Détermination simultanée du guanidinoacétate, de la créatine et de la créatinine par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem : outil de diagnostic biochimique pour les syndromes de déficit en créatine et perspectives d’utilisation sur les fibroblastes / Laetitia Van Noolen in Annales de Biologie Clinique, 71/4 (Juillet-août 2013)

Public ISBD [article]  inAnnales de Biologie Clinique > 71/4 (Juillet-août 2013) . - p.429-437 Titre : Détermination simultanée du guanidinoacétate, de la créatine et de la créatinine par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem : outil de diagnostic biochimique pour les syndromes de déficit en créatine et perspectives d’utilisation sur les fibroblastes Type de document : texte imprimé Auteurs : Laetitia Van Noolen, Auteur ; Denis Monneret, Auteur ; Véronique Ducros, Auteur Année de publication : 2013 Article en page(s) : p.429-437 Langues : Français (fre) Mots-clés : créatine  transporteur de la créatine  fibroblaste  guanidinoacétate  spectrométrie de masse en tandem Résumé : Guanidinoacétate (GAA) et créatine (Cr) sont des marqueurs biochimiques des syndromes de déficit en Cr (SDC). Nous décrivons une méthode de chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (LC/MSMS) pour la détermination simultanée de GAA, Cr et créatinine (Crn). L’incorporation de Cr dans les fibroblastes pour la confirmation diagnostique du déficit en transporteur de la Cr est également étudiée. La séparation chromatographique des trois composés butylés et l’utilisation d’étalons internes marqués permet leur quantification par LC/MSMS en mode électrospray positif. La technique est linéaire de 0 à 600, 675 et 4 500 μmol/L et la limite de quantification est de 0,1 ; 0,04 et 0,9 μmol/L pour GAA, Cr et Crn respectivement. La répétabilité et la fidélité intermédiaire présentent un coefficient de variation < 11 %. Les taux de récupération des surcharges sont compris entre 83 et 109 %. Les valeurs de référence dans le liquide céphalorachidien de sujets ≥ 14 ans ont été établies pour GAA et Cr. Cinq lignées de fibroblastes ont été utilisées pour l’étude de l’incorporation de Cr. Celle-ci augmente avec la concentration en Cr dans le milieu de culture et est diminuée par un inhibiteur du transporteur de la Cr (3-guanidinopropionate, 500 μmol/L) (96 h d’incubation ; [Cr dans le milieu] = 25 μmol/L ; p < 0,05). Le dosage de GAA, Cr et Crn par LC/MSMS pour le diagnostic de SDC proposé est fiable et s’applique à plusieurs milieux biologiques. Nous renforçons également l’intérêt de l’étude d’incorporation de la Cr pour le diagnostic de déficits en transporteur de la Cr. Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=75070 [article] Détermination simultanée du guanidinoacétate, de la créatine et de la créatinine par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem : outil de diagnostic biochimique pour les syndromes de déficit en créatine et perspectives d’utilisation sur les fibroblastes [texte imprimé] / Laetitia Van Noolen, Auteur ; Denis Monneret, Auteur ; Véronique Ducros, Auteur . - 2013 . - p.429-437. Langues : Français (fre) in Annales de Biologie Clinique > 71/4 (Juillet-août 2013) . - p.429-437 Mots-clés : créatine  transporteur de la créatine  fibroblaste  guanidinoacétate  spectrométrie de masse en tandem Résumé : Guanidinoacétate (GAA) et créatine (Cr) sont des marqueurs biochimiques des syndromes de déficit en Cr (SDC). Nous décrivons une méthode de chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (LC/MSMS) pour la détermination simultanée de GAA, Cr et créatinine (Crn). L’incorporation de Cr dans les fibroblastes pour la confirmation diagnostique du déficit en transporteur de la Cr est également étudiée. La séparation chromatographique des trois composés butylés et l’utilisation d’étalons internes marqués permet leur quantification par LC/MSMS en mode électrospray positif. La technique est linéaire de 0 à 600, 675 et 4 500 μmol/L et la limite de quantification est de 0,1 ; 0,04 et 0,9 μmol/L pour GAA, Cr et Crn respectivement. La répétabilité et la fidélité intermédiaire présentent un coefficient de variation < 11 %. Les taux de récupération des surcharges sont compris entre 83 et 109 %. Les valeurs de référence dans le liquide céphalorachidien de sujets ≥ 14 ans ont été établies pour GAA et Cr. Cinq lignées de fibroblastes ont été utilisées pour l’étude de l’incorporation de Cr. Celle-ci augmente avec la concentration en Cr dans le milieu de culture et est diminuée par un inhibiteur du transporteur de la Cr (3-guanidinopropionate, 500 μmol/L) (96 h d’incubation ; [Cr dans le milieu] = 25 μmol/L ; p < 0,05). Le dosage de GAA, Cr et Crn par LC/MSMS pour le diagnostic de SDC proposé est fiable et s’applique à plusieurs milieux biologiques. Nous renforçons également l’intérêt de l’étude d’incorporation de la Cr pour le diagnostic de déficits en transporteur de la Cr. Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=75070

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