Centre de Documentation Campus Montignies
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Lundi : 8h-18h30
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Mercredi 9h-16h30
Jeudi : 8h-18h30
Vendredi : 8h-16h30
Attention, votre centre de documentation sera fermé du 27/04 au 12/05 inclus.
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Auteur Samia Oulhaj |
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L’implémentation du dosage de la CDT par l’électrophorèse capillaire / Samia Oulhaj
Titre : L’implémentation du dosage de la CDT par l’électrophorèse capillaire Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Samia Oulhaj, Auteur ; Jérôme Cornil, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2022 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : CDT IFCC transferrine standardisation implémentation électrophorèse capillaire Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’intérêt principal de ce travail de fin d’étude est l’implémentation du dosage de la CDT par électrophorèse capillaire dans le laboratoire su CHRSM du site de la Sambre. La CDT ( carbohydrate-deficient transferrine) est un marqueur d’éthylisme chronique, avec une meilleur sensibilité et spécificité que les autre marqueurs biologiques historiques citée dans ce travail. La consommation d’alcool altère la métabolisation de la transferrine, en altérant des enzymes hépatique, le pourcentage en CDT se voit alors augmenté. Le dosage de la CDT est prescrit pour détecter une consommation précoce d’un éthylisme chronique pour prévenir des complication hépatique par exemple, le suivi de sevrage à l’alcool, dans la médecine de travail, comme pour l’obtention d’un certificat de pilote d’avion, ou encore la réattribution ou suspension du permis de conduite. La standardisation mis en place par l’IFCC, ne contribue pas qu’à l’étalonnage du dosage, mais aussi à la redéfinition de CDT, seul la disialotransferrine sera dosée, l’asialotransferrine ne sera plus compris dans la valeurs de CDT due à son instabilité. La standardisation du dosage de la CDT montre d’excellent résultats de répétabilité et de reproductibilité par rapport aux résultats du dosage non calibrée. Les limites de dosage manipulations ont mis en évidence l’interférence par le pics monoclonaux ou polyclonaux rencontrés lors de électrophorèses des protéines sériques. Note de contenu : Présentation du lieu de stage ............................................................................................. 4
Introduction générale......................................................................................................... 5
Contexte général ................................................................................................................ 6
1. Chapitre 1 : La CDT .............................................................................................................. 6
1.1. Consommation d’alcool .................................................................................................................. 6
1.2. L’alcool ............................................................................................................................................ 7
1.3. Marqueurs biologiques d’éthylisme ............................................................................................... 8
1.4. La Transferrine et ses isoformes ................................................................................................... 10
1.5. L’alcool et la transferrine .............................................................................................................. 12
1.6. La CDT ........................................................................................................................................... 13
2. Chapitre 2 : L’électrophorèse capillaire ............................................................................. 25
2.1. Principe ......................................................................................................................................... 25
2.2. Composition .................................................................................................................................. 26
2.3. Exemples de dosage ...................................................................................................................... 27
Objectifs et stratégie ........................................................................................................ 31
Matériels et méthodes ..................................................................................................... 32
1. Réactifs ............................................................................................................................. 32
1.1. Kit capillarys® CDT ......................................................................................................................... 32
1.2. Autres réactifs, contrôles et calibreur........................................................................................... 33
2. Matériels et appareils ....................................................................................................... 33
2.1. Matériels ....................................................................................................................................... 33
2.2. Appareil ......................................................................................................................................... 34
3. Échantillons ...................................................................................................................... 35
4. Implémentation du dosage ............................................................................................... 35
5. Calibration ........................................................................................................................ 36
6. Contrôle normal et pathologique ...................................................................................... 37
7. La fidélité .......................................................................................................................... 37
8. La répétabilité ................................................................................................................... 38
9. La reproductibilité ............................................................................................................. 38
10. La stabilité .................................................................................................................... 38
11. Interférences du dosage ................................................................................................ 39
11.1. L’hémolyse .................................................................................................................................... 39
11.2. Variantes génétiques de la transferrine ........................................................................................ 39
11.3. Lésions hépatiques (maladie grave en phase terminale). ............................................................. 39
11.4. Les composants monoclonaux ou fraction polyclonale élevée ..................................................... 40
Résultats .......................................................................................................................... 41
1. Calibration ........................................................................................................................ 41
1.1. Calibration à l’installation ............................................................................................................. 41
1.2. Calibration changement de lot...................................................................................................... 41
3
2. Évaluation de la répétabilité ............................................................................................. 42
2.1. Répétabilité .................................................................................................................. 42
2.2. Répétabilité du POOL bas ............................................................................................................. 43
2.3. Répétabilité du POOL intermédiaire ............................................................................................ 44
2.4. Répétabilité du POOL intermédiaire ............................................................................................ 45
2.5. Répétabilité du POOL haut ........................................................................................................... 46
2.6. Répétabilité du POOL haut ........................................................................................................... 47
3. Évaluation de la reproductibilité ....................................................................................... 48
3.1. Reproductibilité « Contrôle normal » ........................................................................................... 48
3.2. Reproductibilité « Contrôle pathologique » ................................................................................. 49
3.3. Reproductibilité « contrôle normal » inter lot .............................................................................. 50
4. Stabilité du sérum pour le dosage de la CDT ...................................................................... 51
5. Interférences .................................................................................................................... 54
5.1. Variants transferrines ................................................................................................................... 54
5.2. L’hémolyse .................................................................................................................................... 55
5.3. Analyse d’interférences apporté par les blocs beta- gamma des électrogrammes des protéines
sérique 56
5.4. Analyse d’interférences apporté par des pics monoclonaux ou polyclonaux des électrogrammes
des protéines sérique .................................................................................................................................. 57
6. Comparaison des résultats avec le laboratoire sous-traitant. ............................................ 60
7. Résultats d’échantillon du laboratoire partenaire ............................................................. 62
8. Exemples de dosage de CDT de patients en urgence .......................................................... 62
9. Suivi de patient éthylique lors d’une hospitalisation ......................................................... 63
Discussion ........................................................................................................................ 64
1. La calibration (Point 1 page 40) ......................................................................................... 64
2. Évaluation de la répétabilité et la reproductivité de la CDT et CDT-IFCC (Point 2 et 3 pages
41-46 et 47-49) .......................................................................................................................... 65
4.1. Variants transferrine (Point 5.1 pages 53) .................................................................................... 67
4.2. L’hémolyse. (Point 5.2 pages 54) .................................................................................................. 67
4.3. Analyse d’interférences apporté par des blocs beta-gamma des électrogrammes des protéines
sérique (Point 5.3 page 55) ......................................................................................................................... 69
5. Comparaison des résultats avec le laboratoire sous-traitant. (Point 6 pages 59-60) ........... 70
6. Comparaison des résultats avec le laboratoire partenaire. (Point 7 des résultats à la page
61) 71
7. Dosage de la CDT de patients en urgences. (Point 8 des résultats à la page 61) ................. 71
8. Suivi de patient éthylique lors d’une hospitalisation (Point 9 des résultats de la page 62) . 71
Conclusion........................................................................................................................ 73
Liste des figures ............................................................................................................... 74
Liste des tables ................................................................................................................. 76
Bibliographie ................................................................................................................... 77
Annexes ........................................................................................................................... 80
Résumé ............................................................................................................................ 83Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=105748 L’implémentation du dosage de la CDT par l’électrophorèse capillaire [TFE / Mémoire] / Samia Oulhaj, Auteur ; Jérôme Cornil, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2022.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Langues : Français (fre)
Mots-clés : CDT IFCC transferrine standardisation implémentation électrophorèse capillaire Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’intérêt principal de ce travail de fin d’étude est l’implémentation du dosage de la CDT par électrophorèse capillaire dans le laboratoire su CHRSM du site de la Sambre. La CDT ( carbohydrate-deficient transferrine) est un marqueur d’éthylisme chronique, avec une meilleur sensibilité et spécificité que les autre marqueurs biologiques historiques citée dans ce travail. La consommation d’alcool altère la métabolisation de la transferrine, en altérant des enzymes hépatique, le pourcentage en CDT se voit alors augmenté. Le dosage de la CDT est prescrit pour détecter une consommation précoce d’un éthylisme chronique pour prévenir des complication hépatique par exemple, le suivi de sevrage à l’alcool, dans la médecine de travail, comme pour l’obtention d’un certificat de pilote d’avion, ou encore la réattribution ou suspension du permis de conduite. La standardisation mis en place par l’IFCC, ne contribue pas qu’à l’étalonnage du dosage, mais aussi à la redéfinition de CDT, seul la disialotransferrine sera dosée, l’asialotransferrine ne sera plus compris dans la valeurs de CDT due à son instabilité. La standardisation du dosage de la CDT montre d’excellent résultats de répétabilité et de reproductibilité par rapport aux résultats du dosage non calibrée. Les limites de dosage manipulations ont mis en évidence l’interférence par le pics monoclonaux ou polyclonaux rencontrés lors de électrophorèses des protéines sériques. Note de contenu : Présentation du lieu de stage ............................................................................................. 4
Introduction générale......................................................................................................... 5
Contexte général ................................................................................................................ 6
1. Chapitre 1 : La CDT .............................................................................................................. 6
1.1. Consommation d’alcool .................................................................................................................. 6
1.2. L’alcool ............................................................................................................................................ 7
1.3. Marqueurs biologiques d’éthylisme ............................................................................................... 8
1.4. La Transferrine et ses isoformes ................................................................................................... 10
1.5. L’alcool et la transferrine .............................................................................................................. 12
1.6. La CDT ........................................................................................................................................... 13
2. Chapitre 2 : L’électrophorèse capillaire ............................................................................. 25
2.1. Principe ......................................................................................................................................... 25
2.2. Composition .................................................................................................................................. 26
2.3. Exemples de dosage ...................................................................................................................... 27
Objectifs et stratégie ........................................................................................................ 31
Matériels et méthodes ..................................................................................................... 32
1. Réactifs ............................................................................................................................. 32
1.1. Kit capillarys® CDT ......................................................................................................................... 32
1.2. Autres réactifs, contrôles et calibreur........................................................................................... 33
2. Matériels et appareils ....................................................................................................... 33
2.1. Matériels ....................................................................................................................................... 33
2.2. Appareil ......................................................................................................................................... 34
3. Échantillons ...................................................................................................................... 35
4. Implémentation du dosage ............................................................................................... 35
5. Calibration ........................................................................................................................ 36
6. Contrôle normal et pathologique ...................................................................................... 37
7. La fidélité .......................................................................................................................... 37
8. La répétabilité ................................................................................................................... 38
9. La reproductibilité ............................................................................................................. 38
10. La stabilité .................................................................................................................... 38
11. Interférences du dosage ................................................................................................ 39
11.1. L’hémolyse .................................................................................................................................... 39
11.2. Variantes génétiques de la transferrine ........................................................................................ 39
11.3. Lésions hépatiques (maladie grave en phase terminale). ............................................................. 39
11.4. Les composants monoclonaux ou fraction polyclonale élevée ..................................................... 40
Résultats .......................................................................................................................... 41
1. Calibration ........................................................................................................................ 41
1.1. Calibration à l’installation ............................................................................................................. 41
1.2. Calibration changement de lot...................................................................................................... 41
3
2. Évaluation de la répétabilité ............................................................................................. 42
2.1. Répétabilité .................................................................................................................. 42
2.2. Répétabilité du POOL bas ............................................................................................................. 43
2.3. Répétabilité du POOL intermédiaire ............................................................................................ 44
2.4. Répétabilité du POOL intermédiaire ............................................................................................ 45
2.5. Répétabilité du POOL haut ........................................................................................................... 46
2.6. Répétabilité du POOL haut ........................................................................................................... 47
3. Évaluation de la reproductibilité ....................................................................................... 48
3.1. Reproductibilité « Contrôle normal » ........................................................................................... 48
3.2. Reproductibilité « Contrôle pathologique » ................................................................................. 49
3.3. Reproductibilité « contrôle normal » inter lot .............................................................................. 50
4. Stabilité du sérum pour le dosage de la CDT ...................................................................... 51
5. Interférences .................................................................................................................... 54
5.1. Variants transferrines ................................................................................................................... 54
5.2. L’hémolyse .................................................................................................................................... 55
5.3. Analyse d’interférences apporté par les blocs beta- gamma des électrogrammes des protéines
sérique 56
5.4. Analyse d’interférences apporté par des pics monoclonaux ou polyclonaux des électrogrammes
des protéines sérique .................................................................................................................................. 57
6. Comparaison des résultats avec le laboratoire sous-traitant. ............................................ 60
7. Résultats d’échantillon du laboratoire partenaire ............................................................. 62
8. Exemples de dosage de CDT de patients en urgence .......................................................... 62
9. Suivi de patient éthylique lors d’une hospitalisation ......................................................... 63
Discussion ........................................................................................................................ 64
1. La calibration (Point 1 page 40) ......................................................................................... 64
2. Évaluation de la répétabilité et la reproductivité de la CDT et CDT-IFCC (Point 2 et 3 pages
41-46 et 47-49) .......................................................................................................................... 65
4.1. Variants transferrine (Point 5.1 pages 53) .................................................................................... 67
4.2. L’hémolyse. (Point 5.2 pages 54) .................................................................................................. 67
4.3. Analyse d’interférences apporté par des blocs beta-gamma des électrogrammes des protéines
sérique (Point 5.3 page 55) ......................................................................................................................... 69
5. Comparaison des résultats avec le laboratoire sous-traitant. (Point 6 pages 59-60) ........... 70
6. Comparaison des résultats avec le laboratoire partenaire. (Point 7 des résultats à la page
61) 71
7. Dosage de la CDT de patients en urgences. (Point 8 des résultats à la page 61) ................. 71
8. Suivi de patient éthylique lors d’une hospitalisation (Point 9 des résultats de la page 62) . 71
Conclusion........................................................................................................................ 73
Liste des figures ............................................................................................................... 74
Liste des tables ................................................................................................................. 76
Bibliographie ................................................................................................................... 77
Annexes ........................................................................................................................... 80
Résumé ............................................................................................................................ 83Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=105748 Exemplaires
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