Mise au point d’une technique d’identification des dermatophytes par MALDI-TOF et étude des modifications du protéome après passage sur un épiderme / Louanne Nihoul

Public ISBD Titre : Mise au point d’une technique d’identification des dermatophytes par MALDI-TOF et étude des modifications du protéome après passage sur un épiderme Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Louanne Nihoul, Auteur ; Gaëtane Maernoudt, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2021 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : Clinique Saint-Luc Bouge Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : 1 Table des matières Remerciements .......................................................................................................................... 3 Présentation du lieu de stage..................................................................................................... 6 Introduction................................................................................................................................ 7 1 Les dermatophytes............................................................................................................. 8 1.1 Définition ..................................................................................................................... 8 1.2 La reproduction chez les dermatophytes.................................................................... 8 1.2.1 La reproduction sexuée ou phase téléomorphe .................................................. 9 1.2.2 La reproduction asexuée chez le dermatophytes ................................................ 9 1.3 Source de l’infection .................................................................................................. 11 1.4 Pathologies ................................................................................................................ 13 1.4.1 Infection de la peau............................................................................................ 15 1.4.2 Les teignes du cuir chevelu ................................................................................ 16 1.4.3 L’onychomycose ................................................................................................. 17 1.5 Thérapeutique ........................................................................................................... 17 1.5.1 Utilisation locale................................................................................................. 17 1.5.2 Voie générale...................................................................................................... 18 1.6 Caractérisation de T. rubrum..................................................................................... 19 1.6.1 Epidémiologie et clinique ................................................................................... 19 1.6.2 Culture et microscopie ....................................................................................... 19 2 Objectifs et stratégie ........................................................................................................ 22 3 Méthodologie................................................................................................................... 24 3.1 La culture de T. rubrum ............................................................................................. 24 3.2 Extraction................................................................................................................... 24 3.3 La spectrométrie de masse........................................................................................ 26 3.4 MALDI-TOF................................................................................................................. 27 5 3.5 La culture cellulaire.................................................................................................... 29 3.5.1 Epiderme humain reconstruit ............................................................................ 29 3.5.2 Infection ............................................................................................................. 30 3.5.3 Analyses du développement de l’infection sur RHE .......................................... 31 4 Résultats ........................................................................................................................... 35 4.1 Mise au point de la méthode d’extraction ................................................................ 35 4.2 Mise en culture des RHE comme des échantillons cliniques .................................... 36 4.3 Evaluation du développement de l’infection sur RHE............................................... 39 4.3.1 Intégrité de la barrière épidermique.................................................................. 39 4.3.2 Quantification de la charge fongique................................................................. 40 4.3.3 Expression en ARNm de cytokines et PAM par les kératinocytes...................... 41 4.3.4 Libération de cytokines par les kératinocytes.................................................... 43 4.3.5 Analyse morphologique des RHE infectés.......................................................... 44 5 Discussion......................................................................................................................... 47 Conclusion ................................................................................................................................ 52 Bibliographie ............................................................................................................................ 54 Table des annexes .................................................................................................................... 56 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=100362 Mise au point d’une technique d’identification des dermatophytes par MALDI-TOF et étude des modifications du protéome après passage sur un épiderme [TFE / Mémoire] / Louanne Nihoul, Auteur ; Gaëtane Maernoudt, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2021. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : Clinique Saint-Luc Bouge Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : 1 Table des matières Remerciements .......................................................................................................................... 3 Présentation du lieu de stage..................................................................................................... 6 Introduction................................................................................................................................ 7 1 Les dermatophytes............................................................................................................. 8 1.1 Définition ..................................................................................................................... 8 1.2 La reproduction chez les dermatophytes.................................................................... 8 1.2.1 La reproduction sexuée ou phase téléomorphe .................................................. 9 1.2.2 La reproduction asexuée chez le dermatophytes ................................................ 9 1.3 Source de l’infection .................................................................................................. 11 1.4 Pathologies ................................................................................................................ 13 1.4.1 Infection de la peau............................................................................................ 15 1.4.2 Les teignes du cuir chevelu ................................................................................ 16 1.4.3 L’onychomycose ................................................................................................. 17 1.5 Thérapeutique ........................................................................................................... 17 1.5.1 Utilisation locale................................................................................................. 17 1.5.2 Voie générale...................................................................................................... 18 1.6 Caractérisation de T. rubrum..................................................................................... 19 1.6.1 Epidémiologie et clinique ................................................................................... 19 1.6.2 Culture et microscopie ....................................................................................... 19 2 Objectifs et stratégie ........................................................................................................ 22 3 Méthodologie................................................................................................................... 24 3.1 La culture de T. rubrum ............................................................................................. 24 3.2 Extraction................................................................................................................... 24 3.3 La spectrométrie de masse........................................................................................ 26 3.4 MALDI-TOF................................................................................................................. 27 5 3.5 La culture cellulaire.................................................................................................... 29 3.5.1 Epiderme humain reconstruit ............................................................................ 29 3.5.2 Infection ............................................................................................................. 30 3.5.3 Analyses du développement de l’infection sur RHE .......................................... 31 4 Résultats ........................................................................................................................... 35 4.1 Mise au point de la méthode d’extraction ................................................................ 35 4.2 Mise en culture des RHE comme des échantillons cliniques .................................... 36 4.3 Evaluation du développement de l’infection sur RHE............................................... 39 4.3.1 Intégrité de la barrière épidermique.................................................................. 39 4.3.2 Quantification de la charge fongique................................................................. 40 4.3.3 Expression en ARNm de cytokines et PAM par les kératinocytes...................... 41 4.3.4 Libération de cytokines par les kératinocytes.................................................... 43 4.3.5 Analyse morphologique des RHE infectés.......................................................... 44 5 Discussion......................................................................................................................... 47 Conclusion ................................................................................................................................ 52 Bibliographie ............................................................................................................................ 54 Table des annexes .................................................................................................................... 56 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=100362

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