Centre de Documentation Campus Montignies
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Lundi : 8h-18h30
Mardi : 8h-18h30
Mercredi 9h-16h30
Jeudi : 8h-18h30
Vendredi : 8h-16h30
Attention, votre centre de documentation sera fermé du 27/04 au 12/05 inclus.
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Auteur Sarah Storder |
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Mise au point et optimisation d’une méthode d’extraction sur culture cellulaire permettant l’analyse métabonomique des intermédiaires du cycle de krebs par spectrométrie de résonance magnétique nucléaire du proton / Sarah Storder
Titre : Mise au point et optimisation d’une méthode d’extraction sur culture cellulaire permettant l’analyse métabonomique des intermédiaires du cycle de krebs par spectrométrie de résonance magnétique nucléaire du proton Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Sarah Storder, Auteur ; J-M Colet, Directeur de la recherche Année de publication : 2017 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Université de Mons laboratoire de biologie humaine et toxicologie. Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières :
Présentation du lieu de stage :......................................................................................................... 6
Introduction : .................................................................................................................................... 7
Problématique : .............................................................................................................................. 19
Matériel et Méthodes : .................................................................................................................. 23
Volet animal : ....................................................................................................................... 25
1) Animaux : espèces et souches : ........................................................................................ 25
2) Récolte des échantillons : ................................................................................................. 26
Volet Cellulaire : ................................................................................................................... 27
1) Décongélation : ................................................................................................................ 28
2) Entretien des Cultures : .................................................................................................... 29
3) Passage cellulaire : ........................................................................................................... 29
4) Récolte des échantillons cellulaires : Scraping ................................................................. 29
5) Extraction : ....................................................................................................................... 30
Volet préparation des échantillons : .................................................................................... 31
1) Urines : ............................................................................................................................. 31
2) Extractions cellulaires : ..................................................................................................... 31
3) Milieux de culture :........................................................................................................... 33
Volet analyse des spectres : ................................................................................................. 34
1) Acquisition des spectres : ................................................................................................. 34
2) Traitement des spectres : ................................................................................................. 34
Résultats : ....................................................................................................................................... 36
Analyse des spectres RMN des urines de rats contrôles : ................................................... 38
Libération des intermédiaires du cycle de Krebs : ............................................................... 40
1) Utilisation d’un pH de travail basique : ............................................................................ 41
2) Double procédure d’extraction : ...................................................................................... 41
Concentration des échantillons : .......................................................................................... 44
1) Utilisation de tubes microcapillaires : .............................................................................. 45
2) Augmentation du nombre de cellules : ............................................................................ 45
3) Influence du nombre de scans : ....................................................................................... 47
4) Analyse des milieux extracellulaires :............................................................................... 47
Discussion : ..................................................................................................................................... 50
Libération des intermédiaires du cycle de Krebs : ............................................................... 50
1) Utilisation de pH basique : ............................................................................................... 50
2) Double extraction : ........................................................................................................... 51
Concentration des échantillons : .......................................................................................... 51
1) Utilisation de microcapillaires : ........................................................................................ 51
Les intermédiaires du cycle de Krebs ne sont pas non plus visualisés sur le spectre obtenu au moyen d’une analyse en microcapillaire. Toutefois l’amélioration flagrante du signal obtenu dans cette condition est très encourageante. ......................................................... 51
2) Concentration des flasques : ............................................................................................ 52
3) Influence du nombre de scans : ....................................................................................... 53
4) Milieux extracellulaires : .................................................................................................. 53
Conclusion : .................................................................................................................................... 54
Perspectives : ................................................................................................................................. 55
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65853 Mise au point et optimisation d’une méthode d’extraction sur culture cellulaire permettant l’analyse métabonomique des intermédiaires du cycle de krebs par spectrométrie de résonance magnétique nucléaire du proton [TFE / Mémoire] / Sarah Storder, Auteur ; J-M Colet, Directeur de la recherche . - 2017.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Université de Mons laboratoire de biologie humaine et toxicologie. Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières :
Présentation du lieu de stage :......................................................................................................... 6
Introduction : .................................................................................................................................... 7
Problématique : .............................................................................................................................. 19
Matériel et Méthodes : .................................................................................................................. 23
Volet animal : ....................................................................................................................... 25
1) Animaux : espèces et souches : ........................................................................................ 25
2) Récolte des échantillons : ................................................................................................. 26
Volet Cellulaire : ................................................................................................................... 27
1) Décongélation : ................................................................................................................ 28
2) Entretien des Cultures : .................................................................................................... 29
3) Passage cellulaire : ........................................................................................................... 29
4) Récolte des échantillons cellulaires : Scraping ................................................................. 29
5) Extraction : ....................................................................................................................... 30
Volet préparation des échantillons : .................................................................................... 31
1) Urines : ............................................................................................................................. 31
2) Extractions cellulaires : ..................................................................................................... 31
3) Milieux de culture :........................................................................................................... 33
Volet analyse des spectres : ................................................................................................. 34
1) Acquisition des spectres : ................................................................................................. 34
2) Traitement des spectres : ................................................................................................. 34
Résultats : ....................................................................................................................................... 36
Analyse des spectres RMN des urines de rats contrôles : ................................................... 38
Libération des intermédiaires du cycle de Krebs : ............................................................... 40
1) Utilisation d’un pH de travail basique : ............................................................................ 41
2) Double procédure d’extraction : ...................................................................................... 41
Concentration des échantillons : .......................................................................................... 44
1) Utilisation de tubes microcapillaires : .............................................................................. 45
2) Augmentation du nombre de cellules : ............................................................................ 45
3) Influence du nombre de scans : ....................................................................................... 47
4) Analyse des milieux extracellulaires :............................................................................... 47
Discussion : ..................................................................................................................................... 50
Libération des intermédiaires du cycle de Krebs : ............................................................... 50
1) Utilisation de pH basique : ............................................................................................... 50
2) Double extraction : ........................................................................................................... 51
Concentration des échantillons : .......................................................................................... 51
1) Utilisation de microcapillaires : ........................................................................................ 51
Les intermédiaires du cycle de Krebs ne sont pas non plus visualisés sur le spectre obtenu au moyen d’une analyse en microcapillaire. Toutefois l’amélioration flagrante du signal obtenu dans cette condition est très encourageante. ......................................................... 51
2) Concentration des flasques : ............................................................................................ 52
3) Influence du nombre de scans : ....................................................................................... 53
4) Milieux extracellulaires : .................................................................................................. 53
Conclusion : .................................................................................................................................... 54
Perspectives : ................................................................................................................................. 55
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65853 Exemplaires
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