cancer : gιnιralitιs .................................................................................................................... 13
1.1. Lhιpatocarcinome ................................................................................................................. 13
1.2. Les diffιrents moyens de traitement ...................................................................................... 14
1.2.1. Chirurgie 14
1.2.2. Radiothιrapie ...14
1.2.3. Chimiothιrapie 15
1.2.4. Thιrapie ciblιe .16
1.3. Les molιcules anticancιreuses ............................................................................................... 17
1.3.1. Etoposide .17
1.3.2. Cisplatine .17
1.3.3. Blιomycine .18
2. Lapoptose cellulaire ....................................................................................................................... 19
2.1. Lapoptose ............................................................................................................................... 19
2.2. Les caspases ............................................................................................................................ 19
2.3. Les voies de signalisation de lapoptose ................................................................................. 20
2.3.1. L'apoptose intrinsθque ..20
2.3.2. L'apoptose extrinsθque . 20
2.4. Lapoptose et les cellules cancιreuses ................................................................................... 21
3. La rιsistance .................................................................................................................................... 21
3.1. Rιsistance cellulaire aux anticancιreux ................................................................................. 21
3.2. Mιcanismes de rιsistance ...................................................................................................... 21
3.2.1. Les pompes ΰ ιfflux ..22
3.2.2. Modification de la cible .22
4. Lhypoxie et la rιsistance ................................................................................................................ 22
4.1. Lhypoxie ................................................................................................................................. 22
4.1.1. Hypoxie tumorale . 22
4.1.2. Hypoxie chronique 23
6 | P a g e
4.1.3. Hypoxie aiguλ ...25
4.2. HIF ........................................................................................................................................... 25
4.2.1. Caractιristiques .25
4.2.2. HIF, rιsistances et croissance tumorale .25
4.3. Angiogenθse tumorale ............................................................................................................ 26
4.4. Rιsistance en condition dhypoxie ......................................................................................... 26
5. TMEM45A ....................................................................................................................................... 27
5.1. Dιcouverte .............................................................................................................................. 27
5.2. Caractιristiques ...................................................................................................................... 28
5.3. TMEM45A et lhypoxie ............................................................................................................ 28
5.4. TMEM45A et le cancer ............................................................................................................ 29
5.5. siRNA ....................................................................................................................................... 30
Objectifs et stratιgies ..33
Matιriel et mιthodes ..35
1. Techniques de culture cellulaire ..................................................................................................... 35
1.1. Matιriel biologique ................................................................................................................. 35
1.2. Travail en conditions stιriles .................................................................................................. 36
1.3. Comptage cellulaire ................................................................................................................ 36
2. Techniques dιtude cellulaire ......................................................................................................... 37
2.1. Test dactivitι mιtabolique ................................................................................................... 37
2.1.1. Test d'activitι mιtabolique ; MTT . .37
2.1.2. But . .. 37
2.1.3. Principe ..37
2.1.4. Spectrophotomιtrie .38
2.2. Test ΰ lIodure de Propidium, IP .............................................................................................. 39
2.2.1. Test de rιsistance ..39
2.2.2. But 39
2.2.3. Principe ..39
2.2.4. Hypoxie . 40
2.2.5. Fluorimιtrie 41
2.3. LDH .......................................................................................................................................... 42
2.3.1. Test de cytotoxicitι ..42
7 | P a g e
2.3.2. But .. 42
2.3.3. Principe .42
2.3.4. Lactate dιshydrogιnase 43
Rιsultats et discussion .45
1θre ιtape : ιtablir la concentration de travail en Blιomycine : test MTT .45
1. Procιdure gιnιrale ......................................................................................................................... 45
1.1. Jour 1 ....................................................................................................................................... 45
1.2. Jour 2 ....................................................................................................................................... 46
1.3. Jour 3 ....................................................................................................................................... 47
2. Conditions expιrimentales ............................................................................................................. 47
3. Rιsultats .......................................................................................................................................... 48
2θme ιtape : mise en ιvidence d'une rιsistance via un test de viabilitι cellulaire : Iodure de Propidium (IP) . 51
1. Procιdure gιnιrale ......................................................................................................................... 51
1.1. Jour 1 ....................................................................................................................................... 51
1.2. Jour 2 ....................................................................................................................................... 51
1.3. Jour 3 ....................................................................................................................................... 51
2. Conditions expιrimentales ............................................................................................................. 52
3. Rιsultats .......................................................................................................................................... 52
3θme ιtape : confirmation de la rιsistance via un test de cytotoxicitι : LDH . 54
1. Procιdure gιnιrale ......................................................................................................................... 54
1.1. Jour 1 ....................................................................................................................................... 54
1.2. Jour 2 ....................................................................................................................................... 54
1.3. Jour 3 ....................................................................................................................................... 54
2. Conditions expιrimentales ............................................................................................................. 54
3. Rιsultats ........................................................................................................................................ 566
Conclusions ............................................................................................................................................. 59
Perspectives ............................................................................................................................................ 59
Table des abrιviations . 63
Bibliographie .. 65
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