Centre de Documentation Campus Montignies
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Caractérisation de pools de cellules souches dentaires en vue du développement de nouvelles procédures de régénération de la pulpe dentaire / SOPHIE LIGOT
Titre : Caractérisation de pools de cellules souches dentaires en vue du développement de nouvelles procédures de régénération de la pulpe dentaire Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : SOPHIE LIGOT, Auteur Année de publication : 2016 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Louvain Drug Research Institute LDRI Woluwe-Saint-Lambert dent cellules souches émail dentine pulpe papille carie DPSCs SCAPs culture cellulaire pools FACS RT-PCR chondroblastes neurodifférenciation ostéoblastes Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières
Remerciements
Présentation du lieu de stage....................................................................................................8
Introduction.............................................................................................................................10
Contexte général......................................................................................................................12
1 La dent ............................................................................................................................... 12
1.1 Généralités ................................................................................................................. 12
1.1.1 Structure ............................................................................................................. 12
1.1.2 Développement .................................................................................................. 12
1.1.3 Eruption .............................................................................................................. 13
1.2 L'émail ........................................................................................................................ 15
1.3 La dentine .................................................................................................................. 16
1.4 La pulpe ...................................................................................................................... 17
1.5 La papille .................................................................................................................... 19
2 La carie .............................................................................................................................. 20
2.1 Généralités ................................................................................................................. 20
2.2 Pulpite et nécrose pulpaire ........................................................................................ 23
2.3 Traitement ................................................................................................................. 26
3 Les cellules souches ........................................................................................................... 27
3.1 Les cellules souches en général ................................................................................. 27
3.2 Les cellules souches dentaires ................................................................................... 29
3.2.1 DPSCs .................................................................................................................. 29
3.2.2 SCAPs .................................................................................................................. 30
3.2.3 Autres types de cellules souches dentaires ....................................................... 30
Objectifs...................................................................................................................................32
Matériels et méthodes.............................................................................................................34
1 Recueil et congélation des DPSCs et SCAPs ...................................................................... 34
2 Décongélation et culture cellulaire ................................................................................... 34
2.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 34
2.2 Méthode .................................................................................................................... 35
3 Comptage et passage des cellules..................................................................................... 35
3.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 35
3.2 Méthode .................................................................................................................... 36
4 Réalisation des pools de cellules ....................................................................................... 37
4.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 37
4.2 Méthode .................................................................................................................... 38
5 Congélation des pools ....................................................................................................... 38
5.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 38
5.2 Méthode .................................................................................................................... 38
6 FACS ................................................................................................................................... 39
6.1 Point théorique .......................................................................................................... 39
6.2 Matériels et réactifs ................................................................................................... 41
6.3 Méthode .................................................................................................................... 41
7 RT-PCR ............................................................................................................................... 42
7.1 Point théorique .......................................................................................................... 42
7.2 Matériels et réactifs ................................................................................................... 45
7.3 Méthode .................................................................................................................... 46
7.3.1 Extraction d'ARN ................................................................................................. 46
7.3.2 Préparation des cDNA : ...................................................................................... 47
7.3.3 RT-PCR : .............................................................................................................. 47
8 Différenciation en chondroblastes .................................................................................... 48
8.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 48
8.2 Méthode .................................................................................................................... 49
8.3 Enrobage, réalisation de coupes histologiques et colorations : ................................ 49
9 Neurodifférenciation ......................................................................................................... 50
9.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 50
9.2 Méthode .................................................................................................................... 51
9.3 Marquage panNeuroFilament : ................................................................................. 51
10 Différenciation en ostéoblastes ........................................................................................ 51
10.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 51
10.2 Méthode .................................................................................................................... 52
10.3 Marquage Alizarin Red : ............................................................................................. 52
Résultats..................................................................................................................................54
1 Recueil et congélation des DPSCs et SCAPs ...................................................................... 54
2 Réalisation des pools de cellules ....................................................................................... 54
2.1 DPSCs ......................................................................................................................... 54
2.2 SCAPs .......................................................................................................................... 54
3 Congélation des pools à P3 ............................................................................................... 55
3.1 DPSCs ......................................................................................................................... 55
3.2 SCAPs .......................................................................................................................... 55
4 FACS ................................................................................................................................... 56
4.1 DPSCs à P5 .................................................................................................................. 56
4.2 SCAPs à P5 .................................................................................................................. 56
4.3 DPSCs à P10 ................................................................................................................ 56
4.4 SCAPs à P10 ................................................................................................................ 56
4.5 Comparaison du pool DPSC à P5 et P10 .................................................................... 57
4.6 Comparaison du pool DPSC à P5 et P10 .................................................................... 57
5 RT-PCR ............................................................................................................................... 57
6 Différenciation en chondroblastes .................................................................................... 59
6.1 DPSCs à P5 .................................................................................................................. 59
6.2 SCAPs à P5 .................................................................................................................. 59
7 Neurodifférenciation des DPSCs et SCAPs à P5 ................................................................ 59
8 Différenciation en ostéoblastes ........................................................................................ 60
8.1 DPSCs à P5 .................................................................................................................. 60
8.2 SCAPs à P5 .................................................................................................................. 61
Discussion................................................................................................................................62
1 FACS ................................................................................................................................... 62
2 RT-PCR ............................................................................................................................... 62
3 Différenciation en chondroblastes .................................................................................... 63
4 Neurodifférenciation ......................................................................................................... 63
5 Différenciation en ostéoblastes ........................................................................................ 64
Conclusion................................................................................................................................66
Liste des abréviations...............................................................................................................68
Bibliographie............................................................................................................................70
AnnexesPermalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65680 Caractérisation de pools de cellules souches dentaires en vue du développement de nouvelles procédures de régénération de la pulpe dentaire [TFE / Mémoire] / SOPHIE LIGOT, Auteur . - 2016.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Louvain Drug Research Institute LDRI Woluwe-Saint-Lambert dent cellules souches émail dentine pulpe papille carie DPSCs SCAPs culture cellulaire pools FACS RT-PCR chondroblastes neurodifférenciation ostéoblastes Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières
Remerciements
Présentation du lieu de stage....................................................................................................8
Introduction.............................................................................................................................10
Contexte général......................................................................................................................12
1 La dent ............................................................................................................................... 12
1.1 Généralités ................................................................................................................. 12
1.1.1 Structure ............................................................................................................. 12
1.1.2 Développement .................................................................................................. 12
1.1.3 Eruption .............................................................................................................. 13
1.2 L'émail ........................................................................................................................ 15
1.3 La dentine .................................................................................................................. 16
1.4 La pulpe ...................................................................................................................... 17
1.5 La papille .................................................................................................................... 19
2 La carie .............................................................................................................................. 20
2.1 Généralités ................................................................................................................. 20
2.2 Pulpite et nécrose pulpaire ........................................................................................ 23
2.3 Traitement ................................................................................................................. 26
3 Les cellules souches ........................................................................................................... 27
3.1 Les cellules souches en général ................................................................................. 27
3.2 Les cellules souches dentaires ................................................................................... 29
3.2.1 DPSCs .................................................................................................................. 29
3.2.2 SCAPs .................................................................................................................. 30
3.2.3 Autres types de cellules souches dentaires ....................................................... 30
Objectifs...................................................................................................................................32
Matériels et méthodes.............................................................................................................34
1 Recueil et congélation des DPSCs et SCAPs ...................................................................... 34
2 Décongélation et culture cellulaire ................................................................................... 34
2.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 34
2.2 Méthode .................................................................................................................... 35
3 Comptage et passage des cellules..................................................................................... 35
3.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 35
3.2 Méthode .................................................................................................................... 36
4 Réalisation des pools de cellules ....................................................................................... 37
4.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 37
4.2 Méthode .................................................................................................................... 38
5 Congélation des pools ....................................................................................................... 38
5.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 38
5.2 Méthode .................................................................................................................... 38
6 FACS ................................................................................................................................... 39
6.1 Point théorique .......................................................................................................... 39
6.2 Matériels et réactifs ................................................................................................... 41
6.3 Méthode .................................................................................................................... 41
7 RT-PCR ............................................................................................................................... 42
7.1 Point théorique .......................................................................................................... 42
7.2 Matériels et réactifs ................................................................................................... 45
7.3 Méthode .................................................................................................................... 46
7.3.1 Extraction d'ARN ................................................................................................. 46
7.3.2 Préparation des cDNA : ...................................................................................... 47
7.3.3 RT-PCR : .............................................................................................................. 47
8 Différenciation en chondroblastes .................................................................................... 48
8.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 48
8.2 Méthode .................................................................................................................... 49
8.3 Enrobage, réalisation de coupes histologiques et colorations : ................................ 49
9 Neurodifférenciation ......................................................................................................... 50
9.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 50
9.2 Méthode .................................................................................................................... 51
9.3 Marquage panNeuroFilament : ................................................................................. 51
10 Différenciation en ostéoblastes ........................................................................................ 51
10.1 Matériels et réactifs ................................................................................................... 51
10.2 Méthode .................................................................................................................... 52
10.3 Marquage Alizarin Red : ............................................................................................. 52
Résultats..................................................................................................................................54
1 Recueil et congélation des DPSCs et SCAPs ...................................................................... 54
2 Réalisation des pools de cellules ....................................................................................... 54
2.1 DPSCs ......................................................................................................................... 54
2.2 SCAPs .......................................................................................................................... 54
3 Congélation des pools à P3 ............................................................................................... 55
3.1 DPSCs ......................................................................................................................... 55
3.2 SCAPs .......................................................................................................................... 55
4 FACS ................................................................................................................................... 56
4.1 DPSCs à P5 .................................................................................................................. 56
4.2 SCAPs à P5 .................................................................................................................. 56
4.3 DPSCs à P10 ................................................................................................................ 56
4.4 SCAPs à P10 ................................................................................................................ 56
4.5 Comparaison du pool DPSC à P5 et P10 .................................................................... 57
4.6 Comparaison du pool DPSC à P5 et P10 .................................................................... 57
5 RT-PCR ............................................................................................................................... 57
6 Différenciation en chondroblastes .................................................................................... 59
6.1 DPSCs à P5 .................................................................................................................. 59
6.2 SCAPs à P5 .................................................................................................................. 59
7 Neurodifférenciation des DPSCs et SCAPs à P5 ................................................................ 59
8 Différenciation en ostéoblastes ........................................................................................ 60
8.1 DPSCs à P5 .................................................................................................................. 60
8.2 SCAPs à P5 .................................................................................................................. 61
Discussion................................................................................................................................62
1 FACS ................................................................................................................................... 62
2 RT-PCR ............................................................................................................................... 62
3 Différenciation en chondroblastes .................................................................................... 63
4 Neurodifférenciation ......................................................................................................... 63
5 Différenciation en ostéoblastes ........................................................................................ 64
Conclusion................................................................................................................................66
Liste des abréviations...............................................................................................................68
Bibliographie............................................................................................................................70
AnnexesPermalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65680 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Conception, synthèse et évaluation pharmacologique d’inhibiteurs potentiels du récepteur C-Kit / REZKIA BENKECHIDA
Titre : Conception, synthèse et évaluation pharmacologique d’inhibiteurs potentiels du récepteur C-Kit Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : REZKIA BENKECHIDA, Année de publication : 2016 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : Biologie médicale Hôpital Civil Marie Curie Charleroi LDRI Louvain Drug Research Institute Université Catholique de Louvain Woluwe-Saint-Lambert protéines kinase RTKs récepteur C-Kit mécanisme d'activation structure cancer site actif de C-Kit inhibiteur de C-Kit synthèse organique bromation du 4-nitro-2-bromotoluène chromatographie sur couche mince CCM résonance magnétique nucléaire RMN spectrométrie de masse haute résolution HRMS Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Tables des matières
Présentation du laboratoire ................................ ................................ ................................ ............... 7
Introduction générale ................................ ................................ ................................ ........................ 9
1. Contexte Général................................ ................................ ................................ ...................... 11
1.1. Le cancer ................................ ................................ ................................ ............................. 11
1.2. Les protéines de type kinase ................................ ................................ ............................. 12
1.2.1. Généralités sur les protéines kinase ................................ ................................ ........... 12
1.2.2. Les récepteurs à activité tyrosine kinase (RTKs) ................................ ....................... 13
1.3. Le récepteur C-Kit ................................ ................................ ................................ ............... 14
1.3.1. Structure de C-Kit ................................ ................................ ................................ ....... 14
1.3.2. Mécanisme d’activation de C-Kit................................ ................................ ................ 15
1.3.3. Distribution de C-Kit ................................ ................................ ................................ ... 16
1.3.4. C-Kit et cancer ................................ ................................ ................................ ............. 16
1.4. Les inhibiteurs de l‟activité tyrosine kinase du récepteur C-Kit ................................ ......... 17
1.4.1. Domaine kinase et site actif de C-Kit ................................ ................................ ......... 17
1.4.2. Inhibiteurs de C-Kit................................ ................................ ................................ ..... 19
2. Conception d’inhibiteurs potentiels de C-Kit ................................ ................................ ........ 23
2.1. Travaux antérieurs ................................ ................................ ................................ ............... 23
2.2. Objectifs ................................ ................................ ................................ .............................. 24
3. Résultats et discussion ................................ ................................ ................................ ............. 27
3.1. Synthèse organique ................................ ................................ ................................ .............. 27
3.1.1. Voie de synthèse générale ................................ ................................ ............................ 27
3.1.2. Bromation du 4-nitro-2-bromotoluène ................................ ................................ ....... 27
3.1.3. Substitution nucléophile ................................ ................................ ............................. 29
3.1.4. Réduction du motif nitro 1 ................................ ................................ .......................... 31
3.1.5. Formation du motif urée par condensation ................................ ............................... 31
3.1.6. Réduction du motif nitro 2 ................................ ................................ .......................... 32
3.1.7. Substitution nucléophile aromatique ................................ ................................ ......... 33
3.2. Partie analytique ................................ ................................ ................................ .................. 33
3.2.1. La chromatographie sur couche mince (CCM) ................................ ......................... 33
3.2.2. La résonance magnétique nucléaire (RMN) ................................ .............................. 34
3.2.3. La spectrométrie de masse haute résolution (HRMS) ................................ ............... 36
4. Conclusions & perspectives ................................ ................................ ................................ ..... 39
Bibliographie ................................ ................................ ................................ ................................ .... 41
Liste des figures, tableaux et schémas ................................ ................................ ............................ 45
Liste des abréviations................................ ................................ ................................ ....................... 47
Annexes ................................ ................................ ................................ ................................ ............. 49
Annexe 1 : Synthèse du bromure de 2-bromo-4-nitrobenzyle (BR-001) et du bromure de 2,2-dibromo-4-nitrobenzyle (BR-001-PS) ................................ ................................ ........................... 50
Annexe 2 : Synthèse de la 1(-2-bromo-4-nitrobenzyle)-4-méthylpipérazine (BR-003), et de la 4-(2-bromo-4-nitrobenzyle)-1-(3-bromo-4-nitrobenzyl)-1-méthylpipérazin-1-ium (BR-003-PS) ... 51
Annexe 3 : Synthèse de la 1-(2-bromo-4-aminobenzyle)-4-méthylpipérazine (BR004) ............... 52
Annexe 4 : Synthèse de la N-(3-bromo-4-((4-méthylpipérazine-1-yl)méthyl)phényl)-N‟-(4-nitro-phényl)urée (BR-005) et de la N-(4-nitrophényl)- N‟-(4-nitrophényl)urée (BR-005-PS) ............. 53
Annexe 5 : Synthèse de la N-(3-bromo-4-((4-méthylpipérazine-1-yl)méthyl)phényl)-N‟-(4-amino-phényl)urée (BR006) ................................ ................................ ................................ .......... 54Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65661 Conception, synthèse et évaluation pharmacologique d’inhibiteurs potentiels du récepteur C-Kit [TFE / Mémoire] / REZKIA BENKECHIDA, . - 2016.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : Biologie médicale Hôpital Civil Marie Curie Charleroi LDRI Louvain Drug Research Institute Université Catholique de Louvain Woluwe-Saint-Lambert protéines kinase RTKs récepteur C-Kit mécanisme d'activation structure cancer site actif de C-Kit inhibiteur de C-Kit synthèse organique bromation du 4-nitro-2-bromotoluène chromatographie sur couche mince CCM résonance magnétique nucléaire RMN spectrométrie de masse haute résolution HRMS Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Tables des matières
Présentation du laboratoire ................................ ................................ ................................ ............... 7
Introduction générale ................................ ................................ ................................ ........................ 9
1. Contexte Général................................ ................................ ................................ ...................... 11
1.1. Le cancer ................................ ................................ ................................ ............................. 11
1.2. Les protéines de type kinase ................................ ................................ ............................. 12
1.2.1. Généralités sur les protéines kinase ................................ ................................ ........... 12
1.2.2. Les récepteurs à activité tyrosine kinase (RTKs) ................................ ....................... 13
1.3. Le récepteur C-Kit ................................ ................................ ................................ ............... 14
1.3.1. Structure de C-Kit ................................ ................................ ................................ ....... 14
1.3.2. Mécanisme d’activation de C-Kit................................ ................................ ................ 15
1.3.3. Distribution de C-Kit ................................ ................................ ................................ ... 16
1.3.4. C-Kit et cancer ................................ ................................ ................................ ............. 16
1.4. Les inhibiteurs de l‟activité tyrosine kinase du récepteur C-Kit ................................ ......... 17
1.4.1. Domaine kinase et site actif de C-Kit ................................ ................................ ......... 17
1.4.2. Inhibiteurs de C-Kit................................ ................................ ................................ ..... 19
2. Conception d’inhibiteurs potentiels de C-Kit ................................ ................................ ........ 23
2.1. Travaux antérieurs ................................ ................................ ................................ ............... 23
2.2. Objectifs ................................ ................................ ................................ .............................. 24
3. Résultats et discussion ................................ ................................ ................................ ............. 27
3.1. Synthèse organique ................................ ................................ ................................ .............. 27
3.1.1. Voie de synthèse générale ................................ ................................ ............................ 27
3.1.2. Bromation du 4-nitro-2-bromotoluène ................................ ................................ ....... 27
3.1.3. Substitution nucléophile ................................ ................................ ............................. 29
3.1.4. Réduction du motif nitro 1 ................................ ................................ .......................... 31
3.1.5. Formation du motif urée par condensation ................................ ............................... 31
3.1.6. Réduction du motif nitro 2 ................................ ................................ .......................... 32
3.1.7. Substitution nucléophile aromatique ................................ ................................ ......... 33
3.2. Partie analytique ................................ ................................ ................................ .................. 33
3.2.1. La chromatographie sur couche mince (CCM) ................................ ......................... 33
3.2.2. La résonance magnétique nucléaire (RMN) ................................ .............................. 34
3.2.3. La spectrométrie de masse haute résolution (HRMS) ................................ ............... 36
4. Conclusions & perspectives ................................ ................................ ................................ ..... 39
Bibliographie ................................ ................................ ................................ ................................ .... 41
Liste des figures, tableaux et schémas ................................ ................................ ............................ 45
Liste des abréviations................................ ................................ ................................ ....................... 47
Annexes ................................ ................................ ................................ ................................ ............. 49
Annexe 1 : Synthèse du bromure de 2-bromo-4-nitrobenzyle (BR-001) et du bromure de 2,2-dibromo-4-nitrobenzyle (BR-001-PS) ................................ ................................ ........................... 50
Annexe 2 : Synthèse de la 1(-2-bromo-4-nitrobenzyle)-4-méthylpipérazine (BR-003), et de la 4-(2-bromo-4-nitrobenzyle)-1-(3-bromo-4-nitrobenzyl)-1-méthylpipérazin-1-ium (BR-003-PS) ... 51
Annexe 3 : Synthèse de la 1-(2-bromo-4-aminobenzyle)-4-méthylpipérazine (BR004) ............... 52
Annexe 4 : Synthèse de la N-(3-bromo-4-((4-méthylpipérazine-1-yl)méthyl)phényl)-N‟-(4-nitro-phényl)urée (BR-005) et de la N-(4-nitrophényl)- N‟-(4-nitrophényl)urée (BR-005-PS) ............. 53
Annexe 5 : Synthèse de la N-(3-bromo-4-((4-méthylpipérazine-1-yl)méthyl)phényl)-N‟-(4-amino-phényl)urée (BR006) ................................ ................................ ................................ .......... 54Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65661 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Donner la main à la bientraitance / Vanessa Degrelle
Titre : Donner la main à la bientraitance Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Vanessa Degrelle, Auteur ; Emmanuel Nicolas, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : HELHA-Ecole sociale de Charleroi Année de publication : 2019 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Mots-clés : crèche des 3 mats Woluwe-Saint-Lambert Bientraitance Reconnaissance Collaboration Souffrance Enfants Index. décimale : TFE Social TFE Social Note de contenu : Tables des matières
INTRODUCTION ................................................................................................................................ 1
CADRE INSTITUTIONNEL................................................................................................................. 2
1. SECTEUR D’ACTIVITÉS ................................................................................................................ 2
2. HISTORIQUE DE L’INSTITUTION .................................................................................................... 2
3. ANALYSE SOCIODÉMOGRAPHIQUE ............................................................................................... 3
4. ORGANISATION/STRUCTURE HIÉRARCHIQUE ................................................................................. 5
4.1. L’institution et son administration : .................................................................................. 5
4.2. Politique : ........................................................................................................................ 6
5. LÉGISLATION ............................................................................................................................. 6
5.1. Législation de l’ONE : ..................................................................................................... 6
5.2. Recommandation de l’AFCSA : ...................................................................................... 7
5.3. Règles de fonctionnement : ............................................................................................ 8
6. MOYENS MIS EN OEUVRE ........................................................................................................... 11
6.1. Projet pédagogique : ..................................................................................................... 11
6.2. Moyens humains : ......................................................................................................... 11
6.2.1. Personnel communal ................................................................................................ 11
6.2.2. Personnel hebdomadaire .......................................................................................... 16
6.3. Moyens financiers : ....................................................................................................... 18
6.4. Moyens matériels : ........................................................................................................ 19
7. PARTENAIRES, RÉSEAU, COLLABORATION. ................................................................................. 20
CADRE PRATIQUE ET THÉORIQUE. ............................................................................................. 21
1. HYPOTHÈSE DE TRAVAIL........................................................................................................... 21
2. DÉFINIR LE SYSTÈME ............................................................................................................... 22
2.1. Définition des sous systèmes ........................................................................................ 23
2.1.1. Sous-système pédagogique ...................................................................................... 23
2.1.2. Sous système politique : clientéliste.......................................................................... 23
3. MÉTHODOLOGIQUE .................................................................................................................. 24
3.1. Analyser du système de soins : la crèche ..................................................................... 24
3.2. Analyse des interactions ............................................................................................... 25
4. APPROCHE SCÉNARISÉE D’UNE SITUATION CONFLICTUELLE. ........................................................ 26
4.1. Méthodologie ................................................................................................................ 26
4.2. Acteurs en présence ..................................................................................................... 27
5. PANEL DE PARADIGMES ............................................................................................................ 30
5.1. Paradigme du changement et de la résistance au changement ................................... 30
5.1.1. Dernière nouvelle méthode de fonctionnement ......................................................... 30
5.1.2. Dilemmes de la règle ................................................................................................ 31
Dilemmes des critères : ........................................................................................................ 31
5.1.3. Le sentiment de perte de responsabilité ................................................................... 33
Pistes d’intervention : ........................................................................................................ 39
5.2. Paradigme d’incidence. ................................................................................................. 44
5.2.1. Incident n°1 : l’inscription : ........................................................................................ 44
5.2.2. Incident n°2 : le désespoir : ...................................................................................... 47
5.2.3. Incident n°3 : Réunion entre la crèche et l’ONE....................................................... 54
Conclusion : ...................................................................................................................... 63
5.3. Paradigme culturel ........................................................................................................ 64
Conclusion : ...................................................................................................................... 66
5.4. Paradigme de la souffrance. ......................................................................................... 66
Conclusions : .................................................................................................................... 77
6. LA BIENTRAITANCE................................................................................................................... 82
6.1. La maltraitance ............................................................................................................. 82
6.1.1. L’accompagnement pour éviter des attitudes maltraitantes : (Balises cliniques pour l’accompagnement des situations de danger) ...................................................................... 83
6.1.2. Actes de maltraitance, envers les enfants, qui pourraient être présents au sein d’une crèche : ................................................................................................................................. 84
6.1.3. Troubles de l’attachement : ....................................................................................... 86
6.2. Définition de la bientraitance : ....................................................................................... 87
6.2.1. Les fondamentaux de la bientraitance : .................................................................... 87
6.2.2. En chemin vers la bientraitance : .............................................................................. 88
6.2.3. Précarité :.................................................................................................................. 89
6.3. Situation d’une attitude de bientraitance envers une famille : ....................................... 90
Conclusions : .................................................................................................................... 91
7. PROJET AU SEIN DE L’INSTITUTION. ........................................................................................... 91
7.1. Projet : .......................................................................................................................... 92
7.2. Objectifs : ...................................................................................................................... 92
7.3. Développement du projet : ............................................................................................ 93
7.4. Fréquence du projet : .................................................................................................... 93
7.5. Emergence et déroulement du projet : .......................................................................... 93
CONCLUSION .................................................................................................................................. 95
BIBLIOGRAPHIE ............................................................................................................................. 99Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=80177 Donner la main à la bientraitance [TFE / Mémoire] / Vanessa Degrelle, Auteur ; Emmanuel Nicolas, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : HELHA-Ecole sociale de Charleroi, 2019.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Mots-clés : crèche des 3 mats Woluwe-Saint-Lambert Bientraitance Reconnaissance Collaboration Souffrance Enfants Index. décimale : TFE Social TFE Social Note de contenu : Tables des matières
INTRODUCTION ................................................................................................................................ 1
CADRE INSTITUTIONNEL................................................................................................................. 2
1. SECTEUR D’ACTIVITÉS ................................................................................................................ 2
2. HISTORIQUE DE L’INSTITUTION .................................................................................................... 2
3. ANALYSE SOCIODÉMOGRAPHIQUE ............................................................................................... 3
4. ORGANISATION/STRUCTURE HIÉRARCHIQUE ................................................................................. 5
4.1. L’institution et son administration : .................................................................................. 5
4.2. Politique : ........................................................................................................................ 6
5. LÉGISLATION ............................................................................................................................. 6
5.1. Législation de l’ONE : ..................................................................................................... 6
5.2. Recommandation de l’AFCSA : ...................................................................................... 7
5.3. Règles de fonctionnement : ............................................................................................ 8
6. MOYENS MIS EN OEUVRE ........................................................................................................... 11
6.1. Projet pédagogique : ..................................................................................................... 11
6.2. Moyens humains : ......................................................................................................... 11
6.2.1. Personnel communal ................................................................................................ 11
6.2.2. Personnel hebdomadaire .......................................................................................... 16
6.3. Moyens financiers : ....................................................................................................... 18
6.4. Moyens matériels : ........................................................................................................ 19
7. PARTENAIRES, RÉSEAU, COLLABORATION. ................................................................................. 20
CADRE PRATIQUE ET THÉORIQUE. ............................................................................................. 21
1. HYPOTHÈSE DE TRAVAIL........................................................................................................... 21
2. DÉFINIR LE SYSTÈME ............................................................................................................... 22
2.1. Définition des sous systèmes ........................................................................................ 23
2.1.1. Sous-système pédagogique ...................................................................................... 23
2.1.2. Sous système politique : clientéliste.......................................................................... 23
3. MÉTHODOLOGIQUE .................................................................................................................. 24
3.1. Analyser du système de soins : la crèche ..................................................................... 24
3.2. Analyse des interactions ............................................................................................... 25
4. APPROCHE SCÉNARISÉE D’UNE SITUATION CONFLICTUELLE. ........................................................ 26
4.1. Méthodologie ................................................................................................................ 26
4.2. Acteurs en présence ..................................................................................................... 27
5. PANEL DE PARADIGMES ............................................................................................................ 30
5.1. Paradigme du changement et de la résistance au changement ................................... 30
5.1.1. Dernière nouvelle méthode de fonctionnement ......................................................... 30
5.1.2. Dilemmes de la règle ................................................................................................ 31
Dilemmes des critères : ........................................................................................................ 31
5.1.3. Le sentiment de perte de responsabilité ................................................................... 33
Pistes d’intervention : ........................................................................................................ 39
5.2. Paradigme d’incidence. ................................................................................................. 44
5.2.1. Incident n°1 : l’inscription : ........................................................................................ 44
5.2.2. Incident n°2 : le désespoir : ...................................................................................... 47
5.2.3. Incident n°3 : Réunion entre la crèche et l’ONE....................................................... 54
Conclusion : ...................................................................................................................... 63
5.3. Paradigme culturel ........................................................................................................ 64
Conclusion : ...................................................................................................................... 66
5.4. Paradigme de la souffrance. ......................................................................................... 66
Conclusions : .................................................................................................................... 77
6. LA BIENTRAITANCE................................................................................................................... 82
6.1. La maltraitance ............................................................................................................. 82
6.1.1. L’accompagnement pour éviter des attitudes maltraitantes : (Balises cliniques pour l’accompagnement des situations de danger) ...................................................................... 83
6.1.2. Actes de maltraitance, envers les enfants, qui pourraient être présents au sein d’une crèche : ................................................................................................................................. 84
6.1.3. Troubles de l’attachement : ....................................................................................... 86
6.2. Définition de la bientraitance : ....................................................................................... 87
6.2.1. Les fondamentaux de la bientraitance : .................................................................... 87
6.2.2. En chemin vers la bientraitance : .............................................................................. 88
6.2.3. Précarité :.................................................................................................................. 89
6.3. Situation d’une attitude de bientraitance envers une famille : ....................................... 90
Conclusions : .................................................................................................................... 91
7. PROJET AU SEIN DE L’INSTITUTION. ........................................................................................... 91
7.1. Projet : .......................................................................................................................... 92
7.2. Objectifs : ...................................................................................................................... 92
7.3. Développement du projet : ............................................................................................ 93
7.4. Fréquence du projet : .................................................................................................... 93
7.5. Emergence et déroulement du projet : .......................................................................... 93
CONCLUSION .................................................................................................................................. 95
BIBLIOGRAPHIE ............................................................................................................................. 99Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=80177 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire PURIFICATIONS PAR BILLES MAGNÉTIQUES DANS LE FLUX DU SÉQUENÇAGE SANGER / Ariane SAAN KEMEGNI
Titre : PURIFICATIONS PAR BILLES MAGNÉTIQUES DANS LE FLUX DU SÉQUENÇAGE SANGER Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Ariane SAAN KEMEGNI, Auteur Année de publication : 2016 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale UCL Saint-Luc Woluwe-Saint-Lambert PURIFICATION BILLES MAGNÉTIQUES SÉQUENÇAGE SANGER ADN Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : TABLE DES MATIÈRES
INTRODUCTION ................................................................................................................... 15
1 NOTION THÉORIQUE ................................................................................................... 19
1.1 Définition de l’ADN.................................................................................................. 19
1.2 Structure .................................................................................................................... 19
1.3 Propriétés de l’ADN .................................................................................................. 21
2 Séquençage Sanger ........................................................................................................... 23
2.1 Extraction de l’ADN ................................................................................................. 23
2.1.1 Extraction d’ADN par phénol-chloroforme-alcool isoamylique ....................... 24
2.1.2 Extraction de l’ADN par salting out .................................................................. 24
2.1.3 Extraction sur l’extracteur automatique QIAsymphony .................................... 25
2.2 Quantification de l’ADN ........................................................................................... 26
2.3 PCR .......................................................................................................................... 26
2.4 Purification du produit PCR ...................................................................................... 32
2.4.1 Purification par méthode enzymatique : ............................................................ 33
2.4.2 Purification par les billes magnétiques : ............................................................ 33
2.5 Séquençage Sanger proprement dit ........................................................................... 34 2.5.1 Principe .............................................................................................................. 34
2.6 Purification après la réaction de séquence ................................................................ 37
2.6.1 Purification par précipitation acétate-éthanol .................................................... 37
2.6.2 Purification d’ADN par gel-filtration sur résine Sephadex® G-50 Super fine.. 38
2.6.3 Purification par les billes magnétiques : AGENCOURT ®CLEANSEQ® ...... 39
2.7 Électrophorèse capillaire ........................................................................................... 40
Objectifs et stratégies ............................................................................................................... 41
3 Matériels et méthodes ....................................................................................................... 45
3.1 Matériel de base ........................................................................................................ 45
3.2 Réaction de polymérisation en chaine (PCR). .......................................................... 45
3.2.1 Matériel .............................................................................................................. 45
3.2.2 Réactifs .............................................................................................................. 46
3.2.3 Mode opératoire ................................................................................................. 47
3.3 Électrophorèse en gel d’agarose ou polyacrylamide ................................................. 48
3.3.1 Principe .............................................................................................................. 49
3.3.2 Matériel : ............................................................................................................ 49
3.3.3 Réactifs : ............................................................................................................ 50
3.3.4 Description ......................................................................................................... 50
3.4 Purification du produit PCR ...................................................................................... 52
3.4.1 Purification par méthode enzymatique .............................................................. 52
3.4.1.1 Réactifs ........................................................................................................... 52
3.4.1.2 Mode opératoire ............................................................................................. 52
3.4.2 Purification par billes magnétiques : AMPure Agencourt ................................. 52
3.4.2.1 Matériel et réactif ........................................................................................... 52
3.4.2.2 Mode opératoire ............................................................................................. 53
3.5 Séquençage Sanger .................................................................................................... 54
3.5.1 Matériels et Réactifs .......................................................................................... 54
3.5.2 Mode opératoire ................................................................................................. 55
3.6 Purification de la réaction de séquence ..................................................................... 56
3.6.1 Purification d’ADN par gel-filtration sur résine Sephadex® G-50 Super fine.. 56
3.6.1.1 Matériel et réactif ........................................................................................... 56
3.6.1.2 Mode opératoire ............................................................................................. 56
3.6.2 Purification par précipitation acétate-éthanol .................................................... 57
3.6.2.1 Réactifs et consommables .............................................................................. 57
3.6.2.2 Mode opératoire ............................................................................................. 57
3.6.3 Purification par les billes magnétiques : CleanSEQ Agencourt ............................ 58
3.6.3.1 Réactifs ........................................................................................................... 58
3.6.3.2 Mode opératoire .............................................................................................. 58
3.7 Analyseur génétique (séquenceur) : 3500XLDX ET 3730XL de chez Applied Biosystems ........................................................................................................................... 60
3.8 Analyses des données ................................................................................................ 61
4 RÉSULTATS et discussion .............................................................................................. 63
4.1 Choix des échantillons .............................................................................................. 63
4.2 Comparaison de la purification PCR par AMPure et par EXOSAP. ........................ 64
4.2.1 Utilisation de l’AMPure pour éliminer les dimeres de primers ......................... 67
4.3 Comparaison de technique de purification post-séquençage par CleanSEQ, SEPHADEX et précipitation acétate-éthanol. ...................................................................... 71
4.3.1 Comparaison CleanSEQ et SEPHADEX ........................................................... 71
4.3.2 Comparaison CleanSEQ et précipitation acétate- éthanol. ................................ 73
4.4 Application de la purification par billes magnétique dans le secteur HLA. ............. 76
Conclusion et perspectives ....................................................................................................... 79
Liste des illustrations ............................................................................................................... 81
Bibliographie............................................................................................................................ 83
Annexes.................................................................................................................................... 85Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65691 PURIFICATIONS PAR BILLES MAGNÉTIQUES DANS LE FLUX DU SÉQUENÇAGE SANGER [TFE / Mémoire] / Ariane SAAN KEMEGNI, Auteur . - 2016.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale UCL Saint-Luc Woluwe-Saint-Lambert PURIFICATION BILLES MAGNÉTIQUES SÉQUENÇAGE SANGER ADN Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : TABLE DES MATIÈRES
INTRODUCTION ................................................................................................................... 15
1 NOTION THÉORIQUE ................................................................................................... 19
1.1 Définition de l’ADN.................................................................................................. 19
1.2 Structure .................................................................................................................... 19
1.3 Propriétés de l’ADN .................................................................................................. 21
2 Séquençage Sanger ........................................................................................................... 23
2.1 Extraction de l’ADN ................................................................................................. 23
2.1.1 Extraction d’ADN par phénol-chloroforme-alcool isoamylique ....................... 24
2.1.2 Extraction de l’ADN par salting out .................................................................. 24
2.1.3 Extraction sur l’extracteur automatique QIAsymphony .................................... 25
2.2 Quantification de l’ADN ........................................................................................... 26
2.3 PCR .......................................................................................................................... 26
2.4 Purification du produit PCR ...................................................................................... 32
2.4.1 Purification par méthode enzymatique : ............................................................ 33
2.4.2 Purification par les billes magnétiques : ............................................................ 33
2.5 Séquençage Sanger proprement dit ........................................................................... 34 2.5.1 Principe .............................................................................................................. 34
2.6 Purification après la réaction de séquence ................................................................ 37
2.6.1 Purification par précipitation acétate-éthanol .................................................... 37
2.6.2 Purification d’ADN par gel-filtration sur résine Sephadex® G-50 Super fine.. 38
2.6.3 Purification par les billes magnétiques : AGENCOURT ®CLEANSEQ® ...... 39
2.7 Électrophorèse capillaire ........................................................................................... 40
Objectifs et stratégies ............................................................................................................... 41
3 Matériels et méthodes ....................................................................................................... 45
3.1 Matériel de base ........................................................................................................ 45
3.2 Réaction de polymérisation en chaine (PCR). .......................................................... 45
3.2.1 Matériel .............................................................................................................. 45
3.2.2 Réactifs .............................................................................................................. 46
3.2.3 Mode opératoire ................................................................................................. 47
3.3 Électrophorèse en gel d’agarose ou polyacrylamide ................................................. 48
3.3.1 Principe .............................................................................................................. 49
3.3.2 Matériel : ............................................................................................................ 49
3.3.3 Réactifs : ............................................................................................................ 50
3.3.4 Description ......................................................................................................... 50
3.4 Purification du produit PCR ...................................................................................... 52
3.4.1 Purification par méthode enzymatique .............................................................. 52
3.4.1.1 Réactifs ........................................................................................................... 52
3.4.1.2 Mode opératoire ............................................................................................. 52
3.4.2 Purification par billes magnétiques : AMPure Agencourt ................................. 52
3.4.2.1 Matériel et réactif ........................................................................................... 52
3.4.2.2 Mode opératoire ............................................................................................. 53
3.5 Séquençage Sanger .................................................................................................... 54
3.5.1 Matériels et Réactifs .......................................................................................... 54
3.5.2 Mode opératoire ................................................................................................. 55
3.6 Purification de la réaction de séquence ..................................................................... 56
3.6.1 Purification d’ADN par gel-filtration sur résine Sephadex® G-50 Super fine.. 56
3.6.1.1 Matériel et réactif ........................................................................................... 56
3.6.1.2 Mode opératoire ............................................................................................. 56
3.6.2 Purification par précipitation acétate-éthanol .................................................... 57
3.6.2.1 Réactifs et consommables .............................................................................. 57
3.6.2.2 Mode opératoire ............................................................................................. 57
3.6.3 Purification par les billes magnétiques : CleanSEQ Agencourt ............................ 58
3.6.3.1 Réactifs ........................................................................................................... 58
3.6.3.2 Mode opératoire .............................................................................................. 58
3.7 Analyseur génétique (séquenceur) : 3500XLDX ET 3730XL de chez Applied Biosystems ........................................................................................................................... 60
3.8 Analyses des données ................................................................................................ 61
4 RÉSULTATS et discussion .............................................................................................. 63
4.1 Choix des échantillons .............................................................................................. 63
4.2 Comparaison de la purification PCR par AMPure et par EXOSAP. ........................ 64
4.2.1 Utilisation de l’AMPure pour éliminer les dimeres de primers ......................... 67
4.3 Comparaison de technique de purification post-séquençage par CleanSEQ, SEPHADEX et précipitation acétate-éthanol. ...................................................................... 71
4.3.1 Comparaison CleanSEQ et SEPHADEX ........................................................... 71
4.3.2 Comparaison CleanSEQ et précipitation acétate- éthanol. ................................ 73
4.4 Application de la purification par billes magnétique dans le secteur HLA. ............. 76
Conclusion et perspectives ....................................................................................................... 79
Liste des illustrations ............................................................................................................... 81
Bibliographie............................................................................................................................ 83
Annexes.................................................................................................................................... 85Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65691 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Recombinase Polymerase Amplification : mise au point et application à la détection du bacille du charbon en conditions opérationnelles / Louise NIENHAUS
Titre : Recombinase Polymerase Amplification : mise au point et application à la détection du bacille du charbon en conditions opérationnelles Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Louise NIENHAUS, Auteur Année de publication : 2014 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : BIOLOGIE MÉDICALE CTMA WOLUWE-SAINT-LAMBERT RECOMBINASE POLYMERASE AMPLIFICATION BACILE DU CHARBON BIOTERRORISME BACILLUS ANTHRACIS LAMP TMA RPA SONDE PLASMIDE RECOMBINANT PCR ADK BA5345 LEF CAPA KIT EXO Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65407 Recombinase Polymerase Amplification : mise au point et application à la détection du bacille du charbon en conditions opérationnelles [TFE / Mémoire] / Louise NIENHAUS, Auteur . - 2014.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Langues : Français (fre)
Mots-clés : BIOLOGIE MÉDICALE CTMA WOLUWE-SAINT-LAMBERT RECOMBINASE POLYMERASE AMPLIFICATION BACILE DU CHARBON BIOTERRORISME BACILLUS ANTHRACIS LAMP TMA RPA SONDE PLASMIDE RECOMBINANT PCR ADK BA5345 LEF CAPA KIT EXO Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65407 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire