Vérification de méthode pour l’analyse des liquides de ponction sur l’IQ200 / Antoine Verriez

Public ISBD Titre : Vérification de méthode pour l’analyse des liquides de ponction sur l’IQ200 Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Antoine Verriez, Auteur ; Caroline Charlier, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2019 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale  Centre hospitalier de Valenciennes Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’organisme humain est composé de cavités contenant un liquide nécessaire au bon fonctionnement de ce dernier. La sécrétion importante de liquide nécessite des investigations biologiques car cette dernière peut être d’origine infectieuse et ou inflammatoire. Pour ce faire, le clinicien réalise des prélèvements afin que ceux-ci soient exploités. Ces liquides de ponction proviennent de l’abdomen, la plèvre, le péricarde et des articulations. Leur analyse est incontournable puisqu’elle oriente les hypothèses diagnostiques du clinicien, et permet la mise en oeuvre d’un traitement éventuel. Cette analyse repose sur le décompte des leucocytes et des hématies. Actuellement, au Centre Hospitalier de Valenciennes, cet examen est réalisé manuellement. L’objectif du stage consiste à développer la numération de liquides de ponction à l’aide d’un automate, l’IQ200, par la construction d’un dossier de vérification. Ainsi, l’évaluation des performances consiste en l’étude de la répétabilité, la fidélité intermédiaire (ou reproductibilité), la variabilité inter-opérateurs, la comparaison de méthodes, l’étendue de mesure, la contamination et l’intervalle de références. En pratique, 132 liquides ont été analysés à la fois manuellement (décompte sur KOVA slide) et sur l’automate. Seuls 131 liquides ont été comparés dont 95 ascites, 31 pleuraux, 2 articulaires, 1 péricardique ainsi que 2 liquides de dialyse péritonéale. 119 d’entre eux possèdent des résultats concordants entre la numération automatique et la numération manuelle, soit 90,8% de corrélation. La majorité des résultats montre les mêmes significations cliniques en méthode manuelle et automatique. De plus, nous avons pu déterminer la précision de la méthode par la mesure de la répétabilité, la reproductibilité de la méthode, le seuil de détection et de quantification ainsi qu’une étude sur la contamination inter-échantillons. Cependant, la variabilité inter-opérateurs n’a pas pu être étudiée. Alors que la cytologie automatisée des liquides pleuraux et d’ascites pourra très prochainement être mise en place, une prolongation d’étude est à envisager pour les liquides péricardiques, articulaires et les liquides de dialyse péritonéale. Note de contenu : Table des matières 1 Présentation de l’établissement ......................................................................................... 8 1.1 Généralités ................................................................................................................... 8 1.2 Politique de l’établissement ........................................................................................ 8 1.3 Présentation du laboratoire ........................................................................................ 9 1.3.1 Secteur ICAAR ....................................................................................................... 9 1.3.2 Hématologie et hémostase ................................................................................ 10 1.3.3 Immuno-sérologie .............................................................................................. 10 1.3.4 Microbiologie ..................................................................................................... 11 1.4 La certification et l’accréditation ............................................................................... 11 Introduction .............................................................................................................................. 12 2 Contexte théorique ........................................................................................................... 13 2.1 Liquide d’ascite .......................................................................................................... 13 2.1.1 Définition ............................................................................................................ 13 2.1.2 Etiologie .............................................................................................................. 13 2.1.3 Biochimie ............................................................................................................ 14 2.1.4 Cytologie ............................................................................................................. 14 2.1.5 Arbre décisionnel ............................................................................................... 16 2.2 Liquide pleural ........................................................................................................... 17 2.2.1 Définition ............................................................................................................ 17 2.2.2 Etiologie .............................................................................................................. 17 2.2.3 Biochimie ............................................................................................................ 18 2.2.4 Cytologie ............................................................................................................. 19 2.2.5 Arbre décisionnel ............................................................................................... 20 2.3 Liquide articulaire ...................................................................................................... 21 2.3.1 Définition ............................................................................................................ 21 2.3.2 Etiologie .............................................................................................................. 22 2.3.3 Biochimie ............................................................................................................ 22 2.3.4 Cytologie ............................................................................................................. 22 2.3.5 Arbre décisionnel ............................................................................................... 23 2.4 Liquide péricardique .................................................................................................. 24 2.4.1 Définition ............................................................................................................ 24 2.4.2 Etiologie .............................................................................................................. 25 2.4.3 Biochimie ............................................................................................................ 26 2.4.4 Cytologie ............................................................................................................. 26 2.5 IQ 200 ......................................................................................................................... 26 2.5.1 Principe ............................................................................................................... 26 2.5.2 Consommables ................................................................................................... 28 2.5.3 Contrôles internes de qualité ............................................................................. 29 2.5.4 Liquides analysables sur IQ200 .......................................................................... 31 3 Objectifs et stratégie ......................................................................................................... 32 4 Matériel et méthodes ....................................................................................................... 32 4.1 Echantillons étudiés ................................................................................................... 32 4.2 Méthodes ................................................................................................................... 33 4.2.1 Mode opératoire pour le passage des CIQ ......................................................... 33 4.2.2 Mode opératoire pour le passage des échantillons patients............................. 33 4.2.3 Mode opératoire pour le décompte sur cellule KOVA® ..................................... 34 4.2.4 Etude de la linéarité ........................................................................................... 34 4.2.5 Vérification du bruit de fond .............................................................................. 35 5 Résultats et discussion ...................................................................................................... 35 5.1 Etendue des valeurs................................................................................................... 35 5.2 Etude de la répétabilité ............................................................................................. 36 5.3 Etude de la fidélité intermédiaire .............................................................................. 37 5.4 Etude de la variabilité inter-opérateurs .................................................................... 38 5.5 Comparaison de méthodes........................................................................................ 38 5.5.1 Liquide d’ascite ................................................................................................... 39 5.5.2 Liquides pleuraux ............................................................................................... 41 5.5.3 Autres liquides .................................................................................................... 41 5.5.4 Résultats globaux de la comparaison de méthodes .......................................... 42 5.6 Etendue de mesure.................................................................................................... 43 5.6.1 Limite de détection ............................................................................................ 43 5.6.2 Limite de quantification ..................................................................................... 43 5.6.3 Linéarité .............................................................................................................. 43 5.6.4 Conclusion de l’étude ......................................................................................... 45 5.7 Etude de la contamination inter-échantillons ........................................................... 45 5.8 Intervalles de référence et valeurs de décision clinique ........................................... 47 5.9 Mise en pratique ........................................................................................................ 47 Conclusion et perspectives ....................................................................................................... 48 Liste des figures ........................................................................................................................ 49 Liste des abréviations ............................................................................................................... 50 Bibliographie ............................................................................................................................ 51 Table des annexes .................................................................................................................... 53 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=80005 Vérification de méthode pour l’analyse des liquides de ponction sur l’IQ200 [TFE / Mémoire] / Antoine Verriez, Auteur ; Caroline Charlier, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2019. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale  Centre hospitalier de Valenciennes Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’organisme humain est composé de cavités contenant un liquide nécessaire au bon fonctionnement de ce dernier. La sécrétion importante de liquide nécessite des investigations biologiques car cette dernière peut être d’origine infectieuse et ou inflammatoire. Pour ce faire, le clinicien réalise des prélèvements afin que ceux-ci soient exploités. Ces liquides de ponction proviennent de l’abdomen, la plèvre, le péricarde et des articulations. Leur analyse est incontournable puisqu’elle oriente les hypothèses diagnostiques du clinicien, et permet la mise en oeuvre d’un traitement éventuel. Cette analyse repose sur le décompte des leucocytes et des hématies. Actuellement, au Centre Hospitalier de Valenciennes, cet examen est réalisé manuellement. L’objectif du stage consiste à développer la numération de liquides de ponction à l’aide d’un automate, l’IQ200, par la construction d’un dossier de vérification. Ainsi, l’évaluation des performances consiste en l’étude de la répétabilité, la fidélité intermédiaire (ou reproductibilité), la variabilité inter-opérateurs, la comparaison de méthodes, l’étendue de mesure, la contamination et l’intervalle de références. En pratique, 132 liquides ont été analysés à la fois manuellement (décompte sur KOVA slide) et sur l’automate. Seuls 131 liquides ont été comparés dont 95 ascites, 31 pleuraux, 2 articulaires, 1 péricardique ainsi que 2 liquides de dialyse péritonéale. 119 d’entre eux possèdent des résultats concordants entre la numération automatique et la numération manuelle, soit 90,8% de corrélation. La majorité des résultats montre les mêmes significations cliniques en méthode manuelle et automatique. De plus, nous avons pu déterminer la précision de la méthode par la mesure de la répétabilité, la reproductibilité de la méthode, le seuil de détection et de quantification ainsi qu’une étude sur la contamination inter-échantillons. Cependant, la variabilité inter-opérateurs n’a pas pu être étudiée. Alors que la cytologie automatisée des liquides pleuraux et d’ascites pourra très prochainement être mise en place, une prolongation d’étude est à envisager pour les liquides péricardiques, articulaires et les liquides de dialyse péritonéale. Note de contenu : Table des matières 1 Présentation de l’établissement ......................................................................................... 8 1.1 Généralités ................................................................................................................... 8 1.2 Politique de l’établissement ........................................................................................ 8 1.3 Présentation du laboratoire ........................................................................................ 9 1.3.1 Secteur ICAAR ....................................................................................................... 9 1.3.2 Hématologie et hémostase ................................................................................ 10 1.3.3 Immuno-sérologie .............................................................................................. 10 1.3.4 Microbiologie ..................................................................................................... 11 1.4 La certification et l’accréditation ............................................................................... 11 Introduction .............................................................................................................................. 12 2 Contexte théorique ........................................................................................................... 13 2.1 Liquide d’ascite .......................................................................................................... 13 2.1.1 Définition ............................................................................................................ 13 2.1.2 Etiologie .............................................................................................................. 13 2.1.3 Biochimie ............................................................................................................ 14 2.1.4 Cytologie ............................................................................................................. 14 2.1.5 Arbre décisionnel ............................................................................................... 16 2.2 Liquide pleural ........................................................................................................... 17 2.2.1 Définition ............................................................................................................ 17 2.2.2 Etiologie .............................................................................................................. 17 2.2.3 Biochimie ............................................................................................................ 18 2.2.4 Cytologie ............................................................................................................. 19 2.2.5 Arbre décisionnel ............................................................................................... 20 2.3 Liquide articulaire ...................................................................................................... 21 2.3.1 Définition ............................................................................................................ 21 2.3.2 Etiologie .............................................................................................................. 22 2.3.3 Biochimie ............................................................................................................ 22 2.3.4 Cytologie ............................................................................................................. 22 2.3.5 Arbre décisionnel ............................................................................................... 23 2.4 Liquide péricardique .................................................................................................. 24 2.4.1 Définition ............................................................................................................ 24 2.4.2 Etiologie .............................................................................................................. 25 2.4.3 Biochimie ............................................................................................................ 26 2.4.4 Cytologie ............................................................................................................. 26 2.5 IQ 200 ......................................................................................................................... 26 2.5.1 Principe ............................................................................................................... 26 2.5.2 Consommables ................................................................................................... 28 2.5.3 Contrôles internes de qualité ............................................................................. 29 2.5.4 Liquides analysables sur IQ200 .......................................................................... 31 3 Objectifs et stratégie ......................................................................................................... 32 4 Matériel et méthodes ....................................................................................................... 32 4.1 Echantillons étudiés ................................................................................................... 32 4.2 Méthodes ................................................................................................................... 33 4.2.1 Mode opératoire pour le passage des CIQ ......................................................... 33 4.2.2 Mode opératoire pour le passage des échantillons patients............................. 33 4.2.3 Mode opératoire pour le décompte sur cellule KOVA® ..................................... 34 4.2.4 Etude de la linéarité ........................................................................................... 34 4.2.5 Vérification du bruit de fond .............................................................................. 35 5 Résultats et discussion ...................................................................................................... 35 5.1 Etendue des valeurs................................................................................................... 35 5.2 Etude de la répétabilité ............................................................................................. 36 5.3 Etude de la fidélité intermédiaire .............................................................................. 37 5.4 Etude de la variabilité inter-opérateurs .................................................................... 38 5.5 Comparaison de méthodes........................................................................................ 38 5.5.1 Liquide d’ascite ................................................................................................... 39 5.5.2 Liquides pleuraux ............................................................................................... 41 5.5.3 Autres liquides .................................................................................................... 41 5.5.4 Résultats globaux de la comparaison de méthodes .......................................... 42 5.6 Etendue de mesure.................................................................................................... 43 5.6.1 Limite de détection ............................................................................................ 43 5.6.2 Limite de quantification ..................................................................................... 43 5.6.3 Linéarité .............................................................................................................. 43 5.6.4 Conclusion de l’étude ......................................................................................... 45 5.7 Etude de la contamination inter-échantillons ........................................................... 45 5.8 Intervalles de référence et valeurs de décision clinique ........................................... 47 5.9 Mise en pratique ........................................................................................................ 47 Conclusion et perspectives ....................................................................................................... 48 Liste des figures ........................................................................................................................ 49 Liste des abréviations ............................................................................................................... 50 Bibliographie ............................................................................................................................ 51 Table des annexes .................................................................................................................... 53 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=80005

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