Etude des allergènes de deux insectes comestibles, Tenebrio molitor et Acheta domesticus / Jessica Ghyoot

Public ISBD Titre : Etude des allergènes de deux insectes comestibles, Tenebrio molitor et Acheta domesticus Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Jessica Ghyoot, Auteur ; Philippe Keymolen, Directeur de publication, rédacteur en chef Année de publication : 2017 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : Agronomie  AIBT  Gembloux Agro-Bio Tech Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Résumé : L’entomophagie est une pratique courante dans beaucoup de régions du monde mais elle est cependant très peu connue dans nos contrées. Pourtant, grâce à leurs qualités nutritionnelles élevées et leur bonne concentration en protéines, les insectes possèdent les qualités pour être une nouvelle ressource alimentaire possédant une faible empreinte écologique. Cependant, les insectes contiennent des protéines allergènes similaires aux protéines présentes dans les crustacés. Une personne allergique aux crustacés risque de développer une allergie croisée sur les insectes comestibles. Ici, l’allergène étudié sera l’arginine kinase et ce sur deux insectes en particulier : Tenebrio molitor et Acheta domesticus. La détection de l’allergène se fera par la méthode du Western Blot, une méthode permettant la détection de protéines allergisantes spécifiques grâce à l’utilisation d’un sérum de patients allergiques à la protéine d’intérêt. Les résultats obtenus montrent bien la présence de l’allergène dans T. molitor et A. domestica. Des fractionnements de poudres de T. molitor déshydratées à l’étuve et au lyophilisateur ont été réalisés afin de vérifier si la chaleur permet de dénaturer l’arginine kinase. Une DSC, calorimétrie différentielle à balayage, est réalisée sur ces poudres. Sur la poudre séchée à l’étuve à 105°, il n’apparait aucune température de dénaturation mais sur la poudre séchée au lyophilisateur, deux températures de dénaturation apparaissent : l’une à 72° et l’autre à 100°. Ces recherches permettront de démontrer si l’arginine kinase se dénature quand elle est chauffée à 72° ou à 100°. Note de contenu : Table des matières Introduction générale ........................................................................... 6 Chapitre 1 : contexte général ................................................................ 8 1. L’entomophagie.................................................................................... 8 1.1. Définition ....................................................................................... 8 1.2. Histoire et évolution de l’entomophagie ...................................... 8 1.3. L’entomophagie dans nos régions ................................................ 9 1.4. Intérêts de l’entomophagie ........................................................ 11 1.5. Inconvénients de l’entomophagie .............................................. 14 2. Tenebrio molitor ................................................................................. 15 2.1. Généralités .................................................................................. 15 2.2. Composition ................................................................................ 16 3. Acheta domestica ............................................................................... 17 3.1. Généralités .................................................................................. 17 3.2. Composition ................................................................................ 18 4. Allergies alimentaires ......................................................................... 18 4.1. Réaction allergique ..................................................................... 18 4.2. Mécanisme d’une réaction allergique alimentaire ..................... 19 4.3. Allergènes propres aux insectes ................................................. 20 4.4. Arginine kinase ............................................................................ 21 4.5. Température de dénaturation .................................................... 22 Chapitre 2 : objectifs et stratégie ......................................................... 23 Chapitre 3 : matériels et méthodes ...................................................... 26 1. Matériel biologique ............................................................................ 26 1.1. Larves de T. molitor et A. domestica ........................................... 26 2. Purification de l’arginine kinase .......................................................... 27 2.1. Arginine kinase du T. molitor ...................................................... 27 2.2. Arginine kinase d’A. domestica ................................................... 32 3. Fractionnement des poudres de T. molitor .......................................... 32 3.1. Séchage ....................................................................................... 32 3.2. Dosage protéines par la méthode de Dumas.............................. 33 4. Western Blot ...................................................................................... 34 4.1. Réactifs ........................................................................................ 34 4.2. Mode opératoire ......................................................................... 35 5. DSC : température de dénaturation .................................................... 38 Chapitre 4 : résultats et discussion ....................................................... 40 1. Résultats des extractions protéiques ................................................... 40 2. Purification de l’arginine kinase .......................................................... 41 2.1. Graphique chromatogramme du T. molitor ................................ 41 2.2. Graphique chromatogramme d’A. domestica ............................ 43 3. Fractionnement poudre de T. molitor et pourcentage en protéines ..... 44 4. Western Blot ...................................................................................... 45 4.1. T. molitor ..................................................................................... 45 4.6. A. domestica ................................................................................ 46 5. DSC – Température de dénaturation ................................................... 47 5.1. DSC sur le fractionnement de T. molitor .................................... 47 5.2. DSC sur la poudre lyophilisée chauffée à 80°C et 105°C............. 49 Conclusion générale ............................................................................. 51 Liste d’abréviation ............................................................................... 53 Liste des figures ................................................................................... 54 Liste des tableaux ................................................................................ 55 Références ........................................................................................... 56 Annexes ............................................................................................... 62 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65876 Etude des allergènes de deux insectes comestibles, Tenebrio molitor et Acheta domesticus [TFE / Mémoire] / Jessica Ghyoot, Auteur ; Philippe Keymolen, Directeur de publication, rédacteur en chef . - 2017. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : Agronomie  AIBT  Gembloux Agro-Bio Tech Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Résumé : L’entomophagie est une pratique courante dans beaucoup de régions du monde mais elle est cependant très peu connue dans nos contrées. Pourtant, grâce à leurs qualités nutritionnelles élevées et leur bonne concentration en protéines, les insectes possèdent les qualités pour être une nouvelle ressource alimentaire possédant une faible empreinte écologique. Cependant, les insectes contiennent des protéines allergènes similaires aux protéines présentes dans les crustacés. Une personne allergique aux crustacés risque de développer une allergie croisée sur les insectes comestibles. Ici, l’allergène étudié sera l’arginine kinase et ce sur deux insectes en particulier : Tenebrio molitor et Acheta domesticus. La détection de l’allergène se fera par la méthode du Western Blot, une méthode permettant la détection de protéines allergisantes spécifiques grâce à l’utilisation d’un sérum de patients allergiques à la protéine d’intérêt. Les résultats obtenus montrent bien la présence de l’allergène dans T. molitor et A. domestica. Des fractionnements de poudres de T. molitor déshydratées à l’étuve et au lyophilisateur ont été réalisés afin de vérifier si la chaleur permet de dénaturer l’arginine kinase. Une DSC, calorimétrie différentielle à balayage, est réalisée sur ces poudres. Sur la poudre séchée à l’étuve à 105°, il n’apparait aucune température de dénaturation mais sur la poudre séchée au lyophilisateur, deux températures de dénaturation apparaissent : l’une à 72° et l’autre à 100°. Ces recherches permettront de démontrer si l’arginine kinase se dénature quand elle est chauffée à 72° ou à 100°. Note de contenu : Table des matières Introduction générale ........................................................................... 6 Chapitre 1 : contexte général ................................................................ 8 1. L’entomophagie.................................................................................... 8 1.1. Définition ....................................................................................... 8 1.2. Histoire et évolution de l’entomophagie ...................................... 8 1.3. L’entomophagie dans nos régions ................................................ 9 1.4. Intérêts de l’entomophagie ........................................................ 11 1.5. Inconvénients de l’entomophagie .............................................. 14 2. Tenebrio molitor ................................................................................. 15 2.1. Généralités .................................................................................. 15 2.2. Composition ................................................................................ 16 3. Acheta domestica ............................................................................... 17 3.1. Généralités .................................................................................. 17 3.2. Composition ................................................................................ 18 4. Allergies alimentaires ......................................................................... 18 4.1. Réaction allergique ..................................................................... 18 4.2. Mécanisme d’une réaction allergique alimentaire ..................... 19 4.3. Allergènes propres aux insectes ................................................. 20 4.4. Arginine kinase ............................................................................ 21 4.5. Température de dénaturation .................................................... 22 Chapitre 2 : objectifs et stratégie ......................................................... 23 Chapitre 3 : matériels et méthodes ...................................................... 26 1. Matériel biologique ............................................................................ 26 1.1. Larves de T. molitor et A. domestica ........................................... 26 2. Purification de l’arginine kinase .......................................................... 27 2.1. Arginine kinase du T. molitor ...................................................... 27 2.2. Arginine kinase d’A. domestica ................................................... 32 3. Fractionnement des poudres de T. molitor .......................................... 32 3.1. Séchage ....................................................................................... 32 3.2. Dosage protéines par la méthode de Dumas.............................. 33 4. Western Blot ...................................................................................... 34 4.1. Réactifs ........................................................................................ 34 4.2. Mode opératoire ......................................................................... 35 5. DSC : température de dénaturation .................................................... 38 Chapitre 4 : résultats et discussion ....................................................... 40 1. Résultats des extractions protéiques ................................................... 40 2. Purification de l’arginine kinase .......................................................... 41 2.1. Graphique chromatogramme du T. molitor ................................ 41 2.2. Graphique chromatogramme d’A. domestica ............................ 43 3. Fractionnement poudre de T. molitor et pourcentage en protéines ..... 44 4. Western Blot ...................................................................................... 45 4.1. T. molitor ..................................................................................... 45 4.6. A. domestica ................................................................................ 46 5. DSC – Température de dénaturation ................................................... 47 5.1. DSC sur le fractionnement de T. molitor .................................... 47 5.2. DSC sur la poudre lyophilisée chauffée à 80°C et 105°C............. 49 Conclusion générale ............................................................................. 51 Liste d’abréviation ............................................................................... 53 Liste des figures ................................................................................... 54 Liste des tableaux ................................................................................ 55 Références ........................................................................................... 56 Annexes ............................................................................................... 62 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65876

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