Centre de Documentation Campus Montignies
Horaires :
Lundi : 8h-18h30
Mardi : 8h-17h30
Mercredi 9h-16h30
Jeudi : 8h30-18h30
Vendredi : 8h30-12h30 et 13h-14h30
Votre centre de documentation sera exceptionnellement fermé de 12h30 à 13h ce lundi 18 novembre.
Egalement, il sera fermé de 12h30 à 13h30 ce mercredi 20 novembre.
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Détail de l'auteur
Auteur Franck KONCHECHOU |
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Titre : Analyse par les systèmes biomimétiques des interactions membranaires des oxylipines impliquées dans la réponse aux stress des plantes. Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Franck KONCHECHOU, Auteur Année de publication : 2015 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale faculté de Gembloux Gembloux Agro-Bio Tech Planrtes : stress oxylipines Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Résumé
L’utilisation des pesticides et engrais chimiques permet de protéger les plantes contre les
attaques nuisibles tout en améliorant leur croissance. Bien que d’un point de vue économique,
l’approche soit rentable, ces procédés ont un impact négatif sur l’environnement, c’est la
raison pour laquelle de nombreux pays aspirent vers une réduction de leur utilisation. Dans ce
contexte, une orientation vers des alternatives biologiques efficaces et durables s’avère être
une solution. Plusieurs biopesticides ont été identifiés comme ayant un effet protecteur sur les
plantes. Certaines de ces molécules vont agir directement sur l’agent pathogène, tandis que,
d’autres vont stimuler les mécanismes de défense de la plante. Ces dernières sont appelées
«éliciteurs». Ce travail s’inscrit dans le projet FIELD (Finding Interesting Elicitors LipiDs
Projet), dont un des buts est la compréhension des mécanismes moléculaires impliqués dans la
perception par les cellules végétales d’éliciteurs lipidiques d’origine biologique afin de
développer une nouvelle gamme de biopesticides plus respectueux de l’environnement.
Les oxylipines sont une des familles d’éliciteur étudiées dans ce projet.
Le but de ce travail est l’obtention par synthèse enzymatique et la caractérisation des
interactions membranaires du 13-HPOD qui est un métabolite intermédiaire de la cascade
métabolique de synthèse des oxylipines. Pour cela, nous avons réalisé une biosynthèse
enzymatique du 13-HPOD à l’aide de lipoxygénase (LOX) suivant un protocole développé au
laboratoire. La molécule a été obtenue avec une grande pureté après optimisation du protocole
de purification. Ensuite, une caractérisation physico-chimique du 13HPOD a été effectuée par
des méthodes spectrales (IR et UV) et interfaciales (techniques de Langmuir). En utilisant des
systèmes biomimétiques de la membrane, monocouche et liposome, les interactions du 13-
HPOD avec la membrane plasmique des végétaux ont été étudiées par la technique de
Langmuir et par FT-IR. Les résultats montrent que le 13-HPOD est capable d’interagir avec
un phospholipide ou un stérol. Une implication des chaines alkyles des phospholipides et de
leur groupement phosphate dans l’interaction avec 13-HPOD a été mise en évidence.
En parallèle, une mise au point de protocoles d’extraction à grande échelle des arabidopsides
(galacto-oxylipines) a été effectuée. La plante Arabidopsis thaliana a été utilisée comme
modèle. Le but de cette partie étant de pouvoir disposer des arabidopsides en suffisance pour
les analyses de biophysique.Note de contenu : Table des matières
Liste des abréviations 6
Introduction 7
1. Présentation de Gembloux Agro-Bio Tech 9
2. Étude bibliographique 10
2.1. Les oxylipines. 10
2.1.1. Rôles et implications. 10
2.1.2. Les voies de biosynthèse des oxylipines. 11
2.1.3. Les arabidopsides 14
2.2. L’élicitation des plantes 16
2.3. La membrane plasmique 17
2.3.1. Structure et composition: 17
2.3.2. Transitions de phase des lipides 20
2.4. Les modèles membranaires biomimétique 22
2.4.1. Les monocouches de lipides 23
2.4.2. Les liposomes 23
2.4.3. Les Bicouches supportées 24
2.4.4. Les limites des modèles membranaires. 24
Objectifs et stratégies 26
Matériels et méthodes 28
1. Origines des réactifs utilisés 28
2. Obtention des molécules 29
2.1. Synthèse et purification du 13-HPOD 29
2.1.1. Principe 29
2.1.2. Procédure 29
2.2. Culture d’Arabidopsis thaliana et extraction des arabidopsides. 31
2.2.1. Culture 31
2.2.2. Extraction des arabidopsides 31
3. Caractérisation physico-chimique du 13-HPOD 35
3.1. Balance à film 35
3.1.1. Principe 35
3.1.2. Obtention des isothermes de compression 38
Matériels et produits 38
3.2. FT-IR ou spectroscopie infrarouge à transformée de fourrier 40
3.2.1. Principe 40
3.2.2. Préparation des MLV 42
3.2.3. Caractérisation physico-chimique du 13-HPOD par FTIR 43
4. Analyse des extractions d’arabidopsides 44
4.1. Analyse des extractions d’arabidopside en HPLC 44
4.2. Analyse des extractions en LC-MS 45
Résultats et discussions 47
1. Obtention des molécules 47
1.1. Synthèse du 13-HPOD 47
1.2. Développement d’une méthode d’extraction des arabidopsides 49
2. Caractérisation chimique et biophysique du 13HPOD 51
2.1. Spectre UV 51
2.2. Spectre IR 51
2.3. Comportement interfacial du 13 HPOD : Isotherme de compression 52
2.4. Adsorption à une interface eau-air au moyen de la Balance à film 54
2.5. Interaction du 13-HPOD dans un système monocouche lipidique 56
2.5.1. Isotherme de compression du 13-HPOD avec le PLPC dans un système biomimétique du type monocouche 56
2.5.2. Analyses thermodynamiques des isothermes des mélanges en monocouche 57
2.6. Analyse du 13-HPOD dans un système biomimétique du type bicouche ( MLV) 59
2.6.1. Interactions membranaires entre le 13-HPOD et le PLPC dans un système biomimétique du type bicouche ( MLV) 59
2.6.2. Interactions membranaires entre le 13-HPOD, le beta-sitostérol et le PLPC dans un système biomimétique du type bicouche (MLV) 62
Conclusions et perspectives 67
Bibliographie 71
Listes des annexes 75
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65359 Analyse par les systèmes biomimétiques des interactions membranaires des oxylipines impliquées dans la réponse aux stress des plantes. [TFE / Mémoire] / Franck KONCHECHOU, Auteur . - 2015.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale faculté de Gembloux Gembloux Agro-Bio Tech Planrtes : stress oxylipines Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Résumé
L’utilisation des pesticides et engrais chimiques permet de protéger les plantes contre les
attaques nuisibles tout en améliorant leur croissance. Bien que d’un point de vue économique,
l’approche soit rentable, ces procédés ont un impact négatif sur l’environnement, c’est la
raison pour laquelle de nombreux pays aspirent vers une réduction de leur utilisation. Dans ce
contexte, une orientation vers des alternatives biologiques efficaces et durables s’avère être
une solution. Plusieurs biopesticides ont été identifiés comme ayant un effet protecteur sur les
plantes. Certaines de ces molécules vont agir directement sur l’agent pathogène, tandis que,
d’autres vont stimuler les mécanismes de défense de la plante. Ces dernières sont appelées
«éliciteurs». Ce travail s’inscrit dans le projet FIELD (Finding Interesting Elicitors LipiDs
Projet), dont un des buts est la compréhension des mécanismes moléculaires impliqués dans la
perception par les cellules végétales d’éliciteurs lipidiques d’origine biologique afin de
développer une nouvelle gamme de biopesticides plus respectueux de l’environnement.
Les oxylipines sont une des familles d’éliciteur étudiées dans ce projet.
Le but de ce travail est l’obtention par synthèse enzymatique et la caractérisation des
interactions membranaires du 13-HPOD qui est un métabolite intermédiaire de la cascade
métabolique de synthèse des oxylipines. Pour cela, nous avons réalisé une biosynthèse
enzymatique du 13-HPOD à l’aide de lipoxygénase (LOX) suivant un protocole développé au
laboratoire. La molécule a été obtenue avec une grande pureté après optimisation du protocole
de purification. Ensuite, une caractérisation physico-chimique du 13HPOD a été effectuée par
des méthodes spectrales (IR et UV) et interfaciales (techniques de Langmuir). En utilisant des
systèmes biomimétiques de la membrane, monocouche et liposome, les interactions du 13-
HPOD avec la membrane plasmique des végétaux ont été étudiées par la technique de
Langmuir et par FT-IR. Les résultats montrent que le 13-HPOD est capable d’interagir avec
un phospholipide ou un stérol. Une implication des chaines alkyles des phospholipides et de
leur groupement phosphate dans l’interaction avec 13-HPOD a été mise en évidence.
En parallèle, une mise au point de protocoles d’extraction à grande échelle des arabidopsides
(galacto-oxylipines) a été effectuée. La plante Arabidopsis thaliana a été utilisée comme
modèle. Le but de cette partie étant de pouvoir disposer des arabidopsides en suffisance pour
les analyses de biophysique.Note de contenu : Table des matières
Liste des abréviations 6
Introduction 7
1. Présentation de Gembloux Agro-Bio Tech 9
2. Étude bibliographique 10
2.1. Les oxylipines. 10
2.1.1. Rôles et implications. 10
2.1.2. Les voies de biosynthèse des oxylipines. 11
2.1.3. Les arabidopsides 14
2.2. L’élicitation des plantes 16
2.3. La membrane plasmique 17
2.3.1. Structure et composition: 17
2.3.2. Transitions de phase des lipides 20
2.4. Les modèles membranaires biomimétique 22
2.4.1. Les monocouches de lipides 23
2.4.2. Les liposomes 23
2.4.3. Les Bicouches supportées 24
2.4.4. Les limites des modèles membranaires. 24
Objectifs et stratégies 26
Matériels et méthodes 28
1. Origines des réactifs utilisés 28
2. Obtention des molécules 29
2.1. Synthèse et purification du 13-HPOD 29
2.1.1. Principe 29
2.1.2. Procédure 29
2.2. Culture d’Arabidopsis thaliana et extraction des arabidopsides. 31
2.2.1. Culture 31
2.2.2. Extraction des arabidopsides 31
3. Caractérisation physico-chimique du 13-HPOD 35
3.1. Balance à film 35
3.1.1. Principe 35
3.1.2. Obtention des isothermes de compression 38
Matériels et produits 38
3.2. FT-IR ou spectroscopie infrarouge à transformée de fourrier 40
3.2.1. Principe 40
3.2.2. Préparation des MLV 42
3.2.3. Caractérisation physico-chimique du 13-HPOD par FTIR 43
4. Analyse des extractions d’arabidopsides 44
4.1. Analyse des extractions d’arabidopside en HPLC 44
4.2. Analyse des extractions en LC-MS 45
Résultats et discussions 47
1. Obtention des molécules 47
1.1. Synthèse du 13-HPOD 47
1.2. Développement d’une méthode d’extraction des arabidopsides 49
2. Caractérisation chimique et biophysique du 13HPOD 51
2.1. Spectre UV 51
2.2. Spectre IR 51
2.3. Comportement interfacial du 13 HPOD : Isotherme de compression 52
2.4. Adsorption à une interface eau-air au moyen de la Balance à film 54
2.5. Interaction du 13-HPOD dans un système monocouche lipidique 56
2.5.1. Isotherme de compression du 13-HPOD avec le PLPC dans un système biomimétique du type monocouche 56
2.5.2. Analyses thermodynamiques des isothermes des mélanges en monocouche 57
2.6. Analyse du 13-HPOD dans un système biomimétique du type bicouche ( MLV) 59
2.6.1. Interactions membranaires entre le 13-HPOD et le PLPC dans un système biomimétique du type bicouche ( MLV) 59
2.6.2. Interactions membranaires entre le 13-HPOD, le beta-sitostérol et le PLPC dans un système biomimétique du type bicouche (MLV) 62
Conclusions et perspectives 67
Bibliographie 71
Listes des annexes 75
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65359 Exemplaires
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Titre : Etude de la régulation transcriptionnelle des gènes Abc transporteurs en réponse à l’invalidation du gène Abcb5 chez les souris Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Franck KONCHECHOU, Auteur Année de publication : 2014 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : BIOLOGIE MÉDICALE UNIVERSITE DE NAMUR REGULATION TRANSCRIPTIONNELLE GENES ABC TRANSPORTEURS INVALIDATION GENE ABCB5 SOURIS MELANOME TRAITEMENT MECANISME DE RESISTANCE ATP-BINDING CASSETTE NANODROP SPECTRAMAXI3 ELECTROPHORESE ARN BIOANALYZER RT-QPCR GENOTYPAGE EXTRACTION DOSAGE INTEGRITE Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65397 Etude de la régulation transcriptionnelle des gènes Abc transporteurs en réponse à l’invalidation du gène Abcb5 chez les souris [TFE / Mémoire] / Franck KONCHECHOU, Auteur . - 2014.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
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Mots-clés : BIOLOGIE MÉDICALE UNIVERSITE DE NAMUR REGULATION TRANSCRIPTIONNELLE GENES ABC TRANSPORTEURS INVALIDATION GENE ABCB5 SOURIS MELANOME TRAITEMENT MECANISME DE RESISTANCE ATP-BINDING CASSETTE NANODROP SPECTRAMAXI3 ELECTROPHORESE ARN BIOANALYZER RT-QPCR GENOTYPAGE EXTRACTION DOSAGE INTEGRITE Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65397 Exemplaires
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