Centre de Documentation Campus Montignies
Horaires :
Lundi : 8h-18h30
Mardi : 8h-17h30
Mercredi 9h-16h30
Jeudi : 8h30-18h30
Vendredi : 8h30-12h30 et 13h-14h30
Votre centre de documentation sera exceptionnellement fermé de 12h30 à 13h ce lundi 18 novembre.
Egalement, il sera fermé de 12h30 à 13h30 ce mercredi 20 novembre.
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Auteur Vincent Cauchie |
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Titre : Validation du test à la mépacrine sur FACS lyric Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Vincent Cauchie, Auteur ; François Mullier, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2020 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’analyse scientifique a de plus en plus souvent besoin de tests rapides et fiables pour diagnostiquer des patients tout en évitant un coût financier trop important. L’analyse cytométrique couplée à la fluorescence permet de réunir ces avantages, malgré le coût élevé des réactifs.
Ce travail traitera du test à la mépacrine sur un cytomètre en flux, le FACS Lyric. Il y sera abordé divers points essentiels, en commençant par la présentation générale de l’automate, de ses fonctions et applications, mais également une étude approfondie du test à la mépacrine.
Une partie théorique viendra compléter l’application pratique de notre analyse : principes de validation d’une méthode et des différents paramètres explorés, répétabilité et établissement des valeurs de référence. Ce travail permettra de suivre l’évolution de la démarche scientifique mise en place pour valider le protocole préétabli du test à la mépacrine, et de le rendre réalisable à plus grande échelle.Note de contenu : Table des matières
1. Présentation du lieu de stage ........................................................................................................ 8
Introduction générale ........................................................................................................................ 9
2. Partie théorique ........................................................................................................................... 11
Chapitre 1 : Le FACS Lyric ............................................................................................................ 11
1.1. La cytométrie en flux ........................................................................................................ 11
1.2. La fluorescence ................................................................................................................. 13
1.2.1. Les colorants fluorescents ........................................................................................ 13
1.2.2. L’immunofluorescence ............................................................................................. 13
1.3. Présentation du cytomètre en flux « FACS Lyric » ........................................................... 15
Chapitre 2 : Test à la mépacrine .................................................................................................. 16
2.1. L’hémostase primaire et le rôle des plaquettes ............................................................... 16
2.1.1. Les 3 phases de l’hémostase .................................................................................... 16
2.1.2. Origine des plaquettes sanguines ............................................................................ 16
2.1.3. L’hémostase primaire ............................................................................................... 18
2.2. Les thrombopathies constitutionnelles ............................................................................ 18
2.2.1. Pathologies des récepteurs des agonistes solubles ................................................. 19
2.2.2. Altérations des voies de signalisation plaquettaire ................................................. 19
2.2.3. Pathologies sécrétoires ............................................................................................ 20
2.2.4. Pathologies des récepteurs glycoprotéiques des protéines adhésives .................... 20
2.2.5. Anomalies des phospholipides membranaires plaquettaires .................................. 21
2.3. Les anomalies de sécrétion et leur exploration ............................................................... 21
2.3.1. Granules denses ....................................................................................................... 22
2.3.1.1. Formation des granules denses .......................................................................... 22
2.3.1.2. Défaut des granules denses ................................................................................ 23
2.4. La mépacrine et principes généraux du test .................................................................... 24
2.4.1. Le test à la mépacrine .............................................................................................. 24
2.4.1.1. Pré-analytique .................................................................................................... 24
2.4.1.2. Analytique........................................................................................................... 25
2.4.1.3. Remarques .......................................................................................................... 26
2.4.2. Etablissement de valeurs de référence sur automate .............................................. 27
2.4.3. Validation d’un test et modification de paramètres ................................................ 28
2.4.4. Répétabilité .............................................................................................................. 28
7
3. Partie pratique ............................................................................................................................. 29
Chapitre 1 : Test à la mépacrine .................................................................................................. 29
Chapitre 2 : Validation du test à la mépacrine ............................................................................ 30
2.1. Activation au TRAP : avant et après addition de mépacrine ............................................ 31
2.2. Réévaluation des différentes concentrations en mépacrine (Lyric 1) ............................. 32
2.3. Stabilité de l’attente devant le cytomètre ....................................................................... 34
2.4. Stabilité échantillon sur 2 jours : H0, H1, H2, H4, H6, H24 .............................................. 35
2.5. Etude de la stabilité de la mépacrine en fonction du temps (Lyric 1) .............................. 35
2.5.1. Stabilité de la solution stock sur 1 mois ................................................................... 36
2.5.2. Stabilité de la solution mère sur 5 jours ................................................................... 37
2.5.3. Stabilité de la solution fille sur 5 jours ..................................................................... 37
2.6. Répétabilité et reproductibilité ........................................................................................ 39
2.7. Calcul du biais entre les 2 cytomètres .............................................................................. 40
Chapitre 3 : Etablissement des valeurs de référence .................................................................. 42
4. Conclusion générale et perspectives ........................................................................................... 44
5. Glossaire ...................................................................................................................................... 45
6. Bibliographie ................................................................................................................................ 47
7. Annexes ....................................................................................................................................... 50Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89149 Validation du test à la mépacrine sur FACS lyric [TFE / Mémoire] / Vincent Cauchie, Auteur ; François Mullier, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2020.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’analyse scientifique a de plus en plus souvent besoin de tests rapides et fiables pour diagnostiquer des patients tout en évitant un coût financier trop important. L’analyse cytométrique couplée à la fluorescence permet de réunir ces avantages, malgré le coût élevé des réactifs.
Ce travail traitera du test à la mépacrine sur un cytomètre en flux, le FACS Lyric. Il y sera abordé divers points essentiels, en commençant par la présentation générale de l’automate, de ses fonctions et applications, mais également une étude approfondie du test à la mépacrine.
Une partie théorique viendra compléter l’application pratique de notre analyse : principes de validation d’une méthode et des différents paramètres explorés, répétabilité et établissement des valeurs de référence. Ce travail permettra de suivre l’évolution de la démarche scientifique mise en place pour valider le protocole préétabli du test à la mépacrine, et de le rendre réalisable à plus grande échelle.Note de contenu : Table des matières
1. Présentation du lieu de stage ........................................................................................................ 8
Introduction générale ........................................................................................................................ 9
2. Partie théorique ........................................................................................................................... 11
Chapitre 1 : Le FACS Lyric ............................................................................................................ 11
1.1. La cytométrie en flux ........................................................................................................ 11
1.2. La fluorescence ................................................................................................................. 13
1.2.1. Les colorants fluorescents ........................................................................................ 13
1.2.2. L’immunofluorescence ............................................................................................. 13
1.3. Présentation du cytomètre en flux « FACS Lyric » ........................................................... 15
Chapitre 2 : Test à la mépacrine .................................................................................................. 16
2.1. L’hémostase primaire et le rôle des plaquettes ............................................................... 16
2.1.1. Les 3 phases de l’hémostase .................................................................................... 16
2.1.2. Origine des plaquettes sanguines ............................................................................ 16
2.1.3. L’hémostase primaire ............................................................................................... 18
2.2. Les thrombopathies constitutionnelles ............................................................................ 18
2.2.1. Pathologies des récepteurs des agonistes solubles ................................................. 19
2.2.2. Altérations des voies de signalisation plaquettaire ................................................. 19
2.2.3. Pathologies sécrétoires ............................................................................................ 20
2.2.4. Pathologies des récepteurs glycoprotéiques des protéines adhésives .................... 20
2.2.5. Anomalies des phospholipides membranaires plaquettaires .................................. 21
2.3. Les anomalies de sécrétion et leur exploration ............................................................... 21
2.3.1. Granules denses ....................................................................................................... 22
2.3.1.1. Formation des granules denses .......................................................................... 22
2.3.1.2. Défaut des granules denses ................................................................................ 23
2.4. La mépacrine et principes généraux du test .................................................................... 24
2.4.1. Le test à la mépacrine .............................................................................................. 24
2.4.1.1. Pré-analytique .................................................................................................... 24
2.4.1.2. Analytique........................................................................................................... 25
2.4.1.3. Remarques .......................................................................................................... 26
2.4.2. Etablissement de valeurs de référence sur automate .............................................. 27
2.4.3. Validation d’un test et modification de paramètres ................................................ 28
2.4.4. Répétabilité .............................................................................................................. 28
7
3. Partie pratique ............................................................................................................................. 29
Chapitre 1 : Test à la mépacrine .................................................................................................. 29
Chapitre 2 : Validation du test à la mépacrine ............................................................................ 30
2.1. Activation au TRAP : avant et après addition de mépacrine ............................................ 31
2.2. Réévaluation des différentes concentrations en mépacrine (Lyric 1) ............................. 32
2.3. Stabilité de l’attente devant le cytomètre ....................................................................... 34
2.4. Stabilité échantillon sur 2 jours : H0, H1, H2, H4, H6, H24 .............................................. 35
2.5. Etude de la stabilité de la mépacrine en fonction du temps (Lyric 1) .............................. 35
2.5.1. Stabilité de la solution stock sur 1 mois ................................................................... 36
2.5.2. Stabilité de la solution mère sur 5 jours ................................................................... 37
2.5.3. Stabilité de la solution fille sur 5 jours ..................................................................... 37
2.6. Répétabilité et reproductibilité ........................................................................................ 39
2.7. Calcul du biais entre les 2 cytomètres .............................................................................. 40
Chapitre 3 : Etablissement des valeurs de référence .................................................................. 42
4. Conclusion générale et perspectives ........................................................................................... 44
5. Glossaire ...................................................................................................................................... 45
6. Bibliographie ................................................................................................................................ 47
7. Annexes ....................................................................................................................................... 50Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89149 Exemplaires
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