Centre de Documentation Campus Montignies
Horaires :
Lundi : 8h-18h30
Mardi : 8h-17h30
Mercredi 9h-16h30
Jeudi : 8h-18h30
Vendredi : 8h30-12h30 et 13h-14h30
Attention,
Votre centre de documentation sera fermé ce lundi 26 août.
Également, ce mercredi 28 août il sera fermé de 12 à 13h.
Enfin, ce jeudi 29 août il ouvrira à 14h45.
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Caractérisation des activités fibrogéniques des cellules MDSC (Myeloïd-Derived Suppressor Cells) mises en co-culture avec des fibroblastes pulmonaires. / LISA BROMBIN
Titre : Caractérisation des activités fibrogéniques des cellules MDSC (Myeloïd-Derived Suppressor Cells) mises en co-culture avec des fibroblastes pulmonaires. Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : LISA BROMBIN, Auteur ; François Huaux, Directeur de la recherche ; Caroline Charlier, Directeur de la recherche Année de publication : 2015 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale fibrose pulmonaire Cellules immunodépressives MDSC MEC Silicose Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : La fibrose pulmonaire est une maladie chronique qui est caractérisée par une prolifération des fibroblastes ainsi que leur différenciation et une accumulation excessive de matrice extracellulaire. L’architecture tissulaire est transformée en tissu cicatriciel permanent et les fonctions du poumon sont atteintes. Il est bien connu que la silice peut être à l’origine de la fibrose pulmonaire nommée silicose ou pneumoconiose.
Après instillation de silice chez la souris, un processus immunosuppressif chronique établi pour réguler les réponses inflammatoires s’enclenche. Ces cellules produisent plusieurs facteurs de croissance dont le TGFβ (Transforming Growth Factor β) qui sont à l’origine du dépôt excessif de protéines de la matrice extracellulaire. Nous étudions actuellement le rôle d’une population de cellules immunosuppressives appelées Myeloïd-Derived Suppressor Cells. Ces cellules en produisant du TGFβ pourraient induire la sécrétion de TIMP (Tissue Inhibitor of Metalloproteinases) qui est un inhibiteur de la dégradation de la MEC.
Au cours de ce travail, nous avons réalisé des co-cultures entre des fibroblastes pulmonaires (MLg) en lignée et des cellules purifiées (MDSC) provenant de poumons de souris traitées à la silice afin de déterminer si les MDSC sont capables d’activer les fibroblastes et de participer au processus fibrotique. Ces MDSC sont purifiés par la technique MACS. Des inhibiteurs de la voie du TGFβ ont été également ajoutés afin d’identifier quelles sont les voies de signalisation activées dans les cultures de fibroblastes.
Nous avons pu démontrer que les MDSC (en particulier les M-MDSC) recrutés durant la fibrogénèse ont la capacité d’induire une augmentation de l’expression de TIMP-1 par les fibroblastes. De plus, l’utilisation d’inhibiteurs de la voie du TGFβ a permis de diminuer cet effet. Ces résultats suggèrent donc que l’activité des MDSC serait dépendante de la voie de signalisation ERK et qu’elle pourrait être en partie initiée par le TGFβ.
Nos travaux expérimentaux nous ont donc permis de mieux caractériser le rôle des cellules immunosuppressives dans le développement de la maladie fibrotique.Note de contenu : TABLE DES MATIERES
Description du lieu de stage ....................................................................................................... 6
Introduction générale .................................................................................................................. 7
1 Contexte théorique ............................................................................................................. 8
1.1 La fibrose ..................................................................................................................... 8
1.2 La fibrose pulmonaire .................................................................................................. 8
1.2.1 La silice ................................................................................................................ 9
1.2.2 La silicose ............................................................................................................. 9
1.3 L’inflammation et la silicose ..................................................................................... 10
1.4 L’immunosuppression et la silicose .......................................................................... 11
1.5 MDSC: Myeloid-derived suppressor cells ................................................................ 12 1.5.1 Leurs marqueurs cellulaires ............................................................................... 13 1.5.2 Accumulation des MDSC ................................................................................... 14
1.5.3 L’activité immunosuppressive ........................................................................... 14
1.6 Le TGFβ et ses voies de signalisation ....................................................................... 15
2 Objectifs et stratégie ......................................................................................................... 18
3 Matériels et Méthodes ...................................................................................................... 19
3.1 Les animaux ............................................................................................................... 19
3.1.1 Les souris ............................................................................................................ 19
3.1.2 Les réactifs ......................................................................................................... 19
3.1.3 L’instillation trans-orale ..................................................................................... 19
3.2 Prélévement d’échantillons. ....................................................................................... 20
3.3 Les techniques ........................................................................................................... 20
3.3.1 Comptage ........................................................................................................... 20
3.3.2 Purification de MDSC par la technique MACS ................................................ 21
3.3.3 Culture des fibroblastes MLg ............................................................................. 23
3.3.4 Co-culture ........................................................................................................... 24
3.3.5 Cytospin ............................................................................................................. 24
3.3.6 Test de viabilité cellulaire (WST-1) ................................................................... 25
3.3.7 ELISA ................................................................................................................. 26
3.3.8 Statistiques ......................................................................................................... 28
4 Résultats et discussions .................................................................................................... 29
4.1 Effets du TGFβ et de ses inhibiteurs dans les cultures de fibroblastes MLg ............ 29
4.2 Mise en co-culture des MLg en présence MDSC et d’inhibiteurs du TGFβ (SMAD, RTGFβ, ERK) ............................................................................................................ 35
Conclusion et perspectives ....................................................................................................... 40
Bibliographie ............................................................................................................................ 41
Annexes ........................................................................................................................................Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=64693 Caractérisation des activités fibrogéniques des cellules MDSC (Myeloïd-Derived Suppressor Cells) mises en co-culture avec des fibroblastes pulmonaires. [TFE / Mémoire] / LISA BROMBIN, Auteur ; François Huaux, Directeur de la recherche ; Caroline Charlier, Directeur de la recherche . - 2015.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale fibrose pulmonaire Cellules immunodépressives MDSC MEC Silicose Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : La fibrose pulmonaire est une maladie chronique qui est caractérisée par une prolifération des fibroblastes ainsi que leur différenciation et une accumulation excessive de matrice extracellulaire. L’architecture tissulaire est transformée en tissu cicatriciel permanent et les fonctions du poumon sont atteintes. Il est bien connu que la silice peut être à l’origine de la fibrose pulmonaire nommée silicose ou pneumoconiose.
Après instillation de silice chez la souris, un processus immunosuppressif chronique établi pour réguler les réponses inflammatoires s’enclenche. Ces cellules produisent plusieurs facteurs de croissance dont le TGFβ (Transforming Growth Factor β) qui sont à l’origine du dépôt excessif de protéines de la matrice extracellulaire. Nous étudions actuellement le rôle d’une population de cellules immunosuppressives appelées Myeloïd-Derived Suppressor Cells. Ces cellules en produisant du TGFβ pourraient induire la sécrétion de TIMP (Tissue Inhibitor of Metalloproteinases) qui est un inhibiteur de la dégradation de la MEC.
Au cours de ce travail, nous avons réalisé des co-cultures entre des fibroblastes pulmonaires (MLg) en lignée et des cellules purifiées (MDSC) provenant de poumons de souris traitées à la silice afin de déterminer si les MDSC sont capables d’activer les fibroblastes et de participer au processus fibrotique. Ces MDSC sont purifiés par la technique MACS. Des inhibiteurs de la voie du TGFβ ont été également ajoutés afin d’identifier quelles sont les voies de signalisation activées dans les cultures de fibroblastes.
Nous avons pu démontrer que les MDSC (en particulier les M-MDSC) recrutés durant la fibrogénèse ont la capacité d’induire une augmentation de l’expression de TIMP-1 par les fibroblastes. De plus, l’utilisation d’inhibiteurs de la voie du TGFβ a permis de diminuer cet effet. Ces résultats suggèrent donc que l’activité des MDSC serait dépendante de la voie de signalisation ERK et qu’elle pourrait être en partie initiée par le TGFβ.
Nos travaux expérimentaux nous ont donc permis de mieux caractériser le rôle des cellules immunosuppressives dans le développement de la maladie fibrotique.Note de contenu : TABLE DES MATIERES
Description du lieu de stage ....................................................................................................... 6
Introduction générale .................................................................................................................. 7
1 Contexte théorique ............................................................................................................. 8
1.1 La fibrose ..................................................................................................................... 8
1.2 La fibrose pulmonaire .................................................................................................. 8
1.2.1 La silice ................................................................................................................ 9
1.2.2 La silicose ............................................................................................................. 9
1.3 L’inflammation et la silicose ..................................................................................... 10
1.4 L’immunosuppression et la silicose .......................................................................... 11
1.5 MDSC: Myeloid-derived suppressor cells ................................................................ 12 1.5.1 Leurs marqueurs cellulaires ............................................................................... 13 1.5.2 Accumulation des MDSC ................................................................................... 14
1.5.3 L’activité immunosuppressive ........................................................................... 14
1.6 Le TGFβ et ses voies de signalisation ....................................................................... 15
2 Objectifs et stratégie ......................................................................................................... 18
3 Matériels et Méthodes ...................................................................................................... 19
3.1 Les animaux ............................................................................................................... 19
3.1.1 Les souris ............................................................................................................ 19
3.1.2 Les réactifs ......................................................................................................... 19
3.1.3 L’instillation trans-orale ..................................................................................... 19
3.2 Prélévement d’échantillons. ....................................................................................... 20
3.3 Les techniques ........................................................................................................... 20
3.3.1 Comptage ........................................................................................................... 20
3.3.2 Purification de MDSC par la technique MACS ................................................ 21
3.3.3 Culture des fibroblastes MLg ............................................................................. 23
3.3.4 Co-culture ........................................................................................................... 24
3.3.5 Cytospin ............................................................................................................. 24
3.3.6 Test de viabilité cellulaire (WST-1) ................................................................... 25
3.3.7 ELISA ................................................................................................................. 26
3.3.8 Statistiques ......................................................................................................... 28
4 Résultats et discussions .................................................................................................... 29
4.1 Effets du TGFβ et de ses inhibiteurs dans les cultures de fibroblastes MLg ............ 29
4.2 Mise en co-culture des MLg en présence MDSC et d’inhibiteurs du TGFβ (SMAD, RTGFβ, ERK) ............................................................................................................ 35
Conclusion et perspectives ....................................................................................................... 40
Bibliographie ............................................................................................................................ 41
Annexes ........................................................................................................................................Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=64693 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Validation d’un modèle de cardiomyopathie diabétique chez la souris en présence et en absence d’Hyal1 / Antonia GUALBERTI
Titre : Validation d’un modèle de cardiomyopathie diabétique chez la souris en présence et en absence d’Hyal1 Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Antonia GUALBERTI, Auteur Année de publication : 2014 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : BIOLOGIE MÉDICALE UNIVERSITE DE NAMUR CARDIOMYOPATHIE DIABETIQUE HYAL1 ACIDE HYALURONIQUE HYALURONIDASES DIABETE MEC COEUR SOURIS KO WT PCR ELECTROPHORESE STREPTOZOTOCINE HISTOLOGIE HA WT STZ COLORATION KO STZ INTERPRETATION Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65389 Validation d’un modèle de cardiomyopathie diabétique chez la souris en présence et en absence d’Hyal1 [TFE / Mémoire] / Antonia GUALBERTI, Auteur . - 2014.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Langues : Français (fre)
Mots-clés : BIOLOGIE MÉDICALE UNIVERSITE DE NAMUR CARDIOMYOPATHIE DIABETIQUE HYAL1 ACIDE HYALURONIQUE HYALURONIDASES DIABETE MEC COEUR SOURIS KO WT PCR ELECTROPHORESE STREPTOZOTOCINE HISTOLOGIE HA WT STZ COLORATION KO STZ INTERPRETATION Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65389 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire