Centre de Documentation Campus Montignies
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Lundi : 8h-18h30
Mardi : 8h-17h30
Mercredi 9h-16h30
Jeudi : 8h-18h30
Vendredi : 8h30-12h30 et 13h-14h30
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Auteur Marie Balau |
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Étude ex vivo des effets directs de la mélatonine et du cortisol sur le système immunitaire du sandre Sander lucioperca / Marie Balau
Titre : Étude ex vivo des effets directs de la mélatonine et du cortisol sur le système immunitaire du sandre Sander lucioperca Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Marie Balau, Auteur ; Fabienne Barbason, Directeur de publication, rédacteur en chef Année de publication : 2019 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : Agronomie AIBT Unité de Recherche en Biologie Environnementale et
Évolutive Université de NamurIndex. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Résumé : L’aquaculture fait partie des projets que la commission européenne encourage afin que l’Europe puisse se développer dans ce domaine. L’une des espèces étudiées dans ces projets et retenue est le Sandre, un poisson d’eau douce. Le but est d’optimiser le bien-être de cette espèce dans les bassins d’aquaculture à recirculation fermée afin de limiter l’utilisation des produits vétérinaires. Le facteur de stress étudié est la lumière, plus précisément par le biais de la mélatonine qui est une hormone excrétée suite à une exposition lumineuse. Le but de la recherche fut d’établir s’il y avait un lien direct entre les réponses immunitaires et la mélatonine. En ce sens, 80 reins et 80 rates de Sandre ont été prélevés étant les organes spécifiques du système immunitaire des poissons. Un protocole d’incubation en ex vivo des organes dans des milieux composés de mélatonine et de cortisol fut élaboré, testé et appliqué. Les analyses par cytométrie de flux et par RT-qPCR ont permis d’évaluer l’efficacité du protocole d’incubation et les réponses immunitaires. Note de contenu : able des matières
Remerciements
Présentation du lieu de stage
Introduction générale _________________________________________________ 8
1. Contexte général _______________________________________________ 10
1.1. Le sandre (Sander lucioperca) __________________________________ 10
1.1.1. Qualités économiques et biologiques __________________________ 11
1.2. Facteurs limitant le rendement du sandre en aquaculture ___________ 11
1.2.1. Le stress _________________________________________________ 12
1.2.2. La lumière _______________________________________________ 18
1.2.3. Système immunitaire (SI) ___________________________________ 24
2. Objectifs et stratégie du TFE ______________________________________ 32
3. Matériel et méthode ____________________________________________ 34
3.1. Animaux et conditions d’élevage _______________________________ 34
3.1.1. Procédure d’échantillonnage ________________________________ 34
3.2. Préparation des milieux de culture ______________________________ 35
3.2.1. Traitement à la mélatonine _________________________________ 36
3.2.2. Traitement au Cortisol _____________________________________ 36
3.2.3. Traitement Mélange _______________________________________ 36
3.2.4. Contrôle _________________________________________________ 37
3.3. Mise en incubation des organes ________________________________ 37
3.3.1. Récolte des organes _______________________________________ 38
3.4. Analyse en cytométrie de flux _________________________________ 38
3.4.1. Viabilité cellulaire des échantillons de rates ____________________ 39
3.4.2. Activité phagocytaire ______________________________________ 41
3.5. Analyses des expressions de gènes cibles ________________________ 42
3.5.1. Extraction de l’ARN total ____________________________________ 42
3.5.2. Dosage des acides nucléiques au Nanodrop ____________________ 43
3.5.3. Traitement DNase et Reverse transcriptase _____________________ 43
3.5.4. Rétro-transcription ________________________________________ 44
3.5.5. RT-qPCR : réaction de polymérisation en chaine en temps réel _____ 44
3.5.6. Efficience des primers ______________________________________ 45
3.5.7. Analyse qPCR _____________________________________________ 46
3.5.8. Electrophorèse sur gel d’agarose _____________________________ 46
3.5.9. Sélection des gènes de référence _____________________________ 47
3.5.10. Calculs d’expression des gènes _____________________________ 47
3.5.11. Statistiques ____________________________________________ 47
4. Résultats et discussions __________________________________________ 48
4.1. Résultats de l’analyse de la survie cellulaire _______________________ 48
4.2. Résultats de l’analyse de la phagocytose cellulaire _________________ 49
4.3. Résultats de l’analyse de l’expression des gènes ___________________ 50
Conclusions et perspectives ___________________________________________ 54
Abréviations _______________________________________________________ 56
Liste des figures et tableaux __________________________________________ 58
Bibliographie _______________________________________________________ 62
AnnexesPermalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=79718 Étude ex vivo des effets directs de la mélatonine et du cortisol sur le système immunitaire du sandre Sander lucioperca [TFE / Mémoire] / Marie Balau, Auteur ; Fabienne Barbason, Directeur de publication, rédacteur en chef . - 2019.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : Agronomie AIBT Unité de Recherche en Biologie Environnementale et
Évolutive Université de NamurIndex. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Résumé : L’aquaculture fait partie des projets que la commission européenne encourage afin que l’Europe puisse se développer dans ce domaine. L’une des espèces étudiées dans ces projets et retenue est le Sandre, un poisson d’eau douce. Le but est d’optimiser le bien-être de cette espèce dans les bassins d’aquaculture à recirculation fermée afin de limiter l’utilisation des produits vétérinaires. Le facteur de stress étudié est la lumière, plus précisément par le biais de la mélatonine qui est une hormone excrétée suite à une exposition lumineuse. Le but de la recherche fut d’établir s’il y avait un lien direct entre les réponses immunitaires et la mélatonine. En ce sens, 80 reins et 80 rates de Sandre ont été prélevés étant les organes spécifiques du système immunitaire des poissons. Un protocole d’incubation en ex vivo des organes dans des milieux composés de mélatonine et de cortisol fut élaboré, testé et appliqué. Les analyses par cytométrie de flux et par RT-qPCR ont permis d’évaluer l’efficacité du protocole d’incubation et les réponses immunitaires. Note de contenu : able des matières
Remerciements
Présentation du lieu de stage
Introduction générale _________________________________________________ 8
1. Contexte général _______________________________________________ 10
1.1. Le sandre (Sander lucioperca) __________________________________ 10
1.1.1. Qualités économiques et biologiques __________________________ 11
1.2. Facteurs limitant le rendement du sandre en aquaculture ___________ 11
1.2.1. Le stress _________________________________________________ 12
1.2.2. La lumière _______________________________________________ 18
1.2.3. Système immunitaire (SI) ___________________________________ 24
2. Objectifs et stratégie du TFE ______________________________________ 32
3. Matériel et méthode ____________________________________________ 34
3.1. Animaux et conditions d’élevage _______________________________ 34
3.1.1. Procédure d’échantillonnage ________________________________ 34
3.2. Préparation des milieux de culture ______________________________ 35
3.2.1. Traitement à la mélatonine _________________________________ 36
3.2.2. Traitement au Cortisol _____________________________________ 36
3.2.3. Traitement Mélange _______________________________________ 36
3.2.4. Contrôle _________________________________________________ 37
3.3. Mise en incubation des organes ________________________________ 37
3.3.1. Récolte des organes _______________________________________ 38
3.4. Analyse en cytométrie de flux _________________________________ 38
3.4.1. Viabilité cellulaire des échantillons de rates ____________________ 39
3.4.2. Activité phagocytaire ______________________________________ 41
3.5. Analyses des expressions de gènes cibles ________________________ 42
3.5.1. Extraction de l’ARN total ____________________________________ 42
3.5.2. Dosage des acides nucléiques au Nanodrop ____________________ 43
3.5.3. Traitement DNase et Reverse transcriptase _____________________ 43
3.5.4. Rétro-transcription ________________________________________ 44
3.5.5. RT-qPCR : réaction de polymérisation en chaine en temps réel _____ 44
3.5.6. Efficience des primers ______________________________________ 45
3.5.7. Analyse qPCR _____________________________________________ 46
3.5.8. Electrophorèse sur gel d’agarose _____________________________ 46
3.5.9. Sélection des gènes de référence _____________________________ 47
3.5.10. Calculs d’expression des gènes _____________________________ 47
3.5.11. Statistiques ____________________________________________ 47
4. Résultats et discussions __________________________________________ 48
4.1. Résultats de l’analyse de la survie cellulaire _______________________ 48
4.2. Résultats de l’analyse de la phagocytose cellulaire _________________ 49
4.3. Résultats de l’analyse de l’expression des gènes ___________________ 50
Conclusions et perspectives ___________________________________________ 54
Abréviations _______________________________________________________ 56
Liste des figures et tableaux __________________________________________ 58
Bibliographie _______________________________________________________ 62
AnnexesPermalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=79718 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire