Centre de Documentation Campus Montignies
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Pathologie traumatique du muscle strié squelettique / A. Frey in EMC : Appareil locomoteur, vol. 13, n°1 (Janvier 2018)
[article]
Titre : Pathologie traumatique du muscle strié squelettique Type de document : texte imprimé Auteurs : A. Frey ; S. Le Garrec Année de publication : 2018 Article en page(s) : 15-140-A-10 [Tome 6] Langues : Français (fre) Mots-clés : Muscle strié Classification des lésions musculaires Échographie musculaire Séquelles Prévention Résumé : La pathologie du muscle strié touche préférentiellement le sujet pratiquant une activité physique souvent intense mais elle est rarement le fait du hasard. Les lésions musculaires touchent principalement les membres inférieurs avec une forte prévalence des lésions des ischiojambiers puis des gastrocnémiens. Après un interrogatoire minutieux, le praticien peut établir un premier diagnostic clinique précis de la lésion en mettant en œuvre des mesures thérapeutiques immédiates. Il est conseillé d'appliqué le protocole POLICE (protection, optimal loading, ice, compression, elevation) avant de revoir le sujet dans les quelques jours qui suivent le traumatisme pour établir un diagnostic de gravité. Lorsque le sujet est revu en consultation, le praticien peut s'aider de l'échographie afin d'évaluer le type de tissu touché, soit musculaire, soit conjonctif, soit mixte, et de préciser l'évolution de la lésion au bout de quelques jours. Une imagerie par résonance magnétique (IRM) peut être réalisée mais seulement dans des cas précis de lésion profonde peu accessible à l'échographie. Le praticien peut ainsi estimer un délai moyen de reprise des activités sportives et le patient peut commencer des soins de rééducation fonctionnelle adaptés. La reprise totale s'effectuera entre 15 jours et trois ou quatre mois en fonction de la gravité. Des séquelles peuvent apparaître à cause d'une prise en charge inadaptée, ou en raison d'une reprise trop précoce de l'activité liée à des impératifs personnels ou à des enjeux financiers chez les sportifs de haut niveau. Ces complications doivent être diagnostiquées et prises en charge en s'aidant de l'imagerie. Afin de limiter l'apparition de ces lésions musculaires, des mesures de prévention devraient être incluses dans la préparation : renforcement musculaire adéquat ; tests isocinétiques pour apprécier le ratio entre ces groupes musculaires et rechercher un éventuel déficit de force musculaire ; entraînement calibré, bonne hygiène de vie et récupération optimale incluant le sommeil et les massages. Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=56619
in EMC : Appareil locomoteur > vol. 13, n°1 (Janvier 2018) . - 15-140-A-10 [Tome 6][article] Pathologie traumatique du muscle strié squelettique [texte imprimé] / A. Frey ; S. Le Garrec . - 2018 . - 15-140-A-10 [Tome 6].
Langues : Français (fre)
in EMC : Appareil locomoteur > vol. 13, n°1 (Janvier 2018) . - 15-140-A-10 [Tome 6]
Mots-clés : Muscle strié Classification des lésions musculaires Échographie musculaire Séquelles Prévention Résumé : La pathologie du muscle strié touche préférentiellement le sujet pratiquant une activité physique souvent intense mais elle est rarement le fait du hasard. Les lésions musculaires touchent principalement les membres inférieurs avec une forte prévalence des lésions des ischiojambiers puis des gastrocnémiens. Après un interrogatoire minutieux, le praticien peut établir un premier diagnostic clinique précis de la lésion en mettant en œuvre des mesures thérapeutiques immédiates. Il est conseillé d'appliqué le protocole POLICE (protection, optimal loading, ice, compression, elevation) avant de revoir le sujet dans les quelques jours qui suivent le traumatisme pour établir un diagnostic de gravité. Lorsque le sujet est revu en consultation, le praticien peut s'aider de l'échographie afin d'évaluer le type de tissu touché, soit musculaire, soit conjonctif, soit mixte, et de préciser l'évolution de la lésion au bout de quelques jours. Une imagerie par résonance magnétique (IRM) peut être réalisée mais seulement dans des cas précis de lésion profonde peu accessible à l'échographie. Le praticien peut ainsi estimer un délai moyen de reprise des activités sportives et le patient peut commencer des soins de rééducation fonctionnelle adaptés. La reprise totale s'effectuera entre 15 jours et trois ou quatre mois en fonction de la gravité. Des séquelles peuvent apparaître à cause d'une prise en charge inadaptée, ou en raison d'une reprise trop précoce de l'activité liée à des impératifs personnels ou à des enjeux financiers chez les sportifs de haut niveau. Ces complications doivent être diagnostiquées et prises en charge en s'aidant de l'imagerie. Afin de limiter l'apparition de ces lésions musculaires, des mesures de prévention devraient être incluses dans la préparation : renforcement musculaire adéquat ; tests isocinétiques pour apprécier le ratio entre ces groupes musculaires et rechercher un éventuel déficit de force musculaire ; entraînement calibré, bonne hygiène de vie et récupération optimale incluant le sommeil et les massages. Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=56619 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Contribution à l’étude du rôle des protéines DUX4 et DUX4c, impliquées dans la dystrophie musculaire facio-scapulo-humérale / NATHAN DEWIT
Titre : Contribution à l’étude du rôle des protéines DUX4 et DUX4c, impliquées dans la dystrophie musculaire facio-scapulo-humérale Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : NATHAN DEWIT, Année de publication : 2016 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : Biologie médicale UMONS service de Biologie Moléculaire muscle strié cellules satellites gène DUX4 gène DUX4c partenaire protéique cavéoles protéines cavéolaires myoblastes immortels congélation des cellules transfert inverse PCR électrophorèse sur gel d'agarose Western Blot électrophorèse sur gel de polyacrylamide blotting Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières
Remerciements ........................................................................................................................................ 3
INTRODUCTION ................................................................................................................................... 8
Contexte général .................................................................................................................................. 10
1. Le muscle strié squelettique .......................................................................................................... 10
1.1 Structure histologique ........................................................................................................ 10
1.2 Les cellules satellites ......................................................................................................... 11
2. La maladie ................................................................................................................................ 12
2.1 Généralités ......................................................................................................................... 12
2.2 Signes cliniques ................................................................................................................. 13
2.3 Aspects génétiques ............................................................................................................ 14
2.3.1 Le gène DUX4 ........................................................................................................... 15
2.3.2 Le gène DUX4c ......................................................................................................... 15
3. Les partenaires protéiques de DUX4 et DUX4c ...................................................................... 16
3.1 Généralités ......................................................................................................................... 16
3.2 Les partenaires protéiques associés aux ARN messagers.................................................. 16
3.3 Les partenaires protéiques associés au cytosquelette ........................................................ 18
4. Les cavéoles ............................................................................................................................. 18
4.1 Les radeaux lipidiques ....................................................................................................... 18
4.2 Les cavéoles ...................................................................................................................... 19
4.3 Les protéines cavéolaires ................................................................................................... 20
Objectifs et stratégies .......................................................................................................................... 22
Matériel et méthodes ........................................................................................................................... 23
1. Culture cellulaire ........................................................................................................................... 23
1.1 Culture de myoblastes immortels in vitro.......................................................................... 24
1.2 Différenciation de myoblastes in vitro .............................................................................. 25
1.3 Congélation de cellules ...................................................................................................... 26
1.4 Induction iC2C12-DUX4 .................................................................................................. 27
1.5 Transfection inverse des C2C12 ........................................................................................ 28
1.6 Test mycoplasme ............................................................................................................... 29
1.6.1 La Polymerase Chain Reaction (PCR) ...................................................................... 30
1.6.2 Electrophorèse sur gel d’agarose ............................................................................... 32
2. Immunodétection par Western blot .......................................................................................... 32
2.1 Extraits protéiques ............................................................................................................. 33
2.1.1 Extraction nucléaire ................................................................................................... 33
2.1.2 Extraction des protéines ............................................................................................ 34
2.1.3 Préparation des échantillons ...................................................................................... 34
2.2 Dosage protéique BCA ...................................................................................................... 35
2.3 Electrophorèse sur gel de polyacrylamide ......................................................................... 36
2.3.1 Préparation des gels ................................................................................................... 36
2.3.2 Electrophorèse ........................................................................................................... 37
2.4 Transfert sur membrane de nitrocellulose (Blotting)......................................................... 38
2.5 Immunodétection ............................................................................................................... 39
3. Immunofluorescence indirecte ................................................................................................. 42
4. In situ PLA ............................................................................................................................... 44
Résultats ............................................................................................................................................... 47
Partie 1: Validation des partenaires protéiques de DUX4 et DUX4c .................................................... 47
1. Co-immunofluorescence................................................................................................................ 47
1.1 ILF3 ................................................................................................................................... 47
1.1.1 Myoblastes ................................................................................................................. 47
1.1.2 Myoblastes en différenciation (3 jours) ..................................................................... 48
1.2 NF90 .................................................................................................................................. 51
1.2.1 Myoblastes ................................................................................................................. 51
1.2.2 Myoblastes en différenciation (3 jours) ..................................................................... 53
1.3 IGF2BP1 ............................................................................................................................ 55
1.3.1 Stade de prolifération ................................................................................................ 55
2. In situ PLA (Proximity Ligation Assay) .................................................................................. 55
2.1 Myoblastes sains (16 Ubic) sur-exprimant DUX4 ............................................................ 55
2.2 Myoblastes FSHD en différenciation (16 Abic) exprimant DUX4 de manière endogène 57
Partie 2 : la dérégulation des cavines .................................................................................................... 58
1. Induction des iC2C12-DUX4 (myoblastes) .................................................................................. 58
1.1 Immunofluorescence indirecte .......................................................................................... 58
1.1.1 Vérification des conditions d’induction de DUX4 .................................................... 58
1.1.2 La dérégulation des cavines ....................................................................................... 59
1.2 Immunodétection par Western blot ................................................................................... 60
1.2.1 Détection de DUX4 ................................................................................................... 60
1.2.2 Détection des cavines ................................................................................................ 61
2. Différenciation des iC2C12-DUX4 .......................................................................................... 63
3. C2C12 transfectées ................................................................................................................... 65
Discussions ........................................................................................................................................... 67
Partie 1 : les partenaires protéiques de DUX4 et DUX4c ..................................................................... 67
Partie 2 : la dérégulation des cavines .................................................................................................... 69
Conclusion et perspectives .................................................................................................................. 72
Lexique ................................................................................................................................................. 72
Bibliographie ........................................................................................................................................ 74
Annexes ................................................................................................................................................ 78Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65670 Contribution à l’étude du rôle des protéines DUX4 et DUX4c, impliquées dans la dystrophie musculaire facio-scapulo-humérale [TFE / Mémoire] / NATHAN DEWIT, . - 2016.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : Biologie médicale UMONS service de Biologie Moléculaire muscle strié cellules satellites gène DUX4 gène DUX4c partenaire protéique cavéoles protéines cavéolaires myoblastes immortels congélation des cellules transfert inverse PCR électrophorèse sur gel d'agarose Western Blot électrophorèse sur gel de polyacrylamide blotting Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières
Remerciements ........................................................................................................................................ 3
INTRODUCTION ................................................................................................................................... 8
Contexte général .................................................................................................................................. 10
1. Le muscle strié squelettique .......................................................................................................... 10
1.1 Structure histologique ........................................................................................................ 10
1.2 Les cellules satellites ......................................................................................................... 11
2. La maladie ................................................................................................................................ 12
2.1 Généralités ......................................................................................................................... 12
2.2 Signes cliniques ................................................................................................................. 13
2.3 Aspects génétiques ............................................................................................................ 14
2.3.1 Le gène DUX4 ........................................................................................................... 15
2.3.2 Le gène DUX4c ......................................................................................................... 15
3. Les partenaires protéiques de DUX4 et DUX4c ...................................................................... 16
3.1 Généralités ......................................................................................................................... 16
3.2 Les partenaires protéiques associés aux ARN messagers.................................................. 16
3.3 Les partenaires protéiques associés au cytosquelette ........................................................ 18
4. Les cavéoles ............................................................................................................................. 18
4.1 Les radeaux lipidiques ....................................................................................................... 18
4.2 Les cavéoles ...................................................................................................................... 19
4.3 Les protéines cavéolaires ................................................................................................... 20
Objectifs et stratégies .......................................................................................................................... 22
Matériel et méthodes ........................................................................................................................... 23
1. Culture cellulaire ........................................................................................................................... 23
1.1 Culture de myoblastes immortels in vitro.......................................................................... 24
1.2 Différenciation de myoblastes in vitro .............................................................................. 25
1.3 Congélation de cellules ...................................................................................................... 26
1.4 Induction iC2C12-DUX4 .................................................................................................. 27
1.5 Transfection inverse des C2C12 ........................................................................................ 28
1.6 Test mycoplasme ............................................................................................................... 29
1.6.1 La Polymerase Chain Reaction (PCR) ...................................................................... 30
1.6.2 Electrophorèse sur gel d’agarose ............................................................................... 32
2. Immunodétection par Western blot .......................................................................................... 32
2.1 Extraits protéiques ............................................................................................................. 33
2.1.1 Extraction nucléaire ................................................................................................... 33
2.1.2 Extraction des protéines ............................................................................................ 34
2.1.3 Préparation des échantillons ...................................................................................... 34
2.2 Dosage protéique BCA ...................................................................................................... 35
2.3 Electrophorèse sur gel de polyacrylamide ......................................................................... 36
2.3.1 Préparation des gels ................................................................................................... 36
2.3.2 Electrophorèse ........................................................................................................... 37
2.4 Transfert sur membrane de nitrocellulose (Blotting)......................................................... 38
2.5 Immunodétection ............................................................................................................... 39
3. Immunofluorescence indirecte ................................................................................................. 42
4. In situ PLA ............................................................................................................................... 44
Résultats ............................................................................................................................................... 47
Partie 1: Validation des partenaires protéiques de DUX4 et DUX4c .................................................... 47
1. Co-immunofluorescence................................................................................................................ 47
1.1 ILF3 ................................................................................................................................... 47
1.1.1 Myoblastes ................................................................................................................. 47
1.1.2 Myoblastes en différenciation (3 jours) ..................................................................... 48
1.2 NF90 .................................................................................................................................. 51
1.2.1 Myoblastes ................................................................................................................. 51
1.2.2 Myoblastes en différenciation (3 jours) ..................................................................... 53
1.3 IGF2BP1 ............................................................................................................................ 55
1.3.1 Stade de prolifération ................................................................................................ 55
2. In situ PLA (Proximity Ligation Assay) .................................................................................. 55
2.1 Myoblastes sains (16 Ubic) sur-exprimant DUX4 ............................................................ 55
2.2 Myoblastes FSHD en différenciation (16 Abic) exprimant DUX4 de manière endogène 57
Partie 2 : la dérégulation des cavines .................................................................................................... 58
1. Induction des iC2C12-DUX4 (myoblastes) .................................................................................. 58
1.1 Immunofluorescence indirecte .......................................................................................... 58
1.1.1 Vérification des conditions d’induction de DUX4 .................................................... 58
1.1.2 La dérégulation des cavines ....................................................................................... 59
1.2 Immunodétection par Western blot ................................................................................... 60
1.2.1 Détection de DUX4 ................................................................................................... 60
1.2.2 Détection des cavines ................................................................................................ 61
2. Différenciation des iC2C12-DUX4 .......................................................................................... 63
3. C2C12 transfectées ................................................................................................................... 65
Discussions ........................................................................................................................................... 67
Partie 1 : les partenaires protéiques de DUX4 et DUX4c ..................................................................... 67
Partie 2 : la dérégulation des cavines .................................................................................................... 69
Conclusion et perspectives .................................................................................................................. 72
Lexique ................................................................................................................................................. 72
Bibliographie ........................................................................................................................................ 74
Annexes ................................................................................................................................................ 78Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65670 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire