Anticorps anti-CCP : Apports diagnostiques et validation de méthode / Doygu Sanak

Public ISBD Titre : Anticorps anti-CCP : Apports diagnostiques et validation de méthode Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Doygu Sanak, Auteur ; Patrick Vankerkhoven, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2019 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale  CHU Charleroi  Marie Curie Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : La polyarthrite rhumatoïde est une maladie auto-immune fréquente qui touche entre 0,5 et 1% de la population mondiale. Elle se caractérise par une inflammation de la membrane synoviale et touche principalement les poignets ainsi que les articulations interphalangiennes. Il est primordial de dépister rapidement la maladie afin d’éviter une destruction articulaire irréversible et des complications pouvant mener jusqu’à la mort du patient. Dans cette optique, les anticorps anti-CCP sont des marqueurs de dosage très précoces, présents même avant le début des premiers signes cliniques de la pathologie. Au laboratoire de biochimie de l’Hôpital Civil Marie Curie, ces anticorps étaient initialement dosés au moyen d’une technique immuno-enzymatique semi-automatisée (Inova, Werfen). Aujourd'hui, le dosage des anti-CCP est réalisé via une méthode entièrement automatisée basée sur une détection par chimiluminescence (Architect, Abbott). Ce travail a pour objectifs d’une part de faire le point sur les anti-CCP en tant que marqueur biologique de la polyarthrite rhumatoïde et d’autre part d’évaluer les performances analytiques du dosage des anti-CCP avec détection par chimiluminescence. Une comparaison des résultats issus des deux méthodes de dosage et portant sur 68 patients a notamment été réalisée. En conclusion, le dosage des anti-CCP sur Architect présente des performances analytiques satisfaisantes et démontre une plus grande spécificité clinique que la méthode semi-automatisée. Note de contenu : Introduction ............................................................................................................................................. 7 Partie théorique ...................................................................................................................................... 8 1. Auto-immunité ................................................................................................................................ 9 1.1 Introduction ............................................................................................................................. 9 1.2 Anticorps ................................................................................................................................. 9 1.3 Auto-anticorps ....................................................................................................................... 10 1.3.1 Les auto-anticorps naturels ........................................................................................... 11 1.3.2 Les auto-anticorps pathologiques ................................................................................. 11 1.4 Les maladies auto immunes (MAI) ........................................................................................ 11 1.4.1 Les maladies auto-immunes non spécifiques d’organe ................................................ 11 1.4.2 Les maladies auto-immunes spécifiques d’organes ...................................................... 13 2. La polyarthrite rhumatoïde ........................................................................................................... 14 2.1 Introduction ........................................................................................................................... 14 2.2 Facteurs de risques : .............................................................................................................. 14 2.2.1 Facteurs génétiques ...................................................................................................... 14 2.2.2 Facteurs environnementaux ......................................................................................... 15 2.2.3 Facteurs infectieux ........................................................................................................ 15 2.3 Physiopathologie ................................................................................................................... 15 2.4 Signes cliniques :.................................................................................................................... 16 2.5 Signes biologiques ................................................................................................................. 16 2.6 Critères diagnostiques de l’American College of Rheumatology (ACR) ................................ 17 2.7 Marqueurs sérologiques : ...................................................................................................... 18 2.8 Traitement ............................................................................................................................. 18 2.8.1 Traitement de la douleur, de l’inflammation et du désordre immunitaire .................. 18 2.8.2 Traitements ciblés ......................................................................................................... 18 3. Anticorps anti-peptides cycliques citrullinés (anti-CCP) ................................................................ 19 3.1 Introduction ........................................................................................................................... 19 3.2 Historique .............................................................................................................................. 19 3.3 Intérêts .................................................................................................................................. 20 3.4 Dosage ................................................................................................................................... 20 4. PhD lx ............................................................................................................................................. 21 4.1 Appareillage ........................................................................................................................... 21 4.2 Principe de l’appareil ............................................................................................................. 22 5. Architect I2000 .............................................................................................................................. 23 5.1 Appareillage : ......................................................................................................................... 23 5 5.2 Principe de l’appareil ............................................................................................................. 24 6. Méthode de validation .................................................................................................................. 26 Objectifs et stratégie du travail ............................................................................................................. 27 Partie pratique ...................................................................................................................................... 28 1. Matériels et méthodes .................................................................................................................. 29 1.1 Dosage des anticorps anti-CCP sur le PhD lx ......................................................................... 29 1.1.1 Réactifs .......................................................................................................................... 29 1.1.2 Échantillons ................................................................................................................... 29 1.1.3 Méthode ........................................................................................................................ 29 1.1.4 Contrôle qualité ............................................................................................................. 30 1.1.5 Interprétation des résultats .......................................................................................... 30 1.1.6 Limite du test et interférence ........................................................................................ 30 1.2 Dosage des anti-CCP sur l’Architect ...................................................................................... 31 1.2.1 Réactifs .......................................................................................................................... 31 1.2.2 Échantillons ................................................................................................................... 31 1.2.3 Méthode ........................................................................................................................ 32 1.2.4 Limite et interférence du test ........................................................................................ 32 1.2.5 Interprétation des résultats .......................................................................................... 32 2. Résultats ........................................................................................................................................ 33 2.1 La calibration ......................................................................................................................... 33 2.2 Répétabilité ........................................................................................................................... 33 2.3 Reproductibilité ..................................................................................................................... 34 2.4 Linéarité ................................................................................................................................. 35 3.Comparaison ...................................................................................................................................... 37 3.1 Comparaison des résultats patients ...................................................................................... 37 3.2 Comparaison des automates ................................................................................................. 40 3.3 Discussion .............................................................................................................................. 40 Conclusion ............................................................................................................................................. 42 Liste des figures et abréviations ............................................................................................................ 44 Bibliographie.......................................................................................................................................... 46 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=80000 Anticorps anti-CCP : Apports diagnostiques et validation de méthode [TFE / Mémoire] / Doygu Sanak, Auteur ; Patrick Vankerkhoven, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2019. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale  CHU Charleroi  Marie Curie Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : La polyarthrite rhumatoïde est une maladie auto-immune fréquente qui touche entre 0,5 et 1% de la population mondiale. Elle se caractérise par une inflammation de la membrane synoviale et touche principalement les poignets ainsi que les articulations interphalangiennes. Il est primordial de dépister rapidement la maladie afin d’éviter une destruction articulaire irréversible et des complications pouvant mener jusqu’à la mort du patient. Dans cette optique, les anticorps anti-CCP sont des marqueurs de dosage très précoces, présents même avant le début des premiers signes cliniques de la pathologie. Au laboratoire de biochimie de l’Hôpital Civil Marie Curie, ces anticorps étaient initialement dosés au moyen d’une technique immuno-enzymatique semi-automatisée (Inova, Werfen). Aujourd'hui, le dosage des anti-CCP est réalisé via une méthode entièrement automatisée basée sur une détection par chimiluminescence (Architect, Abbott). Ce travail a pour objectifs d’une part de faire le point sur les anti-CCP en tant que marqueur biologique de la polyarthrite rhumatoïde et d’autre part d’évaluer les performances analytiques du dosage des anti-CCP avec détection par chimiluminescence. Une comparaison des résultats issus des deux méthodes de dosage et portant sur 68 patients a notamment été réalisée. En conclusion, le dosage des anti-CCP sur Architect présente des performances analytiques satisfaisantes et démontre une plus grande spécificité clinique que la méthode semi-automatisée. Note de contenu : Introduction ............................................................................................................................................. 7 Partie théorique ...................................................................................................................................... 8 1. Auto-immunité ................................................................................................................................ 9 1.1 Introduction ............................................................................................................................. 9 1.2 Anticorps ................................................................................................................................. 9 1.3 Auto-anticorps ....................................................................................................................... 10 1.3.1 Les auto-anticorps naturels ........................................................................................... 11 1.3.2 Les auto-anticorps pathologiques ................................................................................. 11 1.4 Les maladies auto immunes (MAI) ........................................................................................ 11 1.4.1 Les maladies auto-immunes non spécifiques d’organe ................................................ 11 1.4.2 Les maladies auto-immunes spécifiques d’organes ...................................................... 13 2. La polyarthrite rhumatoïde ........................................................................................................... 14 2.1 Introduction ........................................................................................................................... 14 2.2 Facteurs de risques : .............................................................................................................. 14 2.2.1 Facteurs génétiques ...................................................................................................... 14 2.2.2 Facteurs environnementaux ......................................................................................... 15 2.2.3 Facteurs infectieux ........................................................................................................ 15 2.3 Physiopathologie ................................................................................................................... 15 2.4 Signes cliniques :.................................................................................................................... 16 2.5 Signes biologiques ................................................................................................................. 16 2.6 Critères diagnostiques de l’American College of Rheumatology (ACR) ................................ 17 2.7 Marqueurs sérologiques : ...................................................................................................... 18 2.8 Traitement ............................................................................................................................. 18 2.8.1 Traitement de la douleur, de l’inflammation et du désordre immunitaire .................. 18 2.8.2 Traitements ciblés ......................................................................................................... 18 3. Anticorps anti-peptides cycliques citrullinés (anti-CCP) ................................................................ 19 3.1 Introduction ........................................................................................................................... 19 3.2 Historique .............................................................................................................................. 19 3.3 Intérêts .................................................................................................................................. 20 3.4 Dosage ................................................................................................................................... 20 4. PhD lx ............................................................................................................................................. 21 4.1 Appareillage ........................................................................................................................... 21 4.2 Principe de l’appareil ............................................................................................................. 22 5. Architect I2000 .............................................................................................................................. 23 5.1 Appareillage : ......................................................................................................................... 23 5 5.2 Principe de l’appareil ............................................................................................................. 24 6. Méthode de validation .................................................................................................................. 26 Objectifs et stratégie du travail ............................................................................................................. 27 Partie pratique ...................................................................................................................................... 28 1. Matériels et méthodes .................................................................................................................. 29 1.1 Dosage des anticorps anti-CCP sur le PhD lx ......................................................................... 29 1.1.1 Réactifs .......................................................................................................................... 29 1.1.2 Échantillons ................................................................................................................... 29 1.1.3 Méthode ........................................................................................................................ 29 1.1.4 Contrôle qualité ............................................................................................................. 30 1.1.5 Interprétation des résultats .......................................................................................... 30 1.1.6 Limite du test et interférence ........................................................................................ 30 1.2 Dosage des anti-CCP sur l’Architect ...................................................................................... 31 1.2.1 Réactifs .......................................................................................................................... 31 1.2.2 Échantillons ................................................................................................................... 31 1.2.3 Méthode ........................................................................................................................ 32 1.2.4 Limite et interférence du test ........................................................................................ 32 1.2.5 Interprétation des résultats .......................................................................................... 32 2. Résultats ........................................................................................................................................ 33 2.1 La calibration ......................................................................................................................... 33 2.2 Répétabilité ........................................................................................................................... 33 2.3 Reproductibilité ..................................................................................................................... 34 2.4 Linéarité ................................................................................................................................. 35 3.Comparaison ...................................................................................................................................... 37 3.1 Comparaison des résultats patients ...................................................................................... 37 3.2 Comparaison des automates ................................................................................................. 40 3.3 Discussion .............................................................................................................................. 40 Conclusion ............................................................................................................................................. 42 Liste des figures et abréviations ............................................................................................................ 44 Bibliographie.......................................................................................................................................... 46 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=80000

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