Dosage et étude de l’activité d’extraits de la spiruline / Ophélie Dieden

Public ISBD Titre : Dosage et étude de l’activité d’extraits de la spiruline Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Ophélie Dieden, Auteur ; Valérie Norberg, Directeur de publication, rédacteur en chef Année de publication : 2019 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : Agronomie  AIBT  Biores laboratoires Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Résumé : De plus en plus de personnes souffrent de problèmes cardiovasculaires. Des études ont montréque les personnes atteintes d’hyperbilirubinémie sont moins sujettes aux problèmes cardiovasculaires car la bilirubine est un antioxydant. La phycocyanobiline, qui est un chromophore contenu dans les cyanobactéries,dont la spiruline, a une structure similaire à la bilirubine. Nous espérons donc que cecomposé a les mêmes effets antioxydantsque la bilirubine. Ce travail s’inscrit dans un projet plus large qui vise à mettre au point un complémentalimentaire composé de phycocyanobiline qui réduit le risque de problèmes cardiovasculaires.Une partie du travail a consisté à caractériser des hydrolysats de spiruline et de phycocyanine, nous avons comparé leurs capacités antioxydantes. Nous avons également tenté de transposer la méthode clinique de dosage de la bilirubine à la phycocyanobiline. Note de contenu : Table des matièresPRESENTATION DU LIEUDE STAGE...................................................................................8INTRODUCTION................................................................................................................9PARTIE THEORIQUE........................................................................................................111SPIRULINE.................................................................................................................111.1HISTORIQUE..............................................................................................................111.2COMPOSITION...........................................................................................................121.3CULTURE EN LABO......................................................................................................121.4BIENFAITS................................................................................................................131.5SPECTRE D’ABSORPTION..............................................................................................132LES PHYCOCYANINES: C-­‐PHYCOCYANINE ET ALLOPHYCOCYANINE............................152.1STRUCTURE...............................................................................................................152.2CARACTERISTIQUES PHYSICOCHIMIQUES..........................................................................162.2.1SPECTRE D’ABSORPTION..................................................................................................162.2.2PH...............................................................................................................................172.3BIENFAITS................................................................................................................173PHYCOCYANOBILINE.................................................................................................183.1SPECTRE D’ABSORPTION..............................................................................................194BILIRUBINE...............................................................................................................204.1SPECTRE D’ABSORPTION..............................................................................................205TECHNIQUES DE DOSAGEUTILISEES..........................................................................215.1COLORIMETRIE ET FLUORIMETRIE...................................................................................215.1.1COLORIMETRIE ET SPECTROPHOTOMETRIE..........................................................................21 5.1.2FLUORIMETRIE...............................................................................................................225.2DOSAGE DE LA BILIRUBINE............................................................................................236EVALUATION DE LA CAPACITEANTI-­‐OXYDANTE........................................................23MATERIEL ET METHODES................................................................................................267MATERIEL.................................................................................................................267.1SPECTROPHOTOMETRE................................................................................................267.2SPECTROFLUORIMETRE................................................................................................267.3CENTRIFUGEUSE.........................................................................................................267.4SONICATEUR.............................................................................................................267.5SOXHLET..................................................................................................................277.6SONDE PH................................................................................................................277.7EVAPORATEUR ROTATIF SOUS VIDE................................................................................287.8ETUVE 37°CET 105°C................................................................................................287.9AUTOCLAVE..............................................................................................................288METHODES...............................................................................................................298.1EXTRACTION REFLUX...................................................................................................298.2EXTRACTION SOXHLET.................................................................................................308.3EXTRACTION PAR CHANGEMENT DE PHET CHAUFFAGE.......................................................318.4TEST ORAC...............................................................................................................328.5DOSAGE DE LA BILIRUBINE PAR LA METHODE DIAZO...........................................................338.6COLORIMETRIE..........................................................................................................348.7SONICATION.............................................................................................................359ECHANTILLONS ANALYSES........................................................................................35RESULTATS ET DISCUSSION.............................................................................................36 10CARACTERISATION IN VITRO DE L’ACTIVITE ANTI-­‐OXYDANTE DE LA SPIRULINE, DE LA PC ET DE LA PCB..............................................................................................................3610.1INTRODUCTION........................................................................................................3610.2VITAMINE C............................................................................................................3610.3PHYCOCYANINE.......................................................................................................3710.4PCET SPIRULINE HYDROLYSEES....................................................................................4110.4.1EXTRACTION SOXHLET SUR DE LA POUDRE DE SPIRULINE......................................................4210.4.2CHLOROPHYLLINE.........................................................................................................4410.4.3EXTRACTION REFLUX SURDE LA POUDRE DE SPIRULINE........................................................4610.4.4EXTRACTION SOXHLET SUR LA POUDRE DE PC....................................................................4910.4.5EXTRACTION REFLUX SURLA POUDRE DE PC......................................................................5010.4.6PHYCOCYANINE HYDROLYSEE EN MILIEU ALCALIN...............................................................5310.4.7SPIRULINEHYDROLYSEE EN MILIEUALCALIN......................................................................5810.5SPIRULINE FERMENTEE..............................................................................................6110.5.1SPIRULINE FERMENTEE EN MILIEU LIQUIDE........................................................................6110.5.2SPIRULINE FERMENTEE SUR MILIEU SOLIDE........................................................................6310.5.3SPIRULINE FERMENTEE SUR MILIEU SOLIDE APRES SONICATION.............................................6410.6DISSCUSSION GENERALE............................................................................................6611MISE AU POINT DE LA METHODE DIAZO ET TRANSPOSITION SUR LA PCB................6711.1TRANSFERT DE LA METHODE SUR LA PHYCOCYANOBILINE...................................................6911.2SUIVI D’UNE PRODUCTION DE CYANEX..........................................................................7111.3TEST DE LA STABILITE DU CYANEX MIS DANS DIFFERENTES CONDITIONS.................................7311.3.1PH.............................................................................................................................7311.3.2TEMPERATURE............................................................................................................75CONCLUSION GENERALE.................................................................................................77 LISTE ABREVIATIONS.......................................................................................................78LISTE DES FIGURES..........................................................................................................79BIBLIOGRAPHIE...............................................................................................................84ANNEXE..........................................................................................................................87EXTRAITS DE SPIRULINE........................................................................................................87SPIRULINE FERMENTEE.........................................................................................................88EXTRAITS DE POUDRE DEPC..................................................................................................89VITAMINE C.......................................................................................................................89CHLOROPHYLINE.................................................................................................................90BILIRUBINE........................................................................................................................90 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89349 Dosage et étude de l’activité d’extraits de la spiruline [TFE / Mémoire] / Ophélie Dieden, Auteur ; Valérie Norberg, Directeur de publication, rédacteur en chef . - 2019. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : Agronomie  AIBT  Biores laboratoires Index. décimale : TFE AIBT TFE Agro-industries et biotechnologies Résumé : De plus en plus de personnes souffrent de problèmes cardiovasculaires. Des études ont montréque les personnes atteintes d’hyperbilirubinémie sont moins sujettes aux problèmes cardiovasculaires car la bilirubine est un antioxydant. La phycocyanobiline, qui est un chromophore contenu dans les cyanobactéries,dont la spiruline, a une structure similaire à la bilirubine. Nous espérons donc que cecomposé a les mêmes effets antioxydantsque la bilirubine. Ce travail s’inscrit dans un projet plus large qui vise à mettre au point un complémentalimentaire composé de phycocyanobiline qui réduit le risque de problèmes cardiovasculaires.Une partie du travail a consisté à caractériser des hydrolysats de spiruline et de phycocyanine, nous avons comparé leurs capacités antioxydantes. Nous avons également tenté de transposer la méthode clinique de dosage de la bilirubine à la phycocyanobiline. Note de contenu : Table des matièresPRESENTATION DU LIEUDE STAGE...................................................................................8INTRODUCTION................................................................................................................9PARTIE THEORIQUE........................................................................................................111SPIRULINE.................................................................................................................111.1HISTORIQUE..............................................................................................................111.2COMPOSITION...........................................................................................................121.3CULTURE EN LABO......................................................................................................121.4BIENFAITS................................................................................................................131.5SPECTRE D’ABSORPTION..............................................................................................132LES PHYCOCYANINES: C-­‐PHYCOCYANINE ET ALLOPHYCOCYANINE............................152.1STRUCTURE...............................................................................................................152.2CARACTERISTIQUES PHYSICOCHIMIQUES..........................................................................162.2.1SPECTRE D’ABSORPTION..................................................................................................162.2.2PH...............................................................................................................................172.3BIENFAITS................................................................................................................173PHYCOCYANOBILINE.................................................................................................183.1SPECTRE D’ABSORPTION..............................................................................................194BILIRUBINE...............................................................................................................204.1SPECTRE D’ABSORPTION..............................................................................................205TECHNIQUES DE DOSAGEUTILISEES..........................................................................215.1COLORIMETRIE ET FLUORIMETRIE...................................................................................215.1.1COLORIMETRIE ET SPECTROPHOTOMETRIE..........................................................................21 5.1.2FLUORIMETRIE...............................................................................................................225.2DOSAGE DE LA BILIRUBINE............................................................................................236EVALUATION DE LA CAPACITEANTI-­‐OXYDANTE........................................................23MATERIEL ET METHODES................................................................................................267MATERIEL.................................................................................................................267.1SPECTROPHOTOMETRE................................................................................................267.2SPECTROFLUORIMETRE................................................................................................267.3CENTRIFUGEUSE.........................................................................................................267.4SONICATEUR.............................................................................................................267.5SOXHLET..................................................................................................................277.6SONDE PH................................................................................................................277.7EVAPORATEUR ROTATIF SOUS VIDE................................................................................287.8ETUVE 37°CET 105°C................................................................................................287.9AUTOCLAVE..............................................................................................................288METHODES...............................................................................................................298.1EXTRACTION REFLUX...................................................................................................298.2EXTRACTION SOXHLET.................................................................................................308.3EXTRACTION PAR CHANGEMENT DE PHET CHAUFFAGE.......................................................318.4TEST ORAC...............................................................................................................328.5DOSAGE DE LA BILIRUBINE PAR LA METHODE DIAZO...........................................................338.6COLORIMETRIE..........................................................................................................348.7SONICATION.............................................................................................................359ECHANTILLONS ANALYSES........................................................................................35RESULTATS ET DISCUSSION.............................................................................................36 10CARACTERISATION IN VITRO DE L’ACTIVITE ANTI-­‐OXYDANTE DE LA SPIRULINE, DE LA PC ET DE LA PCB..............................................................................................................3610.1INTRODUCTION........................................................................................................3610.2VITAMINE C............................................................................................................3610.3PHYCOCYANINE.......................................................................................................3710.4PCET SPIRULINE HYDROLYSEES....................................................................................4110.4.1EXTRACTION SOXHLET SUR DE LA POUDRE DE SPIRULINE......................................................4210.4.2CHLOROPHYLLINE.........................................................................................................4410.4.3EXTRACTION REFLUX SURDE LA POUDRE DE SPIRULINE........................................................4610.4.4EXTRACTION SOXHLET SUR LA POUDRE DE PC....................................................................4910.4.5EXTRACTION REFLUX SURLA POUDRE DE PC......................................................................5010.4.6PHYCOCYANINE HYDROLYSEE EN MILIEU ALCALIN...............................................................5310.4.7SPIRULINEHYDROLYSEE EN MILIEUALCALIN......................................................................5810.5SPIRULINE FERMENTEE..............................................................................................6110.5.1SPIRULINE FERMENTEE EN MILIEU LIQUIDE........................................................................6110.5.2SPIRULINE FERMENTEE SUR MILIEU SOLIDE........................................................................6310.5.3SPIRULINE FERMENTEE SUR MILIEU SOLIDE APRES SONICATION.............................................6410.6DISSCUSSION GENERALE............................................................................................6611MISE AU POINT DE LA METHODE DIAZO ET TRANSPOSITION SUR LA PCB................6711.1TRANSFERT DE LA METHODE SUR LA PHYCOCYANOBILINE...................................................6911.2SUIVI D’UNE PRODUCTION DE CYANEX..........................................................................7111.3TEST DE LA STABILITE DU CYANEX MIS DANS DIFFERENTES CONDITIONS.................................7311.3.1PH.............................................................................................................................7311.3.2TEMPERATURE............................................................................................................75CONCLUSION GENERALE.................................................................................................77 LISTE ABREVIATIONS.......................................................................................................78LISTE DES FIGURES..........................................................................................................79BIBLIOGRAPHIE...............................................................................................................84ANNEXE..........................................................................................................................87EXTRAITS DE SPIRULINE........................................................................................................87SPIRULINE FERMENTEE.........................................................................................................88EXTRAITS DE POUDRE DEPC..................................................................................................89VITAMINE C.......................................................................................................................89CHLOROPHYLINE.................................................................................................................90BILIRUBINE........................................................................................................................90 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89349

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