[article] 
inAnnales de Biologie Clinique > 76/5 (septembre-octobre 2018) . - p. 505-523

Titre :	Développement des analyses moléculaires par PCR digitale pour la pratique clinique : principes, mise en œuvre pratique et recommandations
Type de document :	texte imprimé
Auteurs :	Jérôme Alexandre Denis ; Juliette Nectoux ; Pierre-Jean Lamy
Année de publication :	2018
Article en page(s) :	p. 505-523
Langues :	Français (fre)
Mots-clés :	PCR digitale  recommandations  PCR quantitative  PCR en temps réel  microfluidique  gouttelette  micro-compartiments
Résumé :	La PCR digitale (PCRd) est une technologie de 3e génération qui complète la PCR classique en point final et la PCR en temps réel. Elle a été développée afin de combler certaines limites des techniques classiques d’amplification, en particulier la détection de faibles quantités d’acides nucléiques et/ou d’un variant en faible proportion par rapport à un autre. Cette technologie est actuellement en plein développement du fait de sa très grande sensibilité avec des applications majeures en biologie médicale. C’est tout particulièrement le cas pour des applications cliniques visant à détecter des altérations génétiques ou épigénétiques ou des variations de nombre de copies spécifiques d’acides nucléiques au sein d’échantillons contenant de faibles concentrations d’acides nucléiques d’intérêt. La PCRd trouve donc son utilité dans des domaines aussi variés que le diagnostic prénatal non invasif (DPNI), la transplantation d’organe ou l’oncologie, en particulier pour les biopsies liquides. Toutefois, cette technique nécessite une bonne formation des utilisateurs et la prise en compte de certaines précautions. Une mauvaise connaissance de cette technique peut en effet conduire à de nombreuses erreurs dans la réalisation de l’analyse et dans l’interprétation des résultats. Dans cette revue, nous présentons tout d’abord le contexte d’émergence de cette technologie, en décrivant en particulier son principe et les principaux facteurs pouvant influencer la qualité de l’analyse. Dans un second temps, nous proposerons un certain nombre de recommandations pratiques pour la mise en place d’un test basé sur la PCRd dans un laboratoire de biologie médicale au regard des exigences de qualité.
Permalink :	./index.php?lvl=notice_display&id=77313

[article] Développement des analyses moléculaires par PCR digitale pour la pratique clinique : principes, mise en œuvre pratique et recommandations [texte imprimé] / Jérôme Alexandre Denis ; Juliette Nectoux ; Pierre-Jean Lamy . - 2018 . - p. 505-523.
Langues : Français (fre)
in Annales de Biologie Clinique > 76/5 (septembre-octobre 2018) . - p. 505-523

Mots-clés :	PCR digitale  recommandations  PCR quantitative  PCR en temps réel  microfluidique  gouttelette  micro-compartiments
Résumé :	La PCR digitale (PCRd) est une technologie de 3e génération qui complète la PCR classique en point final et la PCR en temps réel. Elle a été développée afin de combler certaines limites des techniques classiques d’amplification, en particulier la détection de faibles quantités d’acides nucléiques et/ou d’un variant en faible proportion par rapport à un autre. Cette technologie est actuellement en plein développement du fait de sa très grande sensibilité avec des applications majeures en biologie médicale. C’est tout particulièrement le cas pour des applications cliniques visant à détecter des altérations génétiques ou épigénétiques ou des variations de nombre de copies spécifiques d’acides nucléiques au sein d’échantillons contenant de faibles concentrations d’acides nucléiques d’intérêt. La PCRd trouve donc son utilité dans des domaines aussi variés que le diagnostic prénatal non invasif (DPNI), la transplantation d’organe ou l’oncologie, en particulier pour les biopsies liquides. Toutefois, cette technique nécessite une bonne formation des utilisateurs et la prise en compte de certaines précautions. Une mauvaise connaissance de cette technique peut en effet conduire à de nombreuses erreurs dans la réalisation de l’analyse et dans l’interprétation des résultats. Dans cette revue, nous présentons tout d’abord le contexte d’émergence de cette technologie, en décrivant en particulier son principe et les principaux facteurs pouvant influencer la qualité de l’analyse. Dans un second temps, nous proposerons un certain nombre de recommandations pratiques pour la mise en place d’un test basé sur la PCRd dans un laboratoire de biologie médicale au regard des exigences de qualité.
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