Centre de Documentation Campus Montignies
Horaires :
Lundi : 8h-18h30
Mardi : 8h-18h30
Mercredi 9h-16h30
Jeudi : 8h-18h30
Vendredi : 8h-16h30
Attention, votre centre de documentation sera fermé du 27/04 au 12/05 inclus.
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Mise au point et optimisation d’un protocole de chimiogramme sur cellules primaires de leucémies / PERRINE BOLAND
Titre : Mise au point et optimisation d’un protocole de chimiogramme sur cellules primaires de leucémies Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : PERRINE BOLAND, Année de publication : 2016 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : Biologie médicale Centre de Recherche en Cancérologie de Marseille hématopoïèse leucémie aigüe traitement culture cellulaire décongélation coculture activité cytotoxique Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières
Remerciements
Présentation du lieu de stage
Introduction générale ............................................................................................................................. 10
I. Contexte général ................................................................................................................................ 12
1. Qu’est-ce que l’hématopoïèse ? ............................................................................................. 12
2. Leucémie aigüe ...................................................................................................................... 13
3. Traitement de la leucémie aigüe ............................................................................................ 15
II. Objectifs et stratégies ........................................................................................................................ 18
III. Matériels et méthodes ...................................................................................................................... 20
Matériel ............................................................................................................................................. 20
1. Appareillage, réactifs et milieux ............................................................................................ 20
2. Culture Cellulaire .................................................................................................................. 21
3. Protocole de décongélation.................................................................................................... 22
Méthode ............................................................................................................................................. 23
Objectif 1 : Optimisation des conditions de culture de cellules primaires issues de patients leucémiques ....................................................................................................................................... 23
1. Tests de milieux de culture .................................................................................................... 23
2. Coculture sur cellules stromales ............................................................................................ 29
Objectif n° 2 : Mise au point du passage en format 384 puits pour la réalisation de chémogrammes ........................................................................................................................................................... 33
1. Comparaison des plaques 384 puits noire et blanche ............................................................ 33
2. Comparaison de l’activité cytotoxique de l’AraC sur lignées leucémiques et donneurs primaires en plaque 384 puits noire et blanche ............................................................................. 34
IV. Résultats .......................................................................................................................................... 38
Objectif n°1 : Optimisation des conditions de culture ....................................................................... 38
1. Mononuclear Cell Medium.................................................................................................... 39
2. IMDM 20% FCS et IMDM 20% FCS complémenté de cytokines ....................................... 41
3. Coculture ............................................................................................................................... 49
Objectif n° 2 : Mise au point du passage en format 384 puits pour la réalisation de chemogrammes ........................................................................................................................................................... 53
1. Comparaison des plaques 384 puits blanche et noire ............................................................ 53
2. Comparaison de l’activité cytotoxique de l’AraC sur lignées leucémiques et donneurs primaires en plaque 384 puits noire et blanche ............................................................................. 56
Discussion et perspectives ..................................................................................................................... 60
Bibliographie ......................................................................................................................................... 64
AnnexePermalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65663 Mise au point et optimisation d’un protocole de chimiogramme sur cellules primaires de leucémies [TFE / Mémoire] / PERRINE BOLAND, . - 2016.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : Biologie médicale Centre de Recherche en Cancérologie de Marseille hématopoïèse leucémie aigüe traitement culture cellulaire décongélation coculture activité cytotoxique Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières
Remerciements
Présentation du lieu de stage
Introduction générale ............................................................................................................................. 10
I. Contexte général ................................................................................................................................ 12
1. Qu’est-ce que l’hématopoïèse ? ............................................................................................. 12
2. Leucémie aigüe ...................................................................................................................... 13
3. Traitement de la leucémie aigüe ............................................................................................ 15
II. Objectifs et stratégies ........................................................................................................................ 18
III. Matériels et méthodes ...................................................................................................................... 20
Matériel ............................................................................................................................................. 20
1. Appareillage, réactifs et milieux ............................................................................................ 20
2. Culture Cellulaire .................................................................................................................. 21
3. Protocole de décongélation.................................................................................................... 22
Méthode ............................................................................................................................................. 23
Objectif 1 : Optimisation des conditions de culture de cellules primaires issues de patients leucémiques ....................................................................................................................................... 23
1. Tests de milieux de culture .................................................................................................... 23
2. Coculture sur cellules stromales ............................................................................................ 29
Objectif n° 2 : Mise au point du passage en format 384 puits pour la réalisation de chémogrammes ........................................................................................................................................................... 33
1. Comparaison des plaques 384 puits noire et blanche ............................................................ 33
2. Comparaison de l’activité cytotoxique de l’AraC sur lignées leucémiques et donneurs primaires en plaque 384 puits noire et blanche ............................................................................. 34
IV. Résultats .......................................................................................................................................... 38
Objectif n°1 : Optimisation des conditions de culture ....................................................................... 38
1. Mononuclear Cell Medium.................................................................................................... 39
2. IMDM 20% FCS et IMDM 20% FCS complémenté de cytokines ....................................... 41
3. Coculture ............................................................................................................................... 49
Objectif n° 2 : Mise au point du passage en format 384 puits pour la réalisation de chemogrammes ........................................................................................................................................................... 53
1. Comparaison des plaques 384 puits blanche et noire ............................................................ 53
2. Comparaison de l’activité cytotoxique de l’AraC sur lignées leucémiques et donneurs primaires en plaque 384 puits noire et blanche ............................................................................. 56
Discussion et perspectives ..................................................................................................................... 60
Bibliographie ......................................................................................................................................... 64
AnnexePermalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65663 Exemplaires
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