Centre de Documentation Campus Montignies
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Lundi : 8h-18h30
Mardi : 8h-18h30
Mercredi 9h-16h30
Jeudi : 8h-18h30
Vendredi : 8h-16h30
Attention, votre centre de documentation ouvrira à 8h30 ce jeudi 23 mai et sera fermé de 12h à 12h30.
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Évaluation de méthodes pour la détection d’organismes modifiés par les nouvelles techniques d’édition de génome / Ludovic Nicolay
Titre : Évaluation de méthodes pour la détection d’organismes modifiés par les nouvelles techniques d’édition de génome Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Ludovic Nicolay, Auteur ; Jonathan Scauflaire, Directeur de publication, rédacteur en chef Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Agronomie Année de publication : 2023 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Résumé : Au cours de cette dernière décennie, la modification génétique des organismes a été révolutionnée par de nouvelles techniques d'édition du génome, comme les Transcription Activator- Like Effector Nucleases (TALENs) et Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR-Cas9). L'essor de ces technologies a soulevé de nouveaux défis en matière de réglementation et de détection. Dans ce contexte complexe et en pleine évolution, le projet GenEdit, coordonné par le CRA-W et financé par le SPF Santé Publique et Sécurité de la chaîne alimentaire et Environnement, vise à développer et à évaluer des approches pour la détection d'organismes génétiquement modifiés par les nouvelles techniques d'édition du génome.
L'objectif de ce projet de fin d'études a été de développer et d'évaluer trois méthodes basées sur l’analyse de l'ADN en travaillant avec des séquences ADN plasmidiques non-mutantes et mutantes présentant des modifications de l’ordre d’un à deux nucléotide(s). Les trois différentes méthodes sont la PCR en temps réel, la PCR-RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism), et la technique HRM (High Resolution Melting). La PCR en temps réel
est la méthode la plus largement utilisée dans la détection des organismes génétiquement modifiés. Elle a été étudiée en utilisant des sondes modifiées (LNA ou MGB) ayant pour but d’améliorer la spécificité des tests. Cependant, Les résultats obtenus ont montré que la sensibilité est le seul critère de performance qui a été atteint pour les séquences testées. Les critères de spécificité et d'efficience n'ont été satisfaits que pour un nombre limité de
séquences, ce qui indique que cette méthode nécessite des améliorations. De plus, les résultats obtenus ont montré des différences en fonction des appareils utilisés. La HRM est une méthode initialement utilisée pour détecter des mutations au sein des individus en analysant les pics de fusion des échantillons. Cette technique a d’abord été étudiée pour qu’elle permettait bien une distinction des séquences et les résultats ont été concluants.
Cependant, le critère de sensibilité de la méthode n’a pas être atteint. La méthode PCR-RFLP est à la base utilisée pour détecter des variations génétiques, en exploitant les différences dans les sites de coupure des enzymes de restriction. La technique a été évaluée afin d’examiner sa capacité à différencier une séquence non mutante d’une séquence mutante portant une modification d’un nucléotide et les résultats ont été positifs. Cependant, le
critère de sensibilité n’a pas été atteint.
Une évaluation de ces méthodes sur de ADN génomique serait nécessaire pour confirmer ces premières observations sur ADN plasmidique. Des analyses sur ADN génomique pourraient être certes plus complexes mais correspondraient à une situation plus réelle. De plus, un travail sur ADN génomique laisserait supposer un risque moins accru de contaminationsNote de contenu : Table des matières
Introduction générale ........................................................................................................................ 6
I. Présentation du lieu de stage ..................................................................................................... 8
II. Introduction bibliographique...................................................................................................... 9
1. Introduction aux organismes génétiquement modifiés ............................................................... 9
1.1. Définition d’un organisme génétiquement modifié ............................................................. 9
2. Nouvelles techniques d'édition du génome ................................................................................ 9
2.1. CRISPR/Cas9 : ....................................................................................................................10
2.2. TALENs ..............................................................................................................................11
3. Applications des nouvelles méthodes d’édition du génome dans l’agronomie ...........................12
3.1. Résistance aux maladies ....................................................................................................12
3.2. Tolérance à la sécheresse et au stress environnemental ....................................................13
3.3. Tolérance aux herbicides ...................................................................................................14
3.4. Amélioration de la qualité nutritionnelle ...........................................................................14
4. Risques liés aux OGM ................................................................................................................15
4.1. Risques environnementaux................................................................................................15
4.2. Risques pour la santé humaine ..........................................................................................15
5. Législation européenne sur les OGM .........................................................................................16
5.1. Mise sur le marché des OGM et dissémination volontaire d'organismes génétiquement
modifiés........................................................................................................................................17
5.2. Étiquetage .........................................................................................................................17
6. Techniques actuelles de détection d’OGM ................................................................................18
6.1. La réaction de polymérisation en chaine (PCR)...................................................................18
6.2. La PCR en temps réel (qPCR) ..............................................................................................21
6.3. La PCR digitale (dPCR) ........................................................................................................22
6.4. La Polymerase Chain Reaction – Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) ...23
6.5. La High-Resolution Melting Analysis (HRM)........................................................................24
6.6. Le séquençage de nouvelle génération (NGS) ....................................................................24
III. Objectifs et stratégies ...............................................................................................................26
IV. Matériel et méthodes ...............................................................................................................27
1. Préparation des plasmides contenant les séquences ADN d’intérêt ...........................................27
1.1. Construction des séquences ..............................................................................................27
1.1.1. Construction des séquences pour le colza ..................................................................27
1.1.2. Construction des séquences pour le soja ....................................................................27
1.2. Réalisation de la PCR .........................................................................................................28
1.3. Réalisation du clonage .......................................................................................................29
1.4. Transformation des bactéries compétentes .......................................................................30
1.5. Extraction des plasmides ...................................................................................................31
1.6. Digestion des plasmides ....................................................................................................32
1.7. Purification des plasmides linéarisés ..................................................................................32
2. Quantification et évaluation de la qualité de l’ADN extrait ........................................................33
3. Dilutions des solutions de plasmides .........................................................................................33
4. Analyse d’ADN par PCR en temps réel .......................................................................................34
4.1. Préparation et réalisation de la PCR en temps réel.............................................................34
4.1.1. Amorces et sondes utilisées .......................................................................................35
5. Analyse d’ADN par HRM (High Resolution Melt) ........................................................................37
5.1. Réactifs et conditions de la HRM .......................................................................................37
6. Analyse d’ADN par PCR-RFLP .....................................................................................................37
6.1. Réalisation de la PCR .........................................................................................................37
6.2. Digestion des produits PCR ................................................................................................38
V. Résultats et discussion ..............................................................................................................39
1. Construction des séquences pour le colza .................................................................................39
1.1. Résultats obtenus ..............................................................................................................39
1.2. Interprétation ....................................................................................................................39
1.3. Résultats de la transformation des bactéries .....................................................................40
2. Analyse d’ADN par PCR en temps réel .......................................................................................41
2.1. Évaluation des critères de performances ...........................................................................41
2.1.1. Critère de spécificité ..................................................................................................41
2.1.2. Critère d’efficience.....................................................................................................49
2.1.3. Critère de sensibilité ..................................................................................................52
2.2. Conclusion .........................................................................................................................53
3. Analyse d’ADN par HRM ............................................................................................................54
3.1. Résultats obtenus ..............................................................................................................54
3.1.1. Test de spécificité ......................................................................................................54
3.1.2. Test de sensibilité sur les séquences lectine WT et lectine-C ......................................55
3.1.3. Test de sensibilité sur les différents mélanges en lectine WT et lectine-C ...................56
3.1.4. Test de sensibilité sur les différents mélanges en Canola WT et Cibus mutant ............57
3.2. Conclusion .........................................................................................................................58
4. Analyse d’ADN par PCR-RFLP .....................................................................................................59
4.1. Résultats obtenus ..............................................................................................................59
4.1.1. Analyse sur des concentrations différentes de Canola WT et Cibus mutant ................59
4.1.2. Analyse sur des mélanges en Canola WT et Cibus mutant ..........................................60
4.2. Conclusion .........................................................................................................................62
Conclusion et perspectives................................................................................................................63
VI. Liste des Abréviations ...............................................................................................................65
VII. Liste des Illustrations.................................................................................................................67
VIII. Liste des Tableaux .....................................................................................................................68
Bibliographie ....................................................................................................................................69
1. Revues scientifiques ..........................................................................................................69
2. Livres .................................................................................................................................83
3. Sites Web ..........................................................................................................................83
Table des annexes.............................................................................................................................85
Annexes ............................................................................................................................................87
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=113381 Évaluation de méthodes pour la détection d’organismes modifiés par les nouvelles techniques d’édition de génome [TFE / Mémoire] / Ludovic Nicolay, Auteur ; Jonathan Scauflaire, Directeur de publication, rédacteur en chef . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Agronomie, 2023.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Langues : Français (fre)
Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Résumé : Au cours de cette dernière décennie, la modification génétique des organismes a été révolutionnée par de nouvelles techniques d'édition du génome, comme les Transcription Activator- Like Effector Nucleases (TALENs) et Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR-Cas9). L'essor de ces technologies a soulevé de nouveaux défis en matière de réglementation et de détection. Dans ce contexte complexe et en pleine évolution, le projet GenEdit, coordonné par le CRA-W et financé par le SPF Santé Publique et Sécurité de la chaîne alimentaire et Environnement, vise à développer et à évaluer des approches pour la détection d'organismes génétiquement modifiés par les nouvelles techniques d'édition du génome.
L'objectif de ce projet de fin d'études a été de développer et d'évaluer trois méthodes basées sur l’analyse de l'ADN en travaillant avec des séquences ADN plasmidiques non-mutantes et mutantes présentant des modifications de l’ordre d’un à deux nucléotide(s). Les trois différentes méthodes sont la PCR en temps réel, la PCR-RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism), et la technique HRM (High Resolution Melting). La PCR en temps réel
est la méthode la plus largement utilisée dans la détection des organismes génétiquement modifiés. Elle a été étudiée en utilisant des sondes modifiées (LNA ou MGB) ayant pour but d’améliorer la spécificité des tests. Cependant, Les résultats obtenus ont montré que la sensibilité est le seul critère de performance qui a été atteint pour les séquences testées. Les critères de spécificité et d'efficience n'ont été satisfaits que pour un nombre limité de
séquences, ce qui indique que cette méthode nécessite des améliorations. De plus, les résultats obtenus ont montré des différences en fonction des appareils utilisés. La HRM est une méthode initialement utilisée pour détecter des mutations au sein des individus en analysant les pics de fusion des échantillons. Cette technique a d’abord été étudiée pour qu’elle permettait bien une distinction des séquences et les résultats ont été concluants.
Cependant, le critère de sensibilité de la méthode n’a pas être atteint. La méthode PCR-RFLP est à la base utilisée pour détecter des variations génétiques, en exploitant les différences dans les sites de coupure des enzymes de restriction. La technique a été évaluée afin d’examiner sa capacité à différencier une séquence non mutante d’une séquence mutante portant une modification d’un nucléotide et les résultats ont été positifs. Cependant, le
critère de sensibilité n’a pas été atteint.
Une évaluation de ces méthodes sur de ADN génomique serait nécessaire pour confirmer ces premières observations sur ADN plasmidique. Des analyses sur ADN génomique pourraient être certes plus complexes mais correspondraient à une situation plus réelle. De plus, un travail sur ADN génomique laisserait supposer un risque moins accru de contaminationsNote de contenu : Table des matières
Introduction générale ........................................................................................................................ 6
I. Présentation du lieu de stage ..................................................................................................... 8
II. Introduction bibliographique...................................................................................................... 9
1. Introduction aux organismes génétiquement modifiés ............................................................... 9
1.1. Définition d’un organisme génétiquement modifié ............................................................. 9
2. Nouvelles techniques d'édition du génome ................................................................................ 9
2.1. CRISPR/Cas9 : ....................................................................................................................10
2.2. TALENs ..............................................................................................................................11
3. Applications des nouvelles méthodes d’édition du génome dans l’agronomie ...........................12
3.1. Résistance aux maladies ....................................................................................................12
3.2. Tolérance à la sécheresse et au stress environnemental ....................................................13
3.3. Tolérance aux herbicides ...................................................................................................14
3.4. Amélioration de la qualité nutritionnelle ...........................................................................14
4. Risques liés aux OGM ................................................................................................................15
4.1. Risques environnementaux................................................................................................15
4.2. Risques pour la santé humaine ..........................................................................................15
5. Législation européenne sur les OGM .........................................................................................16
5.1. Mise sur le marché des OGM et dissémination volontaire d'organismes génétiquement
modifiés........................................................................................................................................17
5.2. Étiquetage .........................................................................................................................17
6. Techniques actuelles de détection d’OGM ................................................................................18
6.1. La réaction de polymérisation en chaine (PCR)...................................................................18
6.2. La PCR en temps réel (qPCR) ..............................................................................................21
6.3. La PCR digitale (dPCR) ........................................................................................................22
6.4. La Polymerase Chain Reaction – Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) ...23
6.5. La High-Resolution Melting Analysis (HRM)........................................................................24
6.6. Le séquençage de nouvelle génération (NGS) ....................................................................24
III. Objectifs et stratégies ...............................................................................................................26
IV. Matériel et méthodes ...............................................................................................................27
1. Préparation des plasmides contenant les séquences ADN d’intérêt ...........................................27
1.1. Construction des séquences ..............................................................................................27
1.1.1. Construction des séquences pour le colza ..................................................................27
1.1.2. Construction des séquences pour le soja ....................................................................27
1.2. Réalisation de la PCR .........................................................................................................28
1.3. Réalisation du clonage .......................................................................................................29
1.4. Transformation des bactéries compétentes .......................................................................30
1.5. Extraction des plasmides ...................................................................................................31
1.6. Digestion des plasmides ....................................................................................................32
1.7. Purification des plasmides linéarisés ..................................................................................32
2. Quantification et évaluation de la qualité de l’ADN extrait ........................................................33
3. Dilutions des solutions de plasmides .........................................................................................33
4. Analyse d’ADN par PCR en temps réel .......................................................................................34
4.1. Préparation et réalisation de la PCR en temps réel.............................................................34
4.1.1. Amorces et sondes utilisées .......................................................................................35
5. Analyse d’ADN par HRM (High Resolution Melt) ........................................................................37
5.1. Réactifs et conditions de la HRM .......................................................................................37
6. Analyse d’ADN par PCR-RFLP .....................................................................................................37
6.1. Réalisation de la PCR .........................................................................................................37
6.2. Digestion des produits PCR ................................................................................................38
V. Résultats et discussion ..............................................................................................................39
1. Construction des séquences pour le colza .................................................................................39
1.1. Résultats obtenus ..............................................................................................................39
1.2. Interprétation ....................................................................................................................39
1.3. Résultats de la transformation des bactéries .....................................................................40
2. Analyse d’ADN par PCR en temps réel .......................................................................................41
2.1. Évaluation des critères de performances ...........................................................................41
2.1.1. Critère de spécificité ..................................................................................................41
2.1.2. Critère d’efficience.....................................................................................................49
2.1.3. Critère de sensibilité ..................................................................................................52
2.2. Conclusion .........................................................................................................................53
3. Analyse d’ADN par HRM ............................................................................................................54
3.1. Résultats obtenus ..............................................................................................................54
3.1.1. Test de spécificité ......................................................................................................54
3.1.2. Test de sensibilité sur les séquences lectine WT et lectine-C ......................................55
3.1.3. Test de sensibilité sur les différents mélanges en lectine WT et lectine-C ...................56
3.1.4. Test de sensibilité sur les différents mélanges en Canola WT et Cibus mutant ............57
3.2. Conclusion .........................................................................................................................58
4. Analyse d’ADN par PCR-RFLP .....................................................................................................59
4.1. Résultats obtenus ..............................................................................................................59
4.1.1. Analyse sur des concentrations différentes de Canola WT et Cibus mutant ................59
4.1.2. Analyse sur des mélanges en Canola WT et Cibus mutant ..........................................60
4.2. Conclusion .........................................................................................................................62
Conclusion et perspectives................................................................................................................63
VI. Liste des Abréviations ...............................................................................................................65
VII. Liste des Illustrations.................................................................................................................67
VIII. Liste des Tableaux .....................................................................................................................68
Bibliographie ....................................................................................................................................69
1. Revues scientifiques ..........................................................................................................69
2. Livres .................................................................................................................................83
3. Sites Web ..........................................................................................................................83
Table des annexes.............................................................................................................................85
Annexes ............................................................................................................................................87
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=113381 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Evaluation des possibilités de différentiation de produits céréaliers biologiques et conventionnels par des techniques de biologie moléculaire / Thibault GABRIEL
Titre : Evaluation des possibilités de différentiation de produits céréaliers biologiques et conventionnels par des techniques de biologie moléculaire Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Thibault GABRIEL, Auteur Année de publication : 2012 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : AGRONOMIE , CRA-W , PHYTOTECHNIE , PRODUITS CEREALIERS BIO ET CONVENTIONNELS / DIFFERENCIATION , FROMENT D'HIVER , BLE TENDRE , BIOLOGIE MOLECULAIRE , PROJET BIOGEOCARBO , FLORE MICROBIENNE DES ECHANTILLONS CEREALIERS , PROFIL MICROBIEN Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65084 Evaluation des possibilités de différentiation de produits céréaliers biologiques et conventionnels par des techniques de biologie moléculaire [TFE / Mémoire] / Thibault GABRIEL, Auteur . - 2012.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Langues : Français (fre)
Mots-clés : AGRONOMIE , CRA-W , PHYTOTECHNIE , PRODUITS CEREALIERS BIO ET CONVENTIONNELS / DIFFERENCIATION , FROMENT D'HIVER , BLE TENDRE , BIOLOGIE MOLECULAIRE , PROJET BIOGEOCARBO , FLORE MICROBIENNE DES ECHANTILLONS CEREALIERS , PROFIL MICROBIEN Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65084 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Evaluation du potentiel allélopathique des orges tunisiennes (Hordeum vulgare ssp. vulgare) vis-à-vis des adventices. / Gaëtan TORDEURS
Titre : Evaluation du potentiel allélopathique des orges tunisiennes (Hordeum vulgare ssp. vulgare) vis-à-vis des adventices. Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Gaëtan TORDEURS, Auteur Année de publication : 2012 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : AGRONOMIE , PHYTOTECHNIE , CEREALES , ORGE , HOREDEUM VULGARE , LUTTE CONTRE ADVENTICES , ALLELOPATHIE , TAUX DE GERMINATION , Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65093 Evaluation du potentiel allélopathique des orges tunisiennes (Hordeum vulgare ssp. vulgare) vis-à-vis des adventices. [TFE / Mémoire] / Gaëtan TORDEURS, Auteur . - 2012.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : AGRONOMIE , PHYTOTECHNIE , CEREALES , ORGE , HOREDEUM VULGARE , LUTTE CONTRE ADVENTICES , ALLELOPATHIE , TAUX DE GERMINATION , Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65093 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Evaluation du potentiel d'un spectromètre portable(le Polychromix-Phazir) pour la prédiction du taux de protééines sur grains entiers de froment / FASBENDER François
Titre : Evaluation du potentiel d'un spectromètre portable(le Polychromix-Phazir) pour la prédiction du taux de protééines sur grains entiers de froment Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : FASBENDER François, Année de publication : 2010 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Mots-clés : AGRO-ALIMENTAIRE CENTRE RECHERCHE AGRONOMIQUE REGION WALLONE FROMENT DOSAGE DE PROTEINES SUR GRAINS SPECTROMETRIE / PROCHE INFRAROUGE POLYCHROMIX PHAZIR TECHNOLOGIE MEMS CALIBRAGE TRANSFERT DONNEES Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=64700 Evaluation du potentiel d'un spectromètre portable(le Polychromix-Phazir) pour la prédiction du taux de protééines sur grains entiers de froment [TFE / Mémoire] / FASBENDER François, . - 2010.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Mots-clés : AGRO-ALIMENTAIRE CENTRE RECHERCHE AGRONOMIQUE REGION WALLONE FROMENT DOSAGE DE PROTEINES SUR GRAINS SPECTROMETRIE / PROCHE INFRAROUGE POLYCHROMIX PHAZIR TECHNOLOGIE MEMS CALIBRAGE TRANSFERT DONNEES Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=64700 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Evaluation de la qualité du lait cru par des techniques rapides et influence sur les produits finis / ANDRE MICHOT
Titre : Evaluation de la qualité du lait cru par des techniques rapides et influence sur les produits finis Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : ANDRE MICHOT, Auteur Année de publication : 2015 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : AGRONOMIE AIBT Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Résumé : Pour l’industrie agro-alimentaire, la qualité est une préoccupation récurrente. Les exigences des consommateurs et des industries de transformation étant toujours plus élevées, les industriels mettent tout en œuvre pour que la qualité de leurs produits soit optimale.
Le lait étant un aliment complexe de par sa composition, sa qualité peut être altérée de plusieurs manières. Le lait est aussi un milieu riche possédant tous les nutriments indispensables au développement microbien. Cette flore microbienne diversifiée influence grandement la qualité du lait. Ainsi, elle peut produire des enzymes protéolytiques et lipolytiques, mais est aussi capable d’acidifier le milieu, en provoquant des modifications importantes au niveau de la stabilité des éléments présents dans le lait.
La qualité des matières premières peut avoir un impact sur celle des produits finis. Aussi, est-il important de déterminer la qualité du lait cru et de mesurer l’impact de dérives éventuelles sur les produits finis.
Dans ce mémoire, ces deux problématiques sont analysées. Ainsi, pour la recherche d’un test destiné à mesurer la qualité du lait cru, avons-nous utilisé différentes méthodes connues de l’industrie laitière. Il nous est apparu intéressant d’essayer d’appliquer le test à la résazurine. N’ayant pas détecté de lait de mauvais qualité, nous n’avons pas pu mettre en évidence l’impact de la mauvaise qualité des matières premières sur les produits finis.
Par contre, le test à la résazurine met en évidence l’altération de la qualité du lait induite par la flore microbienne. Ce qui montre bien l’intérêt de pratiquer ce test, en cas d’échantillons douteux. C’était l’objet même de cette recherche pratique.
Note de contenu : Table des matières
Remerciements ..………………………………………………………………………………………...3
Introduction ............................................................................................................................................................................... 7
1. Contexte général ........................................................................................................................................................... 8
1.1. Présentation du lieu de stage [1], [2] ......................................................................................................... 8
1.1.1. Localisation................................................................................................................................................... 8
1.1.2. Historique ...................................................................................................................................................... 8
1.1.3. Domaine d’activité................................................................................................................................. 9
1.1.4. Description des différents ateliers .................................................................................................... 9
1.2. Composition du lait [3] [4] ........................................................................................................................... 12
1.2.1. Les protéines [5] [6] [7] [8] [9] [10] .............................................................................................. 12
1.2.2. Les lipides [5], [7] [11] ......................................................................................................................... 14
1.2.3. Les glucides [5] [7] ................................................................................................................................. 15
1.2.4. Les vitamines et minéraux [5] [7] .................................................................................................. 15
1.3. Qualité du lait ..................................................................................................................................................... 16
1.3.1. Qualité filière lait (QFL) [1] ............................................................................................................... 16
1.3.2. Appellation d’origine protégée (AOP) [1] ............................................................................... 16
1.3.3. Contrôle du lait à la réception [12] ................................................................................................ 17
1.4. Altération du lait [13] [14] ........................................................................................................................... 18
1.4.1. Les enzymes [15] [16] [17] [18] [19] [20] [21] [22] [23] [24] ......................................... 18
1.4.2. Les micro-organismes [15] [25] [26] ............................................................................................ 19
1.4.3. Les autres facteurs [26] [27] ............................................................................................................. 19
1.5. Produit laitier ..................................................................................................................................................... 20
1.5.1. Le lait UHT [4] [28] [29] ...................................................................................................................... 20
1.5.2. La poudre de lait [30] ........................................................................................................................... 21
2. Objectifs .......................................................................................................................................................................... 22
3. Matériels et méthodes ............................................................................................................................................. 23
3.1. Échantillonnage ................................................................................................................................................. 23
3.2. Analyses microbiologiques .......................................................................................................................... 24
3.2.1. Dénombrement des germes totaux ................................................................................................ 24
3.2.2. Dénombrement des Pseudomonas ................................................................................................ 25
3.2.3. Test à la résazurine [31] [32] [33] ................................................................................................. 25
3.3. Analyses physico-chimiques ....................................................................................................................... 26
3.3.1. Mesure du pH ........................................................................................................................................... 26
3.3.2. Test à l’alcool [34] .............................................................................................................................. 26
3.3.3. Test de Ramsdell [8].............................................................................................................................. 27
3.4. Suivi des échantillons ..................................................................................................................................... 27
4. Résultats ......................................................................................................................................................................... 28
4.1. Résultats bruts ................................................................................................................................................... 28
4.1.1. Laits crus ..................................................................................................................................................... 28
4.1.2. Lait pasteurisé .......................................................................................................................................... 32
4.1.3. Lait UHT ...................................................................................................................................................... 35
4.1.4. Poudre de lait............................................................................................................................................ 36
4.2. Comparaison ....................................................................................................................................................... 37
4.2.1. Lait cru ......................................................................................................................................................... 37
4.2.2. Lait pasteurisé .......................................................................................................................................... 37
4.2.3. Lait UHT ...................................................................................................................................................... 38
4.2.4. Poudre de lait............................................................................................................................................ 38
4.3. Cas particuliers .................................................................................................................................................. 39
4.3.1. Evolution des indicateurs avec le vieillissement du lait ...................................................... 39
4.3.2. Evolution des indicateurs avec le traitement thermique .................................................... 40
4.3.3. Cas de la résazurine ............................................................................................................................... 40
5. Discussion...................................................................................................................................................................... 42
Conclusion ................................................................................................................................................................................ 47
Liste des figures, tableaux et graphiques .................................................................................................................. 48
Lexique....................................................................................................................................................................................... 50
Bibliographie .......................................................................................................................................................................... 52
Annexes ..................................................................................................................................................................................... 55Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65602 Evaluation de la qualité du lait cru par des techniques rapides et influence sur les produits finis [TFE / Mémoire] / ANDRE MICHOT, Auteur . - 2015.
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Langues : Français (fre)
Mots-clés : AGRONOMIE AIBT Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Résumé : Pour l’industrie agro-alimentaire, la qualité est une préoccupation récurrente. Les exigences des consommateurs et des industries de transformation étant toujours plus élevées, les industriels mettent tout en œuvre pour que la qualité de leurs produits soit optimale.
Le lait étant un aliment complexe de par sa composition, sa qualité peut être altérée de plusieurs manières. Le lait est aussi un milieu riche possédant tous les nutriments indispensables au développement microbien. Cette flore microbienne diversifiée influence grandement la qualité du lait. Ainsi, elle peut produire des enzymes protéolytiques et lipolytiques, mais est aussi capable d’acidifier le milieu, en provoquant des modifications importantes au niveau de la stabilité des éléments présents dans le lait.
La qualité des matières premières peut avoir un impact sur celle des produits finis. Aussi, est-il important de déterminer la qualité du lait cru et de mesurer l’impact de dérives éventuelles sur les produits finis.
Dans ce mémoire, ces deux problématiques sont analysées. Ainsi, pour la recherche d’un test destiné à mesurer la qualité du lait cru, avons-nous utilisé différentes méthodes connues de l’industrie laitière. Il nous est apparu intéressant d’essayer d’appliquer le test à la résazurine. N’ayant pas détecté de lait de mauvais qualité, nous n’avons pas pu mettre en évidence l’impact de la mauvaise qualité des matières premières sur les produits finis.
Par contre, le test à la résazurine met en évidence l’altération de la qualité du lait induite par la flore microbienne. Ce qui montre bien l’intérêt de pratiquer ce test, en cas d’échantillons douteux. C’était l’objet même de cette recherche pratique.
Note de contenu : Table des matières
Remerciements ..………………………………………………………………………………………...3
Introduction ............................................................................................................................................................................... 7
1. Contexte général ........................................................................................................................................................... 8
1.1. Présentation du lieu de stage [1], [2] ......................................................................................................... 8
1.1.1. Localisation................................................................................................................................................... 8
1.1.2. Historique ...................................................................................................................................................... 8
1.1.3. Domaine d’activité................................................................................................................................. 9
1.1.4. Description des différents ateliers .................................................................................................... 9
1.2. Composition du lait [3] [4] ........................................................................................................................... 12
1.2.1. Les protéines [5] [6] [7] [8] [9] [10] .............................................................................................. 12
1.2.2. Les lipides [5], [7] [11] ......................................................................................................................... 14
1.2.3. Les glucides [5] [7] ................................................................................................................................. 15
1.2.4. Les vitamines et minéraux [5] [7] .................................................................................................. 15
1.3. Qualité du lait ..................................................................................................................................................... 16
1.3.1. Qualité filière lait (QFL) [1] ............................................................................................................... 16
1.3.2. Appellation d’origine protégée (AOP) [1] ............................................................................... 16
1.3.3. Contrôle du lait à la réception [12] ................................................................................................ 17
1.4. Altération du lait [13] [14] ........................................................................................................................... 18
1.4.1. Les enzymes [15] [16] [17] [18] [19] [20] [21] [22] [23] [24] ......................................... 18
1.4.2. Les micro-organismes [15] [25] [26] ............................................................................................ 19
1.4.3. Les autres facteurs [26] [27] ............................................................................................................. 19
1.5. Produit laitier ..................................................................................................................................................... 20
1.5.1. Le lait UHT [4] [28] [29] ...................................................................................................................... 20
1.5.2. La poudre de lait [30] ........................................................................................................................... 21
2. Objectifs .......................................................................................................................................................................... 22
3. Matériels et méthodes ............................................................................................................................................. 23
3.1. Échantillonnage ................................................................................................................................................. 23
3.2. Analyses microbiologiques .......................................................................................................................... 24
3.2.1. Dénombrement des germes totaux ................................................................................................ 24
3.2.2. Dénombrement des Pseudomonas ................................................................................................ 25
3.2.3. Test à la résazurine [31] [32] [33] ................................................................................................. 25
3.3. Analyses physico-chimiques ....................................................................................................................... 26
3.3.1. Mesure du pH ........................................................................................................................................... 26
3.3.2. Test à l’alcool [34] .............................................................................................................................. 26
3.3.3. Test de Ramsdell [8].............................................................................................................................. 27
3.4. Suivi des échantillons ..................................................................................................................................... 27
4. Résultats ......................................................................................................................................................................... 28
4.1. Résultats bruts ................................................................................................................................................... 28
4.1.1. Laits crus ..................................................................................................................................................... 28
4.1.2. Lait pasteurisé .......................................................................................................................................... 32
4.1.3. Lait UHT ...................................................................................................................................................... 35
4.1.4. Poudre de lait............................................................................................................................................ 36
4.2. Comparaison ....................................................................................................................................................... 37
4.2.1. Lait cru ......................................................................................................................................................... 37
4.2.2. Lait pasteurisé .......................................................................................................................................... 37
4.2.3. Lait UHT ...................................................................................................................................................... 38
4.2.4. Poudre de lait............................................................................................................................................ 38
4.3. Cas particuliers .................................................................................................................................................. 39
4.3.1. Evolution des indicateurs avec le vieillissement du lait ...................................................... 39
4.3.2. Evolution des indicateurs avec le traitement thermique .................................................... 40
4.3.3. Cas de la résazurine ............................................................................................................................... 40
5. Discussion...................................................................................................................................................................... 42
Conclusion ................................................................................................................................................................................ 47
Liste des figures, tableaux et graphiques .................................................................................................................. 48
Lexique....................................................................................................................................................................................... 50
Bibliographie .......................................................................................................................................................................... 52
Annexes ..................................................................................................................................................................................... 55Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65602 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Evaluation des qualités industrielles des variétés de blé tendre (Triticum aestivum sp.) cultivées en Belgique et identification des variétés biscuitières / Catherine DUJARDIN
PermalinkEvaluation de la zéolite comme support adsorbant de l’azote inorganique en aquaculture / Roman Renotte
PermalinkExpérimentation de techniques intégrées de gestion et de restauration de la fertilité des sols au Sénégal. / Alexia Genco
PermalinkExploration des possibilités du dosage de l’acide trifluoroacétique par spectroscopie UV dans le cadre du contrôle de qualité d’un nouveau traceur radiopharmaceutique / Robin Van Naemen
PermalinkFormulation améliorée d'un biocatalyseur pour l'élimination en continu du bisphénol A en réacteur membranaire / Nicolas MAZY
PermalinkFractionnement de l'huile de palme et caractérisation des fractions obtenues / DJOUNDA MANFOUO Rebecca
PermalinkGestion de la problématique des allergènes élargit à une unité de production et de tranchage de produit de charcuterie. / NATHAN VANDEN BRIELE
PermalinkGestion de la qualité au laboratoire de Villers et recherche d’alternatives au dosage du chlore / Anne Quataert
PermalinkGuide pratique d'agroécologie appliquée au Sénégal / Guillaume NEVE
PermalinkIdentification d’espèces animales dans des produits alimentaires par PCR en temps réel / Maxime GUADAGNIN
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