Centre de Documentation Campus Montignies
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| Titre : |
Etablissement de valeurs de référence en cytométrie en flux en vue de leur application dans le cadre des lymphopathies B |
| Type de document : |
TFE / Mémoire |
| Auteurs : |
ALICIA FLAMENT, Auteur |
| Année de publication : |
2016 |
| Note générale : |
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. |
| Langues : |
Français (fre) |
| Mots-clés : |
Biologie médicale GDHC Hématologie Saint-Joseph cytométrie en flux focalisation hydrodynamique laser filtre photodiode tube photomultiplicateur fluorochromes lymphopathies B LLC-B LPL-B HCL LZM maladie de Walderström lymphome folliculaire lymphome à cellule du manteau lymphome diffus à grande cellule B lymphome de Brukitt |
| Index. décimale : |
TFE Bio Med TFE Biologie médicale |
| Note de contenu : |
!
Table des matières
Présentation du lieu de stage ................................................................................................... 6
Introduction générale ............................................................................................................... 8
1 Partie théorique ................................................................................................................ 10
1.1 Principe de la cytométrie de flux ............................................................................. 10
1.2 Description de l’automate ......................................................................................... 11
1.2.1 La partie fluidique ................................................................................................. 11
1.2.1.1 Focalisation hydrodynamique ......................................................................... 11
1.2.2 La partie optique ................................................................................................... 12
1.2.2.1 Le laser ............................................................................................................ 12
1.2.2.2 Les filtres ........................................................................................................ 13
1.2.3 La partie électronique ........................................................................................... 13
1.2.3.1 Les photodiodes .............................................................................................. 14
1.2.3.2 Les tubes photomultiplicateurs ....................................................................... 14
1.2.3.3 Traitement de l’impulsion ............................................................................... 14
1.2.4 La partie informatique .......................................................................................... 16
1.3 Les fluorochromes ..................................................................................................... 19
1.3.1 Principe de fluorescence ....................................................................................... 19
1.3.2 Le rendement quantique ....................................................................................... 20
1.3.3 Déplacement de Stokes ......................................................................................... 20
1.3.4 Choisir les fluorochromes ..................................................................................... 21
1.4 Les différentes applications de la cytométrie (Bailly N., 2014) ............................ 22
1.4.1 En hématologie ..................................................................................................... 22
1.4.2 En biologie ............................................................................................................ 22
1.4.3 En bactériologie .................................................................................................... 22
1.4.4 En immunologie .................................................................................................... 23
1.4.5 En transfusion ....................................................................................................... 23
1.4.6 En industrie pharmaceutique ................................................................................ 23
1.5 Les lymphopathies B ................................................................................................. 24
1.5.1 La leucémie lymphoïde chronique (LLC-B) ........................................................ 24
1.5.2 Leucémie prolymphocytaire B (LPL-B) ............................................................... 26
1.5.3 Leucémie à tricholeucocytes (HCL) ..................................................................... 27
1.5.4 Lymphome de la zone marginale (LZM) .............................................................. 28
1.5.5 Lymphome lymphoplasmocytaire et maladie de Waldenström ........................... 29
1.5.6 Lymphome folliculaire ......................................................................................... 31
1.5.7 Lymphome à cellules du manteau ........................................................................ 32
1.5.8 Lymphome diffus à grandes cellules B ................................................................ 33
1.5.9 Lymphome de Burkitt ........................................................................................... 34
2 Partie pratique ................................................................................................................. 36
!!!!!
2.1 Contexte général ........................................................................................................ 36
2.2 But et stratégie ........................................................................................................... 36
2.3 Matériel et méthode .................................................................................................. 37
2.3.1 Matériel ................................................................................................................. 37
2.3.2 Méthode ................................................................................................................ 40
2.3.2.1 Détermination du nombre de lymphocytes à acquérir .................................... 40
2.3.2.2 Détermination du volume d’anticorps ............................................................ 44
2.3.2.3 Contrôle des PMT ........................................................................................... 51
2.3.2.4 Mode opératoire pour le passage des témoins ................................................ 52
2.4 Résultats et discussion ............................................................................................... 53
2.4.1 Résultats ................................................................................................................ 53
2.4.1.1 Intensités de fluorescence obtenues ................................................................ 53
2.4.1.2 Statistiques ...................................................................................................... 54
2.4.1.3 Tableau récapitulatif ....................................................................................... 56
2.4.2 Discussion ............................................................................................................. 57
Conclusion générale ............................................................................................................... 60
Glossaire .................................................................................................................................. 62
Abréviations ............................................................................................................................ 64
Liste des tableaux ................................................................................................................... 66
Liste des Figures ..................................................................................................................... 68
Bibliographie ........................................................................................................................... 70
Table des annexes ................................................................................................................... 72 |
| Permalink : |
./index.php?lvl=notice_display&id=65673 |
Etablissement de valeurs de référence en cytométrie en flux en vue de leur application dans le cadre des lymphopathies B [TFE / Mémoire] / ALICIA FLAMENT, Auteur . - 2016. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français ( fre)
| Mots-clés : |
Biologie médicale GDHC Hématologie Saint-Joseph cytométrie en flux focalisation hydrodynamique laser filtre photodiode tube photomultiplicateur fluorochromes lymphopathies B LLC-B LPL-B HCL LZM maladie de Walderström lymphome folliculaire lymphome à cellule du manteau lymphome diffus à grande cellule B lymphome de Brukitt |
| Index. décimale : |
TFE Bio Med TFE Biologie médicale |
| Note de contenu : |
!
Table des matières
Présentation du lieu de stage ................................................................................................... 6
Introduction générale ............................................................................................................... 8
1 Partie théorique ................................................................................................................ 10
1.1 Principe de la cytométrie de flux ............................................................................. 10
1.2 Description de l’automate ......................................................................................... 11
1.2.1 La partie fluidique ................................................................................................. 11
1.2.1.1 Focalisation hydrodynamique ......................................................................... 11
1.2.2 La partie optique ................................................................................................... 12
1.2.2.1 Le laser ............................................................................................................ 12
1.2.2.2 Les filtres ........................................................................................................ 13
1.2.3 La partie électronique ........................................................................................... 13
1.2.3.1 Les photodiodes .............................................................................................. 14
1.2.3.2 Les tubes photomultiplicateurs ....................................................................... 14
1.2.3.3 Traitement de l’impulsion ............................................................................... 14
1.2.4 La partie informatique .......................................................................................... 16
1.3 Les fluorochromes ..................................................................................................... 19
1.3.1 Principe de fluorescence ....................................................................................... 19
1.3.2 Le rendement quantique ....................................................................................... 20
1.3.3 Déplacement de Stokes ......................................................................................... 20
1.3.4 Choisir les fluorochromes ..................................................................................... 21
1.4 Les différentes applications de la cytométrie (Bailly N., 2014) ............................ 22
1.4.1 En hématologie ..................................................................................................... 22
1.4.2 En biologie ............................................................................................................ 22
1.4.3 En bactériologie .................................................................................................... 22
1.4.4 En immunologie .................................................................................................... 23
1.4.5 En transfusion ....................................................................................................... 23
1.4.6 En industrie pharmaceutique ................................................................................ 23
1.5 Les lymphopathies B ................................................................................................. 24
1.5.1 La leucémie lymphoïde chronique (LLC-B) ........................................................ 24
1.5.2 Leucémie prolymphocytaire B (LPL-B) ............................................................... 26
1.5.3 Leucémie à tricholeucocytes (HCL) ..................................................................... 27
1.5.4 Lymphome de la zone marginale (LZM) .............................................................. 28
1.5.5 Lymphome lymphoplasmocytaire et maladie de Waldenström ........................... 29
1.5.6 Lymphome folliculaire ......................................................................................... 31
1.5.7 Lymphome à cellules du manteau ........................................................................ 32
1.5.8 Lymphome diffus à grandes cellules B ................................................................ 33
1.5.9 Lymphome de Burkitt ........................................................................................... 34
2 Partie pratique ................................................................................................................. 36
!!!!!
2.1 Contexte général ........................................................................................................ 36
2.2 But et stratégie ........................................................................................................... 36
2.3 Matériel et méthode .................................................................................................. 37
2.3.1 Matériel ................................................................................................................. 37
2.3.2 Méthode ................................................................................................................ 40
2.3.2.1 Détermination du nombre de lymphocytes à acquérir .................................... 40
2.3.2.2 Détermination du volume d’anticorps ............................................................ 44
2.3.2.3 Contrôle des PMT ........................................................................................... 51
2.3.2.4 Mode opératoire pour le passage des témoins ................................................ 52
2.4 Résultats et discussion ............................................................................................... 53
2.4.1 Résultats ................................................................................................................ 53
2.4.1.1 Intensités de fluorescence obtenues ................................................................ 53
2.4.1.2 Statistiques ...................................................................................................... 54
2.4.1.3 Tableau récapitulatif ....................................................................................... 56
2.4.2 Discussion ............................................................................................................. 57
Conclusion générale ............................................................................................................... 60
Glossaire .................................................................................................................................. 62
Abréviations ............................................................................................................................ 64
Liste des tableaux ................................................................................................................... 66
Liste des Figures ..................................................................................................................... 68
Bibliographie ........................................................................................................................... 70
Table des annexes ................................................................................................................... 72 |
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Exemplaires
