Centre de Documentation Campus Montignies
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Lundi : 8h-18h30
Mardi : 8h-18h30
Mercredi 9h-16h30
Jeudi : 8h-18h30
Vendredi : 8h-16h30
Attention, votre centre de documentation sera fermé du 27/04 au 12/05 inclus.
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EPIDEMIOLOGIE MOLECULAIRE AUX INFECTIONS A HELICOBACTER PYLORI EN REGION BRUXELLOISE / PAULINE MANDERLIER
Titre : EPIDEMIOLOGIE MOLECULAIRE AUX INFECTIONS A HELICOBACTER PYLORI EN REGION BRUXELLOISE Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : PAULINE MANDERLIER, Auteur ; Marie Hallin, Auteur Année de publication : 2015 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale CHU Saint Pierre Infections Helicobacter pylori Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’infection à H. pylori touche plus de 50 % de la population mondiale. Tous les
patients porteurs ont au minimum une gastrite. La majorité de ces patients vont rester
asymptomatiques, certains vont évoluer vers un ulcère et d’autres vont évoluer vers un cancer.
On sait que l’évolution vers un état plus pathologique comme l’ulcère ou le cancer gastrique
est influencée notamment par le génotype tel que défini par Multi Locus Sequence Typing
(MLST) et par le génotype de virulence de la souche. En effet, la présence de certains gènes
ou de certains allèles de gènes codant pour des facteurs de virulence confèrent à la bactérie
des propriétés inflammatoires élevées et sont des marqueurs prédictifs de l’apparition de
cancers gastriques (gènes cagA et vacA). Il existe par ailleurs aussi une association encore
mal élucidée entre la présence du gène cagA, le type de gène cagA, le type de gène vacA,
certaines lignées génétiques telles que définies par le MLST et l’origine ethno-géographiques
des hôtes. Bruxelles est une ville où on observe un grand brassage de populations et une
immigration d’individus porteurs de l’infection à H. pylori, acquise pendant l’enfance pour la
plupart, possiblement dans leur pays d’origine. Ce travail, inscrit dans un projet portant sur
l’étude de l’épidémiologie moléculaire aux infections à H. pylori en région bruxelloise, s’est
attaché à appliquer la technique MLST à une sélection de 42 souches représentatives de la
diversité des ethnies et des génotypes cagA et vacA observées en région bruxelloise afin de
documenter la diversité génétique des souches d’H. pylori des patients bruxellois, d’étudier le
lien éventuel avec le génotype vacA et cagA de ces souches et d’investiguer une éventuelle
corrélation entre le profil génétique des souches, l’origine ethno-géographique de ces patients
et leur clinique ; l’objectif à long terme étant de développer les techniques moléculaires visant
à permettre l’optimisation de la prise en charge des patients infectés par H. pylori et de leurs
proches. Nous avons observé par MLST une grande diversité génétique au sein des souches
d’H. pylori étudiées, diversité qui respecte l’origine ethno-géographique des patients dont
elles sont isolées. Une concordance a également été trouvée entre génotype MLST et
génotype vacA. Nous avons également exploré les génotypes de résistance portés par les
souches d’H. pylori résistantes à la clarithromycine dans cette même population bruxelloise.
La majorité présentaient la mutation A2143G Nos résultats sont concordants avec ceux
rapportés par d’autres auteurs, et nous n’avons pas observé de résistances non expliquées par
au moins une des trois mutations les plus fréquentes.Note de contenu : TABLE DES MATIÈRES
Présentation des lieux de stage: CHU Saint-‐Pierre –Centre de diagnostic moléculaire et CHU Brugmann
–
Laboratoire
de
bactériologie……………………………...5
Liste des abréviations .......................................................................................................................................... 7
Introduction………………………………………………………………………………………………………….9
1.1 Pathologie, prévalence de l’infection et enjeux de santé publique .......................................................... 9
1.2 Historique ................................................................................................................................................... 10
1.3 Taxonomie, morphologie, caractères biochimiques et croissance ......................................................... 11
1.4 Pathogénèse ................................................................................................................................................ 12
A. La protéine CagA ................................................................................................................................ 12
B. La protéine VacA ................................................................................................................................ 12
1.5 Mode de transmission et épidémiologie ................................................................................................... 13
1.6 Traitement .................................................................................................................................................. 15
A. Les différents plans thérapeutiques .................................................................................................... 15
B. La clarithromycine .............................................................................................................................. 17
C. Epidémiologie de la résistance ........................................................................................................... 18
1.7 Structure de population et épidémiologie moléculaire ........................................................................... 19
Objectifs………………………………………………………………………………………………………………21
Partie
pratique……………………………………………………………………………………………………22
BIOLOGIE MOLECULAIRE ................................................................................................................................. 22
1. Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) ............................................................................. 22
1. A. Extraction de l’ADN ....................................................................................................................... 23
1. B. Amplification
par
Réaction
de
Polymérisation
en
Chaîne
(PCR)-‐Séquençage
cyclique .......... 25
1. C. Digestion
enzymatique .................................................................................................................. 28
1. D. Electrophorèse
sur
gel
d’agarose
2
% ......................................................................................... 30
2. Multi Locus Sequence Typing (MLST) .................................................................................................... 31
2. A. Extraction de l’ADN ....................................................................................................................... 32
2. B. Amplification
par
PCR ................................................................................................................... 33
2. C. PCR
de
séquençage ........................................................................................................................ 34
2. D.
Clean-‐up
:
purification
des
produits
d’extension ........................................................................ 36
2. E. Séquençage ..................................................................................................................................... 38
2. F. Analyse
des
données ...................................................................................................................... 42
MICROBIOLOGIE ............................................................................................................................................... 43
1. Investigation des discordances observées entre les différentes méthodes de détermination de la
résistance utilisées lors d’un travail préliminaire ......................................................................................... 43
1. A. 1ère étape : repiquage des souches ................................................................................................... 43
4
1. A. 1. Matériel ....................................................................................................................................... 43
1. A. 2. Mode opératoire .......................................................................................................................... 43
1. A. 3. Technique d’isolement des souches ............................................................................................ 43
1. B. Détermination des C.M.I. ................................................................................................................ 44
1. B. 1. Principe de la bandelette E-test ................................................................................................... 45
1. B. 2. Matériel ....................................................................................................................................... 46
1. B. 3. Mode opératoire .......................................................................................................................... 46
1. C. Détermination de la résistance aux différents antibiotiques par la technique de diffusion en
disques .............................................................................................................................................................. 46
1. C. 1. Principe ........................................................................................................................................ 46
1. C. 2. Mode opératoire .......................................................................................................................... 47
Résultats……………………………………………………………………………………………………………..48
1. La résistance aux antibiotiques .................................................................................................................. 49
1. A. Vérification des discordances ......................................................................................................... 49
1. B. Génotype de résistance .................................................................................................................... 49
2. Multi Locus Sequence Typing .................................................................................................................... 50
2. A. Corrélation entre le profil génétique des souches et l’origine ethno-géographique des patients .... 52
2. B. Corrélation entre le génotype cagA et vacA (génotype de virulence) et le génotype par la
technique MLST .............................................................................................................................................. 54
Discussion…………………………………………………………………………………………………………...57
Conclusions
et
perspectives………………………………………………………………………………...59
Bibliographie .................................................................................................................................................... 60
Annexes ............................................................................................................................................................. 63
Résumé………………………………………………………………………………………………………………..65Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=64374 EPIDEMIOLOGIE MOLECULAIRE AUX INFECTIONS A HELICOBACTER PYLORI EN REGION BRUXELLOISE [TFE / Mémoire] / PAULINE MANDERLIER, Auteur ; Marie Hallin, Auteur . - 2015.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale CHU Saint Pierre Infections Helicobacter pylori Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’infection à H. pylori touche plus de 50 % de la population mondiale. Tous les
patients porteurs ont au minimum une gastrite. La majorité de ces patients vont rester
asymptomatiques, certains vont évoluer vers un ulcère et d’autres vont évoluer vers un cancer.
On sait que l’évolution vers un état plus pathologique comme l’ulcère ou le cancer gastrique
est influencée notamment par le génotype tel que défini par Multi Locus Sequence Typing
(MLST) et par le génotype de virulence de la souche. En effet, la présence de certains gènes
ou de certains allèles de gènes codant pour des facteurs de virulence confèrent à la bactérie
des propriétés inflammatoires élevées et sont des marqueurs prédictifs de l’apparition de
cancers gastriques (gènes cagA et vacA). Il existe par ailleurs aussi une association encore
mal élucidée entre la présence du gène cagA, le type de gène cagA, le type de gène vacA,
certaines lignées génétiques telles que définies par le MLST et l’origine ethno-géographiques
des hôtes. Bruxelles est une ville où on observe un grand brassage de populations et une
immigration d’individus porteurs de l’infection à H. pylori, acquise pendant l’enfance pour la
plupart, possiblement dans leur pays d’origine. Ce travail, inscrit dans un projet portant sur
l’étude de l’épidémiologie moléculaire aux infections à H. pylori en région bruxelloise, s’est
attaché à appliquer la technique MLST à une sélection de 42 souches représentatives de la
diversité des ethnies et des génotypes cagA et vacA observées en région bruxelloise afin de
documenter la diversité génétique des souches d’H. pylori des patients bruxellois, d’étudier le
lien éventuel avec le génotype vacA et cagA de ces souches et d’investiguer une éventuelle
corrélation entre le profil génétique des souches, l’origine ethno-géographique de ces patients
et leur clinique ; l’objectif à long terme étant de développer les techniques moléculaires visant
à permettre l’optimisation de la prise en charge des patients infectés par H. pylori et de leurs
proches. Nous avons observé par MLST une grande diversité génétique au sein des souches
d’H. pylori étudiées, diversité qui respecte l’origine ethno-géographique des patients dont
elles sont isolées. Une concordance a également été trouvée entre génotype MLST et
génotype vacA. Nous avons également exploré les génotypes de résistance portés par les
souches d’H. pylori résistantes à la clarithromycine dans cette même population bruxelloise.
La majorité présentaient la mutation A2143G Nos résultats sont concordants avec ceux
rapportés par d’autres auteurs, et nous n’avons pas observé de résistances non expliquées par
au moins une des trois mutations les plus fréquentes.Note de contenu : TABLE DES MATIÈRES
Présentation des lieux de stage: CHU Saint-‐Pierre –Centre de diagnostic moléculaire et CHU Brugmann
–
Laboratoire
de
bactériologie……………………………...5
Liste des abréviations .......................................................................................................................................... 7
Introduction………………………………………………………………………………………………………….9
1.1 Pathologie, prévalence de l’infection et enjeux de santé publique .......................................................... 9
1.2 Historique ................................................................................................................................................... 10
1.3 Taxonomie, morphologie, caractères biochimiques et croissance ......................................................... 11
1.4 Pathogénèse ................................................................................................................................................ 12
A. La protéine CagA ................................................................................................................................ 12
B. La protéine VacA ................................................................................................................................ 12
1.5 Mode de transmission et épidémiologie ................................................................................................... 13
1.6 Traitement .................................................................................................................................................. 15
A. Les différents plans thérapeutiques .................................................................................................... 15
B. La clarithromycine .............................................................................................................................. 17
C. Epidémiologie de la résistance ........................................................................................................... 18
1.7 Structure de population et épidémiologie moléculaire ........................................................................... 19
Objectifs………………………………………………………………………………………………………………21
Partie
pratique……………………………………………………………………………………………………22
BIOLOGIE MOLECULAIRE ................................................................................................................................. 22
1. Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) ............................................................................. 22
1. A. Extraction de l’ADN ....................................................................................................................... 23
1. B. Amplification
par
Réaction
de
Polymérisation
en
Chaîne
(PCR)-‐Séquençage
cyclique .......... 25
1. C. Digestion
enzymatique .................................................................................................................. 28
1. D. Electrophorèse
sur
gel
d’agarose
2
% ......................................................................................... 30
2. Multi Locus Sequence Typing (MLST) .................................................................................................... 31
2. A. Extraction de l’ADN ....................................................................................................................... 32
2. B. Amplification
par
PCR ................................................................................................................... 33
2. C. PCR
de
séquençage ........................................................................................................................ 34
2. D.
Clean-‐up
:
purification
des
produits
d’extension ........................................................................ 36
2. E. Séquençage ..................................................................................................................................... 38
2. F. Analyse
des
données ...................................................................................................................... 42
MICROBIOLOGIE ............................................................................................................................................... 43
1. Investigation des discordances observées entre les différentes méthodes de détermination de la
résistance utilisées lors d’un travail préliminaire ......................................................................................... 43
1. A. 1ère étape : repiquage des souches ................................................................................................... 43
4
1. A. 1. Matériel ....................................................................................................................................... 43
1. A. 2. Mode opératoire .......................................................................................................................... 43
1. A. 3. Technique d’isolement des souches ............................................................................................ 43
1. B. Détermination des C.M.I. ................................................................................................................ 44
1. B. 1. Principe de la bandelette E-test ................................................................................................... 45
1. B. 2. Matériel ....................................................................................................................................... 46
1. B. 3. Mode opératoire .......................................................................................................................... 46
1. C. Détermination de la résistance aux différents antibiotiques par la technique de diffusion en
disques .............................................................................................................................................................. 46
1. C. 1. Principe ........................................................................................................................................ 46
1. C. 2. Mode opératoire .......................................................................................................................... 47
Résultats……………………………………………………………………………………………………………..48
1. La résistance aux antibiotiques .................................................................................................................. 49
1. A. Vérification des discordances ......................................................................................................... 49
1. B. Génotype de résistance .................................................................................................................... 49
2. Multi Locus Sequence Typing .................................................................................................................... 50
2. A. Corrélation entre le profil génétique des souches et l’origine ethno-géographique des patients .... 52
2. B. Corrélation entre le génotype cagA et vacA (génotype de virulence) et le génotype par la
technique MLST .............................................................................................................................................. 54
Discussion…………………………………………………………………………………………………………...57
Conclusions
et
perspectives………………………………………………………………………………...59
Bibliographie .................................................................................................................................................... 60
Annexes ............................................................................................................................................................. 63
Résumé………………………………………………………………………………………………………………..65Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=64374 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire A l’ère de la microscopie digitalisée : Le Vision Hema® a-t-il sa place ? / LORENZO BOVA
Titre : A l’ère de la microscopie digitalisée : Le Vision Hema® a-t-il sa place ? Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : LORENZO BOVA, Auteur Année de publication : 2014 Langues : Français (fre) Mots-clés : BIOLOGIE MÉDICALE CLINIQUE NOTRE-DAME DE GRACE DE GOSSELIES VISION HEMA APPAREIL APPAREILLAGE ELEMENT FIGURES VALIDATION CAS PATHOLOGIQUES Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65371 A l’ère de la microscopie digitalisée : Le Vision Hema® a-t-il sa place ? [TFE / Mémoire] / LORENZO BOVA, Auteur . - 2014.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : BIOLOGIE MÉDICALE CLINIQUE NOTRE-DAME DE GRACE DE GOSSELIES VISION HEMA APPAREIL APPAREILLAGE ELEMENT FIGURES VALIDATION CAS PATHOLOGIQUES Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65371 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Etablissement des valeurs de référence de l'actin FSL, de l'actin FS et de l'anticoagulant lupique / ELOISE NOEL
Titre : Etablissement des valeurs de référence de l'actin FSL, de l'actin FS et de l'anticoagulant lupique Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : ELOISE NOEL, Auteur ; Maryvonne Jurdan, Directeur de la recherche Année de publication : 2015 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale GHDC Hôpital Saint-Joseph Anticoagulant lupique Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : TABLE DES MATIERES
REMERCIEMENTS
INTRODUCTION............................................................................................................1
PRESENTATION DU LIEU DE STAGE................................................................................2
PARTIE THEORIQUE…………………………………………………………………………………………………….4
1. Hémostase …………………………………………………………………………………………………4
1.1 Hémostase primaire……………………………………………………………………….………4
1.1.1 Vaisseau sanguin.........................................................................4
1.1.2 Les plaquettes..............................................................................4
1.1.3 Facteur Von Willebrand et fibrinogène........................................5
1.1.4 Mécanisme hémostase primaire..................................................5
1.2 Coagulation………………………………………………………………………………………….…8
1.2.1 Facteurs de coagulation...............................................................8
1.2.2 Voies de coagulation....................................................................9
1.2.3 Régulation de la coagulation.......................................................9
1.3 Fibrinolyse................................................................................................11
1.4 Tests d’exploration de la coagulation…………………………………………………….11
1.4.1 Temps de céphaline activé………………………………….………………….11
1.4.2 Temps de prothrombine………………………………………………………….12
1.4.3 Temps de thrombine……………………………………………………………….13
2. Syndrome des antiphospholipides…...............................................................13
2.1 Recherche de l’anticoagulant lupique …...................................................14
2.1.1 dRVVT………….................................................................…………..14
2.1.2 SCT……….................................................................………………….15
2.1.3 Nouvelle recommandation pour la détection du LA…………………15
3. L’automate Sysmex® CS-5100…………………………………………………………………..…17
3.1 Présentation générale……......................................................................…17
3.2 Fonctionnement de l’automate…….......................................................….18
3.3 Méthode d’analyse………...........................................................................19
3.3.1 Mesure chronométrique…….......................................................19
3.3.2 Mesure chromogénique…..........................................................20
3.3.3 Mesure immunologique…….......................................................20
3.4 Tests réalisés par l’automate……...............................................................20
3.5 Contrôle qualité …….........................................................................………21
PARTIE PRATIQUE….....................................................................................................23
1. Détermination de l’intervalle de référence du TCA sur CS-5100………………….23
1.1 Matériel……………....................................................................................…23
1.2 Sélection des échantillons……...................................................................23
1.3 Méthode……..............................................................................................24
1.4 TCA actin FSL : résultats…….......................................................................24
1.5 TCA actin FS : résultats……..................................................................…….27
2. Anticoagulant lupique…………………………………………………………………………….….30
2.1 Matériel....................................................................................................30
2.2 Sélection des échantillons........................................................................31
2.3 Méthode...................................................................................................31
2.4 LA1 et LA2 : résultats................................................................................32
2.5 Silica clotting Time : résultats...................................................................35
3. Discussion....................................................................................................38
CONCLUSION..............................................................................................................41
BIBLIOGRAPHIE………………………………………………………………………………………………………..42Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=64809 Etablissement des valeurs de référence de l'actin FSL, de l'actin FS et de l'anticoagulant lupique [TFE / Mémoire] / ELOISE NOEL, Auteur ; Maryvonne Jurdan, Directeur de la recherche . - 2015.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale GHDC Hôpital Saint-Joseph Anticoagulant lupique Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : TABLE DES MATIERES
REMERCIEMENTS
INTRODUCTION............................................................................................................1
PRESENTATION DU LIEU DE STAGE................................................................................2
PARTIE THEORIQUE…………………………………………………………………………………………………….4
1. Hémostase …………………………………………………………………………………………………4
1.1 Hémostase primaire……………………………………………………………………….………4
1.1.1 Vaisseau sanguin.........................................................................4
1.1.2 Les plaquettes..............................................................................4
1.1.3 Facteur Von Willebrand et fibrinogène........................................5
1.1.4 Mécanisme hémostase primaire..................................................5
1.2 Coagulation………………………………………………………………………………………….…8
1.2.1 Facteurs de coagulation...............................................................8
1.2.2 Voies de coagulation....................................................................9
1.2.3 Régulation de la coagulation.......................................................9
1.3 Fibrinolyse................................................................................................11
1.4 Tests d’exploration de la coagulation…………………………………………………….11
1.4.1 Temps de céphaline activé………………………………….………………….11
1.4.2 Temps de prothrombine………………………………………………………….12
1.4.3 Temps de thrombine……………………………………………………………….13
2. Syndrome des antiphospholipides…...............................................................13
2.1 Recherche de l’anticoagulant lupique …...................................................14
2.1.1 dRVVT………….................................................................…………..14
2.1.2 SCT……….................................................................………………….15
2.1.3 Nouvelle recommandation pour la détection du LA…………………15
3. L’automate Sysmex® CS-5100…………………………………………………………………..…17
3.1 Présentation générale……......................................................................…17
3.2 Fonctionnement de l’automate…….......................................................….18
3.3 Méthode d’analyse………...........................................................................19
3.3.1 Mesure chronométrique…….......................................................19
3.3.2 Mesure chromogénique…..........................................................20
3.3.3 Mesure immunologique…….......................................................20
3.4 Tests réalisés par l’automate……...............................................................20
3.5 Contrôle qualité …….........................................................................………21
PARTIE PRATIQUE….....................................................................................................23
1. Détermination de l’intervalle de référence du TCA sur CS-5100………………….23
1.1 Matériel……………....................................................................................…23
1.2 Sélection des échantillons……...................................................................23
1.3 Méthode……..............................................................................................24
1.4 TCA actin FSL : résultats…….......................................................................24
1.5 TCA actin FS : résultats……..................................................................…….27
2. Anticoagulant lupique…………………………………………………………………………….….30
2.1 Matériel....................................................................................................30
2.2 Sélection des échantillons........................................................................31
2.3 Méthode...................................................................................................31
2.4 LA1 et LA2 : résultats................................................................................32
2.5 Silica clotting Time : résultats...................................................................35
3. Discussion....................................................................................................38
CONCLUSION..............................................................................................................41
BIBLIOGRAPHIE………………………………………………………………………………………………………..42Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=64809 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Etablissement de valeurs de référence en cytométrie en flux en vue de leur application dans le cadre des lymphopathies B / ALICIA FLAMENT
Titre : Etablissement de valeurs de référence en cytométrie en flux en vue de leur application dans le cadre des lymphopathies B Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : ALICIA FLAMENT, Auteur Année de publication : 2016 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : Biologie médicale GDHC Hématologie Saint-Joseph cytométrie en flux focalisation hydrodynamique laser filtre photodiode tube photomultiplicateur fluorochromes lymphopathies B LLC-B LPL-B HCL LZM maladie de Walderström lymphome folliculaire lymphome à cellule du manteau lymphome diffus à grande cellule B lymphome de Brukitt Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : !
Table des matières
Présentation du lieu de stage ................................................................................................... 6
Introduction générale ............................................................................................................... 8
1 Partie théorique ................................................................................................................ 10
1.1 Principe de la cytométrie de flux ............................................................................. 10
1.2 Description de l’automate ......................................................................................... 11
1.2.1 La partie fluidique ................................................................................................. 11
1.2.1.1 Focalisation hydrodynamique ......................................................................... 11
1.2.2 La partie optique ................................................................................................... 12
1.2.2.1 Le laser ............................................................................................................ 12
1.2.2.2 Les filtres ........................................................................................................ 13
1.2.3 La partie électronique ........................................................................................... 13
1.2.3.1 Les photodiodes .............................................................................................. 14
1.2.3.2 Les tubes photomultiplicateurs ....................................................................... 14
1.2.3.3 Traitement de l’impulsion ............................................................................... 14
1.2.4 La partie informatique .......................................................................................... 16
1.3 Les fluorochromes ..................................................................................................... 19
1.3.1 Principe de fluorescence ....................................................................................... 19
1.3.2 Le rendement quantique ....................................................................................... 20
1.3.3 Déplacement de Stokes ......................................................................................... 20
1.3.4 Choisir les fluorochromes ..................................................................................... 21
1.4 Les différentes applications de la cytométrie (Bailly N., 2014) ............................ 22
1.4.1 En hématologie ..................................................................................................... 22
1.4.2 En biologie ............................................................................................................ 22
1.4.3 En bactériologie .................................................................................................... 22
1.4.4 En immunologie .................................................................................................... 23
1.4.5 En transfusion ....................................................................................................... 23
1.4.6 En industrie pharmaceutique ................................................................................ 23
1.5 Les lymphopathies B ................................................................................................. 24
1.5.1 La leucémie lymphoïde chronique (LLC-B) ........................................................ 24
1.5.2 Leucémie prolymphocytaire B (LPL-B) ............................................................... 26
1.5.3 Leucémie à tricholeucocytes (HCL) ..................................................................... 27
1.5.4 Lymphome de la zone marginale (LZM) .............................................................. 28
1.5.5 Lymphome lymphoplasmocytaire et maladie de Waldenström ........................... 29
1.5.6 Lymphome folliculaire ......................................................................................... 31
1.5.7 Lymphome à cellules du manteau ........................................................................ 32
1.5.8 Lymphome diffus à grandes cellules B ................................................................ 33
1.5.9 Lymphome de Burkitt ........................................................................................... 34
2 Partie pratique ................................................................................................................. 36
!!!!!
2.1 Contexte général ........................................................................................................ 36
2.2 But et stratégie ........................................................................................................... 36
2.3 Matériel et méthode .................................................................................................. 37
2.3.1 Matériel ................................................................................................................. 37
2.3.2 Méthode ................................................................................................................ 40
2.3.2.1 Détermination du nombre de lymphocytes à acquérir .................................... 40
2.3.2.2 Détermination du volume d’anticorps ............................................................ 44
2.3.2.3 Contrôle des PMT ........................................................................................... 51
2.3.2.4 Mode opératoire pour le passage des témoins ................................................ 52
2.4 Résultats et discussion ............................................................................................... 53
2.4.1 Résultats ................................................................................................................ 53
2.4.1.1 Intensités de fluorescence obtenues ................................................................ 53
2.4.1.2 Statistiques ...................................................................................................... 54
2.4.1.3 Tableau récapitulatif ....................................................................................... 56
2.4.2 Discussion ............................................................................................................. 57
Conclusion générale ............................................................................................................... 60
Glossaire .................................................................................................................................. 62
Abréviations ............................................................................................................................ 64
Liste des tableaux ................................................................................................................... 66
Liste des Figures ..................................................................................................................... 68
Bibliographie ........................................................................................................................... 70
Table des annexes ................................................................................................................... 72Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65673 Etablissement de valeurs de référence en cytométrie en flux en vue de leur application dans le cadre des lymphopathies B [TFE / Mémoire] / ALICIA FLAMENT, Auteur . - 2016.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : Biologie médicale GDHC Hématologie Saint-Joseph cytométrie en flux focalisation hydrodynamique laser filtre photodiode tube photomultiplicateur fluorochromes lymphopathies B LLC-B LPL-B HCL LZM maladie de Walderström lymphome folliculaire lymphome à cellule du manteau lymphome diffus à grande cellule B lymphome de Brukitt Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : !
Table des matières
Présentation du lieu de stage ................................................................................................... 6
Introduction générale ............................................................................................................... 8
1 Partie théorique ................................................................................................................ 10
1.1 Principe de la cytométrie de flux ............................................................................. 10
1.2 Description de l’automate ......................................................................................... 11
1.2.1 La partie fluidique ................................................................................................. 11
1.2.1.1 Focalisation hydrodynamique ......................................................................... 11
1.2.2 La partie optique ................................................................................................... 12
1.2.2.1 Le laser ............................................................................................................ 12
1.2.2.2 Les filtres ........................................................................................................ 13
1.2.3 La partie électronique ........................................................................................... 13
1.2.3.1 Les photodiodes .............................................................................................. 14
1.2.3.2 Les tubes photomultiplicateurs ....................................................................... 14
1.2.3.3 Traitement de l’impulsion ............................................................................... 14
1.2.4 La partie informatique .......................................................................................... 16
1.3 Les fluorochromes ..................................................................................................... 19
1.3.1 Principe de fluorescence ....................................................................................... 19
1.3.2 Le rendement quantique ....................................................................................... 20
1.3.3 Déplacement de Stokes ......................................................................................... 20
1.3.4 Choisir les fluorochromes ..................................................................................... 21
1.4 Les différentes applications de la cytométrie (Bailly N., 2014) ............................ 22
1.4.1 En hématologie ..................................................................................................... 22
1.4.2 En biologie ............................................................................................................ 22
1.4.3 En bactériologie .................................................................................................... 22
1.4.4 En immunologie .................................................................................................... 23
1.4.5 En transfusion ....................................................................................................... 23
1.4.6 En industrie pharmaceutique ................................................................................ 23
1.5 Les lymphopathies B ................................................................................................. 24
1.5.1 La leucémie lymphoïde chronique (LLC-B) ........................................................ 24
1.5.2 Leucémie prolymphocytaire B (LPL-B) ............................................................... 26
1.5.3 Leucémie à tricholeucocytes (HCL) ..................................................................... 27
1.5.4 Lymphome de la zone marginale (LZM) .............................................................. 28
1.5.5 Lymphome lymphoplasmocytaire et maladie de Waldenström ........................... 29
1.5.6 Lymphome folliculaire ......................................................................................... 31
1.5.7 Lymphome à cellules du manteau ........................................................................ 32
1.5.8 Lymphome diffus à grandes cellules B ................................................................ 33
1.5.9 Lymphome de Burkitt ........................................................................................... 34
2 Partie pratique ................................................................................................................. 36
!!!!!
2.1 Contexte général ........................................................................................................ 36
2.2 But et stratégie ........................................................................................................... 36
2.3 Matériel et méthode .................................................................................................. 37
2.3.1 Matériel ................................................................................................................. 37
2.3.2 Méthode ................................................................................................................ 40
2.3.2.1 Détermination du nombre de lymphocytes à acquérir .................................... 40
2.3.2.2 Détermination du volume d’anticorps ............................................................ 44
2.3.2.3 Contrôle des PMT ........................................................................................... 51
2.3.2.4 Mode opératoire pour le passage des témoins ................................................ 52
2.4 Résultats et discussion ............................................................................................... 53
2.4.1 Résultats ................................................................................................................ 53
2.4.1.1 Intensités de fluorescence obtenues ................................................................ 53
2.4.1.2 Statistiques ...................................................................................................... 54
2.4.1.3 Tableau récapitulatif ....................................................................................... 56
2.4.2 Discussion ............................................................................................................. 57
Conclusion générale ............................................................................................................... 60
Glossaire .................................................................................................................................. 62
Abréviations ............................................................................................................................ 64
Liste des tableaux ................................................................................................................... 66
Liste des Figures ..................................................................................................................... 68
Bibliographie ........................................................................................................................... 70
Table des annexes ................................................................................................................... 72Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65673 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Etat des lieux des transfusions et gestion de la banque de sang au laboratoire de la CNDG / Alice Marcq
Titre : Etat des lieux des transfusions et gestion de la banque de sang au laboratoire de la CNDG Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Alice Marcq ; Patrick Vankerkhoven, Promoteur du mémoire Editeur : Montignies-sur-Sambre : Haute Ecole Louvain en Hainaut Année de publication : 2023 Importance : 55p. Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur . Langues : Français (fre) Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Ce travail a pour but de réaliser un relevé de données de la banque de sang de la Clinique Notre Dame de Grâce à Gosselies et de faire un état des lieux des transfusions réalisées au cours de ces dernières années pour comprendre les pénuries régulières de O négatif.
Les fréquences des groupes sanguins selon les différentes populations à travers le monde et à la CNDG sont abordées en détails. Grâce à cela, nous comprenons plus facilement la discordance entre besoins et apports.
Le manque d’apport considérable de poche O négatif est expliqué par plusieurs raisons comme l’importance de comprendre que la population de receveurs en Belgique n’est pas purement caucasienne ce qui entraîne donc des transfusions de poche O négatif de type non isogroupe.
Le principe de l’hémovigilance et du Patient Blood Management sont abordés pour une meilleure compréhension de l’importance de l’acte transfusionnel en tant que personnel soignant mais également en tant que patient.
Les donneurs et les receveurs O négatif sont explorés au cours de ce travail. L’analyse statistique des transfusions réalisées dans cette clinique a pour intérêt de comprendre et de distinguer celles qui sont justifiées ou non. Les receveurs Rhésus négatif ayant subi une allo-immunisation due à une transfusion de poche Rhésus positif sont analysés également. Les résultats de cette analyse permettent d’appuyer la règle transfusionnelle qui soutient les transfusions de poches Rhésus positif à des receveurs Rhésus négatif à certains patients.
L’application de cette règle permettant ainsi une utilisation consciencieuse des poches de O négatif tout au long de l’année pour éviter une pénurie chronique.
Une analyse rétrospective est réalisée sur le nombre de poche de O négatif transfusées au cours de ces dix dernières années permettant de voir la diminution.Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=114737 Etat des lieux des transfusions et gestion de la banque de sang au laboratoire de la CNDG [TFE / Mémoire] / Alice Marcq ; Patrick Vankerkhoven, Promoteur du mémoire . - Montignies-sur-Sambre : Haute Ecole Louvain en Hainaut, 2023 . - 55p.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur .
Langues : Français (fre)
Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Ce travail a pour but de réaliser un relevé de données de la banque de sang de la Clinique Notre Dame de Grâce à Gosselies et de faire un état des lieux des transfusions réalisées au cours de ces dernières années pour comprendre les pénuries régulières de O négatif.
Les fréquences des groupes sanguins selon les différentes populations à travers le monde et à la CNDG sont abordées en détails. Grâce à cela, nous comprenons plus facilement la discordance entre besoins et apports.
Le manque d’apport considérable de poche O négatif est expliqué par plusieurs raisons comme l’importance de comprendre que la population de receveurs en Belgique n’est pas purement caucasienne ce qui entraîne donc des transfusions de poche O négatif de type non isogroupe.
Le principe de l’hémovigilance et du Patient Blood Management sont abordés pour une meilleure compréhension de l’importance de l’acte transfusionnel en tant que personnel soignant mais également en tant que patient.
Les donneurs et les receveurs O négatif sont explorés au cours de ce travail. L’analyse statistique des transfusions réalisées dans cette clinique a pour intérêt de comprendre et de distinguer celles qui sont justifiées ou non. Les receveurs Rhésus négatif ayant subi une allo-immunisation due à une transfusion de poche Rhésus positif sont analysés également. Les résultats de cette analyse permettent d’appuyer la règle transfusionnelle qui soutient les transfusions de poches Rhésus positif à des receveurs Rhésus négatif à certains patients.
L’application de cette règle permettant ainsi une utilisation consciencieuse des poches de O négatif tout au long de l’année pour éviter une pénurie chronique.
Une analyse rétrospective est réalisée sur le nombre de poche de O négatif transfusées au cours de ces dix dernières années permettant de voir la diminution.Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=114737 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Etude de l'activation plaquettaire / DUMONT Laurie
PermalinkEtude de l’activité anti-cancéreuse in vitro de polyphénols dans le cancer du sein / MARIE BEAUVOIS
PermalinkEtude de comparaison des kits d'extraction ADN Prepfiler (Applied Biosystems) & Mag Attract DNA Mini M48 (QIAGEN) / Christopher LEFOUR
PermalinkÉtude comparative de 3 kits de détection des toxines A et/ou B de Clostridium difficile / MATHY Laure
PermalinkÉtude comparative de lots de plasma normal (NPP) utilisé dans la recherche d’un anticoagulant lupique lors de l’étape de mélange et de confirmation / Lucas Lowie
PermalinkEtude comparative des oxylipines non volatiles de solanum pennellii et de solanum lycopersicum soumis à un stress salin par chromatographie liquide à haute performance / LAMONTAGNE Charline
PermalinkEtude comparative de quatre milieux chromogéniques pour la recherche de Staphylococcus aureus résistant à la méticilline et intérêt d'un enrichissement préalable dans un bouillon hypersalé / LONGANGE Eliane
PermalinkEtude comparative des sérologies Toxoplasma gondii et Cytomégalovirus sur trois automates (Vidas®, Liaison XL ®, Cobas 6000). / CELINE PESTIAUX
PermalinkEtude des composés volatils dans la relation mutualiste entre A.fabae et L.niger / PATRIS Geoffrey Ange
PermalinkEtude de la discrimination entre adhésifs pour la police technique et scientifique / DUMORTIER Marjorie
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