Centre de Documentation Campus Montignies
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Titre : |
Développement et validation d'une méthode de dosage en milieu plasmatique de l'apixaban par UHPLC-MS/MS |
Type de document : |
TFE / Mémoire |
Auteurs : |
AUDREY OKARMUS, Auteur |
Année de publication : |
2016 |
Note générale : |
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. |
Langues : |
Français (fre) |
Mots-clés : |
biologie médicale Université de Namur. Département de Pharmacie dosage apixaban UHPLC-MS/MS antivitamines K anticoagulants directs oraux DOACs |
Index. décimale : |
TFE Bio Med TFE Biologie médicale |
Note de contenu : |
Table des matières
Remerciement ................................................................................................................. 5
Présentation du lieu de stage ............................................................................................ 9
Introduction ................................................................................................................... 11
Partie théorique ............................................................................................................. 13
1. Hémostase .................................................................................................................... 13
1.1. L’hémostase primaire ......................................................................................... 13
1.2. La coagulation .................................................................................................... 13
1.3. Fibrinolyse .......................................................................................................... 15
2. Thrombose ................................................................................................................... 16
3. Anticoagulant ............................................................................................................... 16
3.1. Les antivitamines K et les anticoagulants directs oraux (DOACs) .......................... 16
3.2. L’apixaban .............................................................................................................. 17
3.2.1. Propriété pharmacodynamique ..................................................................... 17
3.2.2. Propriété pharmacocinétique ........................................................................ 18
3.2.3. Le monitoring .................................................................................................. 19
4. Dosage par UHPLC-MS/MS ........................................................................................... 20
4.1. Préparation des échantillons ................................................................................. 21 4.1.1. Précipitation des protéines et élimination des phospholipides. .................... 21
4.1.2. L’intérêt d’un SI............................................................................................... 22
4.2. La chromatographie UHPLC ................................................................................... 22
4.2.1. Courbe de Van Deemter ................................................................................. 22
4.2.2. Débit et pression ............................................................................................. 24
4.3. La spectrométrie de masse en tandem (MS/MS) .................................................. 25
4.3.1. Source d’ionisation : Electrospray Ionisation (ESI) ......................................... 25
4.3.2. Analyseur triple quadripôle en mode MRM ................................................... 26
4.3.3. Détecteur : le multiplicateur d’électron ......................................................... 27
Partie pratique ............................................................................................................... 29
1. Objectif & stratégie ...................................................................................................... 29
2. Matériels et méthodes ................................................................................................. 29
2.1. Produit chimique et réactif .................................................................................... 29
2.2. Appareillage ........................................................................................................... 34
2.2.1. Condition MS/MS pour l’analyse .................................................................... 34
2.2.2. Condition chromatographique pour l’analyse ............................................... 34
3. Développement de la méthode ................................................................................... 35
3.1. Optimisation des paramètres MS/MS ................................................................... 35
3.2. Optimisation de la séparation par UHPLC ............................................................. 38
4. Préparation des échantillons ........................................................................................ 39 4.1. Comparaison de la plaque Ostro® de la firme Waters® et la plaque Isolute® de la firme Biotage™ ................................................................................................................. 40
4.2. Evaluation de l’effet matrice (EM) ......................................................................... 42
4.3. Carry Over .............................................................................................................. 43
5. Validation de la méthode ............................................................................................. 45
5.1. Sélectivité de la méthode ...................................................................................... 45
5.2. Fonction de réponse et linéarité ............................................................................ 46
5.3. Justesse (biais) ....................................................................................................... 48
5.4. Fidélité .................................................................................................................... 49
5.5. L’exactitude ............................................................................................................ 50
5.6. Nombre d’injection ................................................................................................ 53
5.7. Limite de Quantification (LOQ) et Limite de Détection (LOD) ............................... 53
Conclusion ...................................................................................................................... 55
Glossaire......................................................................................................................... 57
Liste des figures & tableaux ............................................................................................ 61
Abréviations ................................................................................................................... 63
Bibliographie .................................................................................................................. 65
Annexes .......................................................................................................................... 69 |
Permalink : |
./index.php?lvl=notice_display&id=65685 |
Développement et validation d'une méthode de dosage en milieu plasmatique de l'apixaban par UHPLC-MS/MS [TFE / Mémoire] / AUDREY OKARMUS, Auteur . - 2016. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français ( fre)
Mots-clés : |
biologie médicale Université de Namur. Département de Pharmacie dosage apixaban UHPLC-MS/MS antivitamines K anticoagulants directs oraux DOACs |
Index. décimale : |
TFE Bio Med TFE Biologie médicale |
Note de contenu : |
Table des matières
Remerciement ................................................................................................................. 5
Présentation du lieu de stage ............................................................................................ 9
Introduction ................................................................................................................... 11
Partie théorique ............................................................................................................. 13
1. Hémostase .................................................................................................................... 13
1.1. L’hémostase primaire ......................................................................................... 13
1.2. La coagulation .................................................................................................... 13
1.3. Fibrinolyse .......................................................................................................... 15
2. Thrombose ................................................................................................................... 16
3. Anticoagulant ............................................................................................................... 16
3.1. Les antivitamines K et les anticoagulants directs oraux (DOACs) .......................... 16
3.2. L’apixaban .............................................................................................................. 17
3.2.1. Propriété pharmacodynamique ..................................................................... 17
3.2.2. Propriété pharmacocinétique ........................................................................ 18
3.2.3. Le monitoring .................................................................................................. 19
4. Dosage par UHPLC-MS/MS ........................................................................................... 20
4.1. Préparation des échantillons ................................................................................. 21 4.1.1. Précipitation des protéines et élimination des phospholipides. .................... 21
4.1.2. L’intérêt d’un SI............................................................................................... 22
4.2. La chromatographie UHPLC ................................................................................... 22
4.2.1. Courbe de Van Deemter ................................................................................. 22
4.2.2. Débit et pression ............................................................................................. 24
4.3. La spectrométrie de masse en tandem (MS/MS) .................................................. 25
4.3.1. Source d’ionisation : Electrospray Ionisation (ESI) ......................................... 25
4.3.2. Analyseur triple quadripôle en mode MRM ................................................... 26
4.3.3. Détecteur : le multiplicateur d’électron ......................................................... 27
Partie pratique ............................................................................................................... 29
1. Objectif & stratégie ...................................................................................................... 29
2. Matériels et méthodes ................................................................................................. 29
2.1. Produit chimique et réactif .................................................................................... 29
2.2. Appareillage ........................................................................................................... 34
2.2.1. Condition MS/MS pour l’analyse .................................................................... 34
2.2.2. Condition chromatographique pour l’analyse ............................................... 34
3. Développement de la méthode ................................................................................... 35
3.1. Optimisation des paramètres MS/MS ................................................................... 35
3.2. Optimisation de la séparation par UHPLC ............................................................. 38
4. Préparation des échantillons ........................................................................................ 39 4.1. Comparaison de la plaque Ostro® de la firme Waters® et la plaque Isolute® de la firme Biotage™ ................................................................................................................. 40
4.2. Evaluation de l’effet matrice (EM) ......................................................................... 42
4.3. Carry Over .............................................................................................................. 43
5. Validation de la méthode ............................................................................................. 45
5.1. Sélectivité de la méthode ...................................................................................... 45
5.2. Fonction de réponse et linéarité ............................................................................ 46
5.3. Justesse (biais) ....................................................................................................... 48
5.4. Fidélité .................................................................................................................... 49
5.5. L’exactitude ............................................................................................................ 50
5.6. Nombre d’injection ................................................................................................ 53
5.7. Limite de Quantification (LOQ) et Limite de Détection (LOD) ............................... 53
Conclusion ...................................................................................................................... 55
Glossaire......................................................................................................................... 57
Liste des figures & tableaux ............................................................................................ 61
Abréviations ................................................................................................................... 63
Bibliographie .................................................................................................................. 65
Annexes .......................................................................................................................... 69 |
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|
Exemplaires
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[article]
Titre : |
Anticoagulants directs oraux : actualités pour les biologistes |
Type de document : |
texte imprimé |
Auteurs : |
François Mullier, Auteur ; Jonathan Douxfils, Auteur ; Anne Tamigniau, Auteur |
Année de publication : |
2015 |
Article en page(s) : |
333-344 |
Langues : |
Français (fre) |
Mots-clés : |
monitoring tests de coagulation NOAC anticoagulant dabigatran rivaroxaban apixaban |
Résumé : |
Plusieurs anticoagulants oraux directs (Non-VKA oral anticoagulants, NOAC) sont maintenant largement utilisés dans la prévention et le traitement de la maladie thromboembolique. Contrairement aux antagonistes de la vitamine K, les NOAC possèdent une pharmacocinétique et une pharmacodynamique prédictibles. C’est pourquoi ils sont administrés le plus souvent à dose fixe sans suivi biologique en routine. Cependant, pour certaines sous-populations ou circonstances cliniques, la mesure de l’exposition au médicament peut être utile : suspicion de surdosage, patients présentant un événement hémorragique ou thrombotique en cours de traitement, patients en insuffisance rénale, ou encore patients nécessitant une chirurgie ou un geste invasif en urgence. Cet article fournit des lignes de conduite pratiques et résume l’influence des NOAC sur les tests classiques de coagulation. |
Permalink : |
./index.php?lvl=notice_display&id=66394 |
in Annales de Biologie Clinique > 73/3 (Mai-Juin 2015) . - 333-344
[article] Anticoagulants directs oraux : actualités pour les biologistes [texte imprimé] / François Mullier, Auteur ; Jonathan Douxfils, Auteur ; Anne Tamigniau, Auteur . - 2015 . - 333-344. Langues : Français ( fre) in Annales de Biologie Clinique > 73/3 (Mai-Juin 2015) . - 333-344
Mots-clés : |
monitoring tests de coagulation NOAC anticoagulant dabigatran rivaroxaban apixaban |
Résumé : |
Plusieurs anticoagulants oraux directs (Non-VKA oral anticoagulants, NOAC) sont maintenant largement utilisés dans la prévention et le traitement de la maladie thromboembolique. Contrairement aux antagonistes de la vitamine K, les NOAC possèdent une pharmacocinétique et une pharmacodynamique prédictibles. C’est pourquoi ils sont administrés le plus souvent à dose fixe sans suivi biologique en routine. Cependant, pour certaines sous-populations ou circonstances cliniques, la mesure de l’exposition au médicament peut être utile : suspicion de surdosage, patients présentant un événement hémorragique ou thrombotique en cours de traitement, patients en insuffisance rénale, ou encore patients nécessitant une chirurgie ou un geste invasif en urgence. Cet article fournit des lignes de conduite pratiques et résume l’influence des NOAC sur les tests classiques de coagulation. |
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| ![Anticoagulants directs oraux : actualités pour les biologistes vignette](./images/vide.png) |
Réservation
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Exemplaires (1)
|
Revue | Revue | Centre de Documentation HELHa Campus Montignies | Armoires à volets | Disponible Disponible |
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|
Revue | Revue | Centre de Documentation HELHa Campus Montignies | Armoires à volets | Disponible Disponible |
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[article]
Titre : |
Interférence des anticoagulants oraux directs anti-Xa lors de la surveillance des traitements par héparine non-fractionnée : attitudes pratiques et à venir |
Type de document : |
texte imprimé |
Auteurs : |
Sophie Melicine ; Laure Maucorps ; Valérie Eschwège ; Julie Carré ; DOminique Helley ; Isabelle Gouin-Thibault ; Nicolas Gendron ; Fabienne Nédélec-Gac ; Laetitia Mauge |
Année de publication : |
2024 |
Article en page(s) : |
p. 129-138 |
Note générale : |
https://doi.org/10.1684/abc.2024.1873 |
Langues : |
Français (fre) |
Mots-clés : |
activité-anti Xa AOD apixaban héparine rivaroxaban |
Résumé : |
Contrairement aux anticoagulants oraux directs (AOD), l’héparine non fractionnée (HNF) nécessite une surveillance biologique quotidienne lorsqu’elle est administrée à dose thérapeutique. Actuellement, la surveillance biologique de l’HNF est préférentiellement réalisée par la mesure de l’activité anti-Xa, toutefois, chez les patients initialement traités par un AOD anti-Xa bénéficiant d’un relais par HNF, il existe un risque important d’interférence de l’AOD avec la mesure de l’anti-Xa HNF. La présence d’AOD résiduel dans l’échantillon de façon concomitante à l’héparine peut conduire à une surestimation de l’activité anticoagulante de l’héparine et à une anticoagulation inadaptée. Ce risque d’interférence ne doit pas être négligé car il existe y compris lorsque la concentration d’AOD est inférieure au seuil de sécurité hémostatique et peut durer plusieurs jours. Afin de contourner cette problématique, plusieurs options existent et sont en cours d’évaluation. Cette synthèse fait le point sur les interférences des AOD anti-Xa et les différentes stratégies pour s’en affranchir. Cette thématique souligne également l’importance de la communication entre le biologiste médical et le clinicien sur les traitements anticoagulants reçus par les patients. |
Permalink : |
./index.php?lvl=notice_display&id=117690 |
in Annales de Biologie Clinique > Vol.82 N°2 (mars-avril 2024) . - p. 129-138
[article] Interférence des anticoagulants oraux directs anti-Xa lors de la surveillance des traitements par héparine non-fractionnée : attitudes pratiques et à venir [texte imprimé] / Sophie Melicine ; Laure Maucorps ; Valérie Eschwège ; Julie Carré ; DOminique Helley ; Isabelle Gouin-Thibault ; Nicolas Gendron ; Fabienne Nédélec-Gac ; Laetitia Mauge . - 2024 . - p. 129-138. https://doi.org/10.1684/abc.2024.1873 Langues : Français ( fre) in Annales de Biologie Clinique > Vol.82 N°2 (mars-avril 2024) . - p. 129-138
Mots-clés : |
activité-anti Xa AOD apixaban héparine rivaroxaban |
Résumé : |
Contrairement aux anticoagulants oraux directs (AOD), l’héparine non fractionnée (HNF) nécessite une surveillance biologique quotidienne lorsqu’elle est administrée à dose thérapeutique. Actuellement, la surveillance biologique de l’HNF est préférentiellement réalisée par la mesure de l’activité anti-Xa, toutefois, chez les patients initialement traités par un AOD anti-Xa bénéficiant d’un relais par HNF, il existe un risque important d’interférence de l’AOD avec la mesure de l’anti-Xa HNF. La présence d’AOD résiduel dans l’échantillon de façon concomitante à l’héparine peut conduire à une surestimation de l’activité anticoagulante de l’héparine et à une anticoagulation inadaptée. Ce risque d’interférence ne doit pas être négligé car il existe y compris lorsque la concentration d’AOD est inférieure au seuil de sécurité hémostatique et peut durer plusieurs jours. Afin de contourner cette problématique, plusieurs options existent et sont en cours d’évaluation. Cette synthèse fait le point sur les interférences des AOD anti-Xa et les différentes stratégies pour s’en affranchir. Cette thématique souligne également l’importance de la communication entre le biologiste médical et le clinicien sur les traitements anticoagulants reçus par les patients. |
Permalink : |
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Exemplaires (1)
|
Revue | Revue | Centre de Documentation HELHa Campus Montignies | Armoires à volets | Disponible Disponible |
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[article]
Titre : |
Prophylaxie des accidents thromboemboliques veineux en chirurgie orthopédique et traumatologique |
Type de document : |
texte imprimé |
Auteurs : |
N. Fallouh ; A. Soulier |
Année de publication : |
2020 |
Article en page(s) : |
14-014-A-10 [Tome 1] |
Note générale : |
Doi : 10.1016/S0246-0521(20)66210-6 |
Langues : |
Français (fre) |
Mots-clés : |
Thrombose veineuse Embolie pulmonaire Hémorragies Anticoagulants Héparines Fondaparinux Dabigatran Rivaroxaban Apixaban |
Résumé : |
L'objectif de cet article est de présenter les problématiques liées à la prévention des thromboembolies et de discuter des différentes prophylaxies chez les patients devant subir une chirurgie orthopédique. Il s'agit d'une revue de la littérature scientifique basée sur l'analyse des grandes études cliniques et des dernières recommandations des sociétés savantes. La maladie thromboembolique veineuse (MTEV) est une des complications médicales postopératoires les plus fréquentes, elle est associée à une augmentation de la durée de séjour hospitalière, de la mortalité et des dépenses médicales associées. La chirurgie orthopédique représente un facteur de risque indépendant de MTEV. La stratification des risques, la correction des risques modifiables et la thromboprophylaxie périopératoire sont essentielles dans l'optimisation de la prise en charge de ces patients. La prophylaxie médicamenteuse a fait des progrès importants ces dernières années, au point que les complications fatales sont devenues heureusement très rares. Les recommandations concernant la prévention postopératoire de la MTEV sont en constante évolution. De même le développement des nouveaux anticoagulants oraux engendre l'apparition de nouvelles lignes directrices et de nouveaux enjeux. La prophylaxie médicamenteuse n'est pas dénuée de risque et la balance bénéfice prophylactique et risque hémorragique est toujours d'actualité. La mobilisation précoce et l'utilisation de moyens non pharmacologiques de thromboprophylaxie devraient aussi être exploitées. Lors du choix de la technique d'anesthésie, il est essentiel de peser avec précision l'ensemble des facteurs pouvant orienter la prévention de la MTEV. |
Permalink : |
./index.php?lvl=notice_display&id=93082 |
in EMC : Appareil locomoteur > Vol.34, n°3 (Juillet 2020) . - 14-014-A-10 [Tome 1]
[article] Prophylaxie des accidents thromboemboliques veineux en chirurgie orthopédique et traumatologique [texte imprimé] / N. Fallouh ; A. Soulier . - 2020 . - 14-014-A-10 [Tome 1]. Doi : 10.1016/S0246-0521(20)66210-6 Langues : Français ( fre) in EMC : Appareil locomoteur > Vol.34, n°3 (Juillet 2020) . - 14-014-A-10 [Tome 1]
Mots-clés : |
Thrombose veineuse Embolie pulmonaire Hémorragies Anticoagulants Héparines Fondaparinux Dabigatran Rivaroxaban Apixaban |
Résumé : |
L'objectif de cet article est de présenter les problématiques liées à la prévention des thromboembolies et de discuter des différentes prophylaxies chez les patients devant subir une chirurgie orthopédique. Il s'agit d'une revue de la littérature scientifique basée sur l'analyse des grandes études cliniques et des dernières recommandations des sociétés savantes. La maladie thromboembolique veineuse (MTEV) est une des complications médicales postopératoires les plus fréquentes, elle est associée à une augmentation de la durée de séjour hospitalière, de la mortalité et des dépenses médicales associées. La chirurgie orthopédique représente un facteur de risque indépendant de MTEV. La stratification des risques, la correction des risques modifiables et la thromboprophylaxie périopératoire sont essentielles dans l'optimisation de la prise en charge de ces patients. La prophylaxie médicamenteuse a fait des progrès importants ces dernières années, au point que les complications fatales sont devenues heureusement très rares. Les recommandations concernant la prévention postopératoire de la MTEV sont en constante évolution. De même le développement des nouveaux anticoagulants oraux engendre l'apparition de nouvelles lignes directrices et de nouveaux enjeux. La prophylaxie médicamenteuse n'est pas dénuée de risque et la balance bénéfice prophylactique et risque hémorragique est toujours d'actualité. La mobilisation précoce et l'utilisation de moyens non pharmacologiques de thromboprophylaxie devraient aussi être exploitées. Lors du choix de la technique d'anesthésie, il est essentiel de peser avec précision l'ensemble des facteurs pouvant orienter la prévention de la MTEV. |
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