Centre de Documentation Campus Montignies
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Auteur Christos Bekris |
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Evaluation de l’effet matrice de 2 kits sixplex commerciaux pour le dosage de cytokines dans le plasma humain / Christos Bekris
Titre : Evaluation de l’effet matrice de 2 kits sixplex commerciaux pour le dosage de cytokines dans le plasma humain Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Christos Bekris, Année de publication : 2016 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : Biologie médicale SGS études cliniques pharmacocinétique pharmacodynamique cytokines techniques immunologiques ELISA multiplex calibration validation critères d acceptation Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : TABLE DES MATIERES
Présentation du lieu de stage: .......................................................................................................... 11
1 Introduction: ................................................................................................................................. 13
2 Partie théorique: .......................................................................................................................... 15
2.1 les études cliniques: ........................................................................................................... 15
2.2 La pharmacocinétique: ....................................................................................................... 15
2.3 La pharmacodynamique: ................................................................................................... 16
2.4 Les cytokines: ...................................................................................................................... 17
2.4.1 Cytokines étudiées: .................................................................................................... 18
2.4.2 Structure des différentes cytokines étudiées:......................................................... 19
2.5 Techniques immunologiques: ........................................................................................... 20
2.6 Technique immuno-enzymatique: ELISA ........................................................................ 22
2.6.1 Dosage par Elisa Direct: ............................................................................................ 22
2.6.2 Dosage par Elisa Indirect: ......................................................................................... 23
2.6.3 Dosage par Elisa Direct de type Sandwich: .......................................................... 24
2.6.4 Dosage par Elisa Indirect de type Sandwich: ......................................................... 25
2.7 Technique immuno-fluorescente: Le Multiplex............................................................... 26
2.7.1 La technologie Multiplex: ........................................................................................... 26
2.8 Quantification des différentes méthodes ......................................................................... 30
2.9 comparaison entre ELISA et Multiplex: ........................................................................... 31
2.9.1 Tableau de comparaison entre ELISA et Multiplex: .............................................. 32
3 Partie pratique: ............................................................................................................................ 33
Objectif et stratégie: ........................................................................................................................... 33
3.1 Descriptions du multiplex:.................................................................................................. 34
3.1.1 Le Bio-Plex® 200: ....................................................................................................... 34
3.1.2 La station de lavage: .................................................................................................. 35
3.2 Calibration et validation du multiplex: .............................................................................. 35
3.2.1 La calibration: .............................................................................................................. 36
3.2.2 La validation: ............................................................................................................... 36
3.3 Les kits: ................................................................................................................................ 36
3.3.1 Milliplex MAP kit (HCYTOMAG-60K-06): ................................................................ 37
3.3.2 R&D systems Magnetic Luminex® Performance Assay kit: ................................ 42
3.3.3 Traitement de la plaque: ............................................................................................ 46
3.4 Critère d’acceptation: ......................................................................................................... 47
3.5 évaluation du Kit Merck Millipore: .................................................................................... 48
10
3.5.1 Test 1: Performance du kit Merck Millipore ............................................................ 48
3.5.2 Test 2: Linéarité et effet matrice ............................................................................... 49
3.5.3 Test 3: effet matrice sur 8 sources différentes ....................................................... 51
3.5.4 Test 4: Tentative d’atténuation de l’effet matrice ................................................. 54
3.6 Evaluation du kit R&D: ....................................................................................................... 57
3.6.1 Test 1: Evaluation du kit R&D ................................................................................... 57
4 Discussion:................................................................................................................................... 61
5 Conclusion: .................................................................................................................................. 63
6 Bibliographie: ............................................................................................................................... 65
7 Annexe 1: Gamme d’étalonnage .............................................................................................. 69
7.1 Test 1: ................................................................................................................................... 69
7.2 Test 2 : .................................................................................................................................. 75
7.3 Test 3 : .................................................................................................................................. 81
7.4 Test 4 : .................................................................................................................................. 87
7.5 Kit R&D Test 1 : .................................................................................................................. 93
8 Annexe 2: Contrôle de qualité: ............................................................................................... 101
8.1 Kit de chez Merck Millipore : ........................................................................................... 101
8.2 Kit de chez R&D : ............................................................................................................. 107
9 Annexe 3: Résultats des Plasmas ......................................................................................... 115
9.1 Kit de chez Merck Millipore : ........................................................................................... 115
9.2 Kit de chez R&D: ............................................................................................................... 118
10 Annexe 4: Test de linéarité: ................................................................................................ 127
11 Annexe 5: Abréviations ........................................................................................................ 135
Résumé: ............................................................................................................................................. 138Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65660 Evaluation de l’effet matrice de 2 kits sixplex commerciaux pour le dosage de cytokines dans le plasma humain [TFE / Mémoire] / Christos Bekris, . - 2016.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : Biologie médicale SGS études cliniques pharmacocinétique pharmacodynamique cytokines techniques immunologiques ELISA multiplex calibration validation critères d acceptation Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : TABLE DES MATIERES
Présentation du lieu de stage: .......................................................................................................... 11
1 Introduction: ................................................................................................................................. 13
2 Partie théorique: .......................................................................................................................... 15
2.1 les études cliniques: ........................................................................................................... 15
2.2 La pharmacocinétique: ....................................................................................................... 15
2.3 La pharmacodynamique: ................................................................................................... 16
2.4 Les cytokines: ...................................................................................................................... 17
2.4.1 Cytokines étudiées: .................................................................................................... 18
2.4.2 Structure des différentes cytokines étudiées:......................................................... 19
2.5 Techniques immunologiques: ........................................................................................... 20
2.6 Technique immuno-enzymatique: ELISA ........................................................................ 22
2.6.1 Dosage par Elisa Direct: ............................................................................................ 22
2.6.2 Dosage par Elisa Indirect: ......................................................................................... 23
2.6.3 Dosage par Elisa Direct de type Sandwich: .......................................................... 24
2.6.4 Dosage par Elisa Indirect de type Sandwich: ......................................................... 25
2.7 Technique immuno-fluorescente: Le Multiplex............................................................... 26
2.7.1 La technologie Multiplex: ........................................................................................... 26
2.8 Quantification des différentes méthodes ......................................................................... 30
2.9 comparaison entre ELISA et Multiplex: ........................................................................... 31
2.9.1 Tableau de comparaison entre ELISA et Multiplex: .............................................. 32
3 Partie pratique: ............................................................................................................................ 33
Objectif et stratégie: ........................................................................................................................... 33
3.1 Descriptions du multiplex:.................................................................................................. 34
3.1.1 Le Bio-Plex® 200: ....................................................................................................... 34
3.1.2 La station de lavage: .................................................................................................. 35
3.2 Calibration et validation du multiplex: .............................................................................. 35
3.2.1 La calibration: .............................................................................................................. 36
3.2.2 La validation: ............................................................................................................... 36
3.3 Les kits: ................................................................................................................................ 36
3.3.1 Milliplex MAP kit (HCYTOMAG-60K-06): ................................................................ 37
3.3.2 R&D systems Magnetic Luminex® Performance Assay kit: ................................ 42
3.3.3 Traitement de la plaque: ............................................................................................ 46
3.4 Critère d’acceptation: ......................................................................................................... 47
3.5 évaluation du Kit Merck Millipore: .................................................................................... 48
10
3.5.1 Test 1: Performance du kit Merck Millipore ............................................................ 48
3.5.2 Test 2: Linéarité et effet matrice ............................................................................... 49
3.5.3 Test 3: effet matrice sur 8 sources différentes ....................................................... 51
3.5.4 Test 4: Tentative d’atténuation de l’effet matrice ................................................. 54
3.6 Evaluation du kit R&D: ....................................................................................................... 57
3.6.1 Test 1: Evaluation du kit R&D ................................................................................... 57
4 Discussion:................................................................................................................................... 61
5 Conclusion: .................................................................................................................................. 63
6 Bibliographie: ............................................................................................................................... 65
7 Annexe 1: Gamme d’étalonnage .............................................................................................. 69
7.1 Test 1: ................................................................................................................................... 69
7.2 Test 2 : .................................................................................................................................. 75
7.3 Test 3 : .................................................................................................................................. 81
7.4 Test 4 : .................................................................................................................................. 87
7.5 Kit R&D Test 1 : .................................................................................................................. 93
8 Annexe 2: Contrôle de qualité: ............................................................................................... 101
8.1 Kit de chez Merck Millipore : ........................................................................................... 101
8.2 Kit de chez R&D : ............................................................................................................. 107
9 Annexe 3: Résultats des Plasmas ......................................................................................... 115
9.1 Kit de chez Merck Millipore : ........................................................................................... 115
9.2 Kit de chez R&D: ............................................................................................................... 118
10 Annexe 4: Test de linéarité: ................................................................................................ 127
11 Annexe 5: Abréviations ........................................................................................................ 135
Résumé: ............................................................................................................................................. 138Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65660 Exemplaires
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