Étude de l’impact des étapes pré analytiques et analytiques sur l’agrégation, les caractéristiques et la numération plaquettaire. / Sultan Kasikci

Public ISBD Titre : Étude de l’impact des étapes pré analytiques et analytiques sur l’agrégation, les caractéristiques et la numération plaquettaire. Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Sultan Kasikci, Auteur ; Gaël Gilbert, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2019 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale  CHU Dinant Godinne  Mont Godinne Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Ce travail de fin d’études aborde l’impact des étapes pré-analytiques et analytiques telles que le type d’anticoagulant, l’homogénéisation du prélèvement, le délai et le diluant sur l’agrégation plaquettaire, les caractéristiques plaquettaires (volume plaquettaire moyen, fraction immature des plaquettes) et sur la numération plaquettaire. Depuis peu, une nouvelle alternative a été mise au point pour mesurer l’agrégation plaquettaire. Elle vise à substituer le tube hirudine par le tube citrate à condition d’utiliser le chlorure de calcium en échange du chlorure de sodium afin d’obtenir une agrégation plaquettaire identique entre le sang récolté sur tube hirudine et le sang récolté sur tube citrate en utilisant toujours les mêmes inducteurs. Afin de vérifier l’impact du calcium sur l’agrégation plaquettaire, une autre série d’agrégation plaquettaire sera réalisée à partir de sang récolté sur tube citrate dilué au chlorure de sodium. En parallèle, le Sysmex XN 9000 a effectué la numération plaquettaire par impédance, fluorescence et par méthode optique ainsi que le MPV et l’IPF sur tubes citrate, hirudine et EDTA. De plus, des frottis ont été tirés et colorés avec ces mêmes tubes afin de justifier les éventuelles variations de la numération plaquettaire. La numération plaquettaire, les paramètres caractérisant les plaquettes, l’agrégation, ainsi que les frottis de sang seront effectués au cours des délais suivants : 5, 30, 60, 120 et 180 minutes. Afin de mener à bien cette étude, vingt personnes ont fait don de leur sang. Cette étude a démontré qu’il était préférable de réaliser les agrégations plaquettaires sur tube hirudine dilué au NaCl entre 30 et 120 minutes avec le Multiplate et que la numération plaquettaire au Sysmex doit s’effectuer sur EDTA entre 5 et 120 minutes. De plus, la fraction immature plaquettaire peut être mesurée sur EDTA entre 5 et 180 minutes ou sur citrate entre 30 et 180 minutes. Finalement, il est préférable de mesurer le volume plaquettaire moyen sur citrate entre 30 et 180 minutes sachant que cette variable est moins stable que l’IPF. En conclusion, les étapes pré-analytiques et analytiques telles que le type d’anticoagulant, l’homogénéisation du prélèvement, le délai et le diluant doivent être standardisés car ils influencent l’agrégation plaquettaire, les caractéristiques (volume plaquettaire moyen et fraction immature des plaquettes) et la numération plaquettaire. Note de contenu : Présentation du lieu de stage ................................................................................................................... 5 Introduction générale ............................................................................................................................... 6 1. Contexte théorique .............................................................................................................................. 7 1.1 L’hémostase ................................................................................................................................... 7 1.2 L’hémostase primaire .................................................................................................................... 7 1.2.1 La paroi vasculaire ...................................................................................................................... 7 1.2.2 Le facteur Von Willebrand .......................................................................................................... 8 1.3 Les plaquettes................................................................................................................................ 8 1.3.1 L’origine plaquettaire ............................................................................................................. 8 1.3.2 La structure plaquettaire ....................................................................................................... 8 1.3.3 Les fonctions plaquettaires .................................................................................................. 10 1.4 Les étapes menant à l’agrégation plaquettaire .......................................................................... 10 1.4.1 L’adhésion plaquettaire ............................................................................................................ 10 1.4.2 L’activation plaquettaire ........................................................................................................... 11 1.4.3 L’agrégation plaquettaire ......................................................................................................... 12 1.4.3.1 L’adénosine diphosphate ................................................................................................... 12 1.4.3.2 Le collagène ....................................................................................................................... 13 1.4.3.3 Le peptide activant le récepteur de la thrombine ............................................................. 13 1.4.3.4 Les valeurs de référence .................................................................................................... 14 1.5 Application clinique de l’agrégation plaquettaire ....................................................................... 14 1.5.1 L’intérêt clinique de l’étude de la fonction plaquettaire ......................................................... 14 1.5.2 Les tests d’agrégation plaquettaire .......................................................................................... 15 1.5.3 Le système Multiplate .............................................................................................................. 16 1.5.3.1 Principe du Multiplate ....................................................................................................... 16 1.5.3.2 Appareillage du Multiplate ................................................................................................ 17 1.6 La numération et les caractéristiques plaquettaires avec le Sysmex XN 9000 ........................... 18 1.6.1 La numération plaquettaire par impédancemétrie .................................................................. 19 1.6.2 La numération plaquettaire par méthode optique .................................................................. 19 1.6.3 La numération plaquettaire par fluorescence .......................................................................... 21 1.6.4 La mesure des caractéristiques plaquettaires avec le Sysmex XN 9000 .................................. 22 1.6.4.1 Le volume plaquettaire moyen .......................................................................................... 22 1.6.4.2 La fraction immature plaquettaire .................................................................................... 23 1.7 Le frottis sanguin ......................................................................................................................... 24 1.8 L’impact des étapes pré-analytiques et analytiques ....................................................................... 24 1.8.1 Avant le prélèvement ............................................................................................................... 25 1.8.1.1 Le choix des anticoagulants ............................................................................................... 25 1.8.2 Pendant le prélèvement ........................................................................................................... 27 1.8.3 Après le prélèvement ............................................................................................................... 27 2. Objectifs et stratégie ......................................................................................................................... 28 2.1 Les objectifs ..................................................................................................................................... 28 2.2 La stratégie ....................................................................................................................................... 28 3. Matériel et méthode.......................................................................................................................... 29 3.1 Matériel ....................................................................................................................................... 29 3.1.1 Matériel pour le comptage des agrégats plaquettaires au microscope .................................. 29 3.1.2 Matériel pour l’agrégation plaquettaire ................................................................................... 29 3.1.3 Matériel pour la numération plaquettaire au Sysmex XN9000 ............................................... 30 3.1.4 Matériel pour la réalisation des frottis sanguins ...................................................................... 30 3.2 Méthode ...................................................................................................................................... 30 4. Résultats et discussions ..................................................................................................................... 34 4.1 Résultats de l’agrégation plaquettaire ............................................................................................ 34 4.2 Discussion concernant l’agrégation plaquettaire ............................................................................ 38 4.3 Résultats de la numération plaquettaire ......................................................................................... 40 4.4 Discussion concernant la numération plaquettaire ........................................................................ 45 4.5 Résultats du pourcentage d’agrégats plaquettaires ....................................................................... 47 4.6 Discussion concernant le pourcentage d’agrégats plaquettaires ................................................... 48 4.7 Résultats des caractéristiques plaquettaires ................................................................................... 49 4.8 Discussion concernant les caractéristiques plaquettaires .............................................................. 52 5. Conclusion générale........................................................................................................................... 54 Liste des figures ....................................................................................................................................... 55 Liste des tableaux .................................................................................................................................... 56 Abréviations ............................................................................................................................................ 57 Bibliographie ........................................................................................................................................... 58 Annexes ................................................................................................................................................... 61 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=79992 Étude de l’impact des étapes pré analytiques et analytiques sur l’agrégation, les caractéristiques et la numération plaquettaire. [TFE / Mémoire] / Sultan Kasikci, Auteur ; Gaël Gilbert, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2019. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale  CHU Dinant Godinne  Mont Godinne Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Ce travail de fin d’études aborde l’impact des étapes pré-analytiques et analytiques telles que le type d’anticoagulant, l’homogénéisation du prélèvement, le délai et le diluant sur l’agrégation plaquettaire, les caractéristiques plaquettaires (volume plaquettaire moyen, fraction immature des plaquettes) et sur la numération plaquettaire. Depuis peu, une nouvelle alternative a été mise au point pour mesurer l’agrégation plaquettaire. Elle vise à substituer le tube hirudine par le tube citrate à condition d’utiliser le chlorure de calcium en échange du chlorure de sodium afin d’obtenir une agrégation plaquettaire identique entre le sang récolté sur tube hirudine et le sang récolté sur tube citrate en utilisant toujours les mêmes inducteurs. Afin de vérifier l’impact du calcium sur l’agrégation plaquettaire, une autre série d’agrégation plaquettaire sera réalisée à partir de sang récolté sur tube citrate dilué au chlorure de sodium. En parallèle, le Sysmex XN 9000 a effectué la numération plaquettaire par impédance, fluorescence et par méthode optique ainsi que le MPV et l’IPF sur tubes citrate, hirudine et EDTA. De plus, des frottis ont été tirés et colorés avec ces mêmes tubes afin de justifier les éventuelles variations de la numération plaquettaire. La numération plaquettaire, les paramètres caractérisant les plaquettes, l’agrégation, ainsi que les frottis de sang seront effectués au cours des délais suivants : 5, 30, 60, 120 et 180 minutes. Afin de mener à bien cette étude, vingt personnes ont fait don de leur sang. Cette étude a démontré qu’il était préférable de réaliser les agrégations plaquettaires sur tube hirudine dilué au NaCl entre 30 et 120 minutes avec le Multiplate et que la numération plaquettaire au Sysmex doit s’effectuer sur EDTA entre 5 et 120 minutes. De plus, la fraction immature plaquettaire peut être mesurée sur EDTA entre 5 et 180 minutes ou sur citrate entre 30 et 180 minutes. Finalement, il est préférable de mesurer le volume plaquettaire moyen sur citrate entre 30 et 180 minutes sachant que cette variable est moins stable que l’IPF. En conclusion, les étapes pré-analytiques et analytiques telles que le type d’anticoagulant, l’homogénéisation du prélèvement, le délai et le diluant doivent être standardisés car ils influencent l’agrégation plaquettaire, les caractéristiques (volume plaquettaire moyen et fraction immature des plaquettes) et la numération plaquettaire. Note de contenu : Présentation du lieu de stage ................................................................................................................... 5 Introduction générale ............................................................................................................................... 6 1. Contexte théorique .............................................................................................................................. 7 1.1 L’hémostase ................................................................................................................................... 7 1.2 L’hémostase primaire .................................................................................................................... 7 1.2.1 La paroi vasculaire ...................................................................................................................... 7 1.2.2 Le facteur Von Willebrand .......................................................................................................... 8 1.3 Les plaquettes................................................................................................................................ 8 1.3.1 L’origine plaquettaire ............................................................................................................. 8 1.3.2 La structure plaquettaire ....................................................................................................... 8 1.3.3 Les fonctions plaquettaires .................................................................................................. 10 1.4 Les étapes menant à l’agrégation plaquettaire .......................................................................... 10 1.4.1 L’adhésion plaquettaire ............................................................................................................ 10 1.4.2 L’activation plaquettaire ........................................................................................................... 11 1.4.3 L’agrégation plaquettaire ......................................................................................................... 12 1.4.3.1 L’adénosine diphosphate ................................................................................................... 12 1.4.3.2 Le collagène ....................................................................................................................... 13 1.4.3.3 Le peptide activant le récepteur de la thrombine ............................................................. 13 1.4.3.4 Les valeurs de référence .................................................................................................... 14 1.5 Application clinique de l’agrégation plaquettaire ....................................................................... 14 1.5.1 L’intérêt clinique de l’étude de la fonction plaquettaire ......................................................... 14 1.5.2 Les tests d’agrégation plaquettaire .......................................................................................... 15 1.5.3 Le système Multiplate .............................................................................................................. 16 1.5.3.1 Principe du Multiplate ....................................................................................................... 16 1.5.3.2 Appareillage du Multiplate ................................................................................................ 17 1.6 La numération et les caractéristiques plaquettaires avec le Sysmex XN 9000 ........................... 18 1.6.1 La numération plaquettaire par impédancemétrie .................................................................. 19 1.6.2 La numération plaquettaire par méthode optique .................................................................. 19 1.6.3 La numération plaquettaire par fluorescence .......................................................................... 21 1.6.4 La mesure des caractéristiques plaquettaires avec le Sysmex XN 9000 .................................. 22 1.6.4.1 Le volume plaquettaire moyen .......................................................................................... 22 1.6.4.2 La fraction immature plaquettaire .................................................................................... 23 1.7 Le frottis sanguin ......................................................................................................................... 24 1.8 L’impact des étapes pré-analytiques et analytiques ....................................................................... 24 1.8.1 Avant le prélèvement ............................................................................................................... 25 1.8.1.1 Le choix des anticoagulants ............................................................................................... 25 1.8.2 Pendant le prélèvement ........................................................................................................... 27 1.8.3 Après le prélèvement ............................................................................................................... 27 2. Objectifs et stratégie ......................................................................................................................... 28 2.1 Les objectifs ..................................................................................................................................... 28 2.2 La stratégie ....................................................................................................................................... 28 3. Matériel et méthode.......................................................................................................................... 29 3.1 Matériel ....................................................................................................................................... 29 3.1.1 Matériel pour le comptage des agrégats plaquettaires au microscope .................................. 29 3.1.2 Matériel pour l’agrégation plaquettaire ................................................................................... 29 3.1.3 Matériel pour la numération plaquettaire au Sysmex XN9000 ............................................... 30 3.1.4 Matériel pour la réalisation des frottis sanguins ...................................................................... 30 3.2 Méthode ...................................................................................................................................... 30 4. Résultats et discussions ..................................................................................................................... 34 4.1 Résultats de l’agrégation plaquettaire ............................................................................................ 34 4.2 Discussion concernant l’agrégation plaquettaire ............................................................................ 38 4.3 Résultats de la numération plaquettaire ......................................................................................... 40 4.4 Discussion concernant la numération plaquettaire ........................................................................ 45 4.5 Résultats du pourcentage d’agrégats plaquettaires ....................................................................... 47 4.6 Discussion concernant le pourcentage d’agrégats plaquettaires ................................................... 48 4.7 Résultats des caractéristiques plaquettaires ................................................................................... 49 4.8 Discussion concernant les caractéristiques plaquettaires .............................................................. 52 5. Conclusion générale........................................................................................................................... 54 Liste des figures ....................................................................................................................................... 55 Liste des tableaux .................................................................................................................................... 56 Abréviations ............................................................................................................................................ 57 Bibliographie ........................................................................................................................................... 58 Annexes ................................................................................................................................................... 61 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=79992

Exemplaires

Cote	Support	Localisation	Section	Disponibilité
aucun exemplaire

---

1 (1 - 1 / 1)