Expression de LAMP 2 dans le kératinocyte humain : détermination de l’influence de la vitamine D3 / Geoffroy VAN DESSEL

Public ISBD Titre : Expression de LAMP 2 dans le kératinocyte humain : détermination de l’influence de la vitamine D3 Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Geoffroy VAN DESSEL, Auteur ; Yves Poumay, Directeur de la recherche Année de publication : 2017 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale  Université de Namur  le laboratoire de cellule et tissus Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : TABLE DES MATIÈRES REMERCIEMENTS Présentation du lieu de stage ............................................................................ 9 INTRODUCTION GÉNÉRALE .............................................................................. 11 1. CONTEXTE GÉNÉRAL ................................................................................ 12 1.1. LA PEAU ........................................................................................... 12 1.1.1. Introduction ............................................................................................................... 12 1.1.2. Épiderme ................................................................................................................... 13 1.1.3. Épiderme et cholestérol ............................................................................................ 15 1.2. LA VITAMINE D ................................................................................. 16 1.2.1. Description................................................................................................................. 16 1.2.2. Relation entre vitamine D3 et épiderme .................................................................... 16 1.3. LYSOSOMES ET SYSTÈME CYTOMEMBRANAIRE ................................. 17 1.3.1. Description................................................................................................................. 17 1.3.2. L’endocytose .............................................................................................................. 18 1.3.3. L’exocytose ................................................................................................................ 18 1.4. LAMP 2 ............................................................................................ 19 1.4.1. Description................................................................................................................. 19 1.4.2. Lien avec le cholestérol ............................................................................................. 20 1.4.3. Lien supposé avec la vitamine D3 .............................................................................. 20 1.5. LES DIFFÉRENTS TYPES DE CULTURE CELLULAIRE ............................... 21 1.5.1. La culture en monocouches ....................................................................................... 21 1.5.2. La culture d’épidermes reconstruits (RHE) ................................................................ 21 2. OBJECTIF ET STRATÉGIE ........................................................................... 22 3. MATÉRIEL ET MÉTHODE .......................................................................... 23 3.1. Culture cellulaire .............................................................................. 23 3.1.1. Matériel et réactifs .................................................................................................... 23 3.1.2. Méthodes .................................................................................................................. 26 3.2. Fixation ............................................................................................ 28 3.2.1. Matériel et réactifs .................................................................................................... 28 3.2.2. Méthodes .................................................................................................................. 28 3.3. Paraffinage et découpe .................................................................... 29 3.3.1. Matériel et réactifs .................................................................................................... 29 3.3.2. Méthodes .................................................................................................................. 29 3.4. Immunomarquages .......................................................................... 31 3.4.1. Matériel et réactifs .................................................................................................... 31 3.4.2. Méthodes .................................................................................................................. 32 3.5. Western Blot .................................................................................... 33 3.5.1. Matériel et réactifs .................................................................................................... 33 3.5.2. Méthode .................................................................................................................... 35 3.6. RT-qPCR ........................................................................................... 39 3.6.1. Matériel et réactifs .................................................................................................... 39 3.6.2. Méthode .................................................................................................................... 40 4. RÉSULTATS ET DISCUSSIONS .................................................................... 42 4.1. Choix de la souche de culture ........................................................... 42 4.2. Immunomarquages .......................................................................... 43 4.3. Western Blot .................................................................................... 50 4.4. RT-qPCR ........................................................................................... 51 5. Conclusion .............................................................................................. 55 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65862 Expression de LAMP 2 dans le kératinocyte humain : détermination de l’influence de la vitamine D3 [TFE / Mémoire] / Geoffroy VAN DESSEL, Auteur ; Yves Poumay, Directeur de la recherche . - 2017. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale  Université de Namur  le laboratoire de cellule et tissus Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : TABLE DES MATIÈRES REMERCIEMENTS Présentation du lieu de stage ............................................................................ 9 INTRODUCTION GÉNÉRALE .............................................................................. 11 1. CONTEXTE GÉNÉRAL ................................................................................ 12 1.1. LA PEAU ........................................................................................... 12 1.1.1. Introduction ............................................................................................................... 12 1.1.2. Épiderme ................................................................................................................... 13 1.1.3. Épiderme et cholestérol ............................................................................................ 15 1.2. LA VITAMINE D ................................................................................. 16 1.2.1. Description................................................................................................................. 16 1.2.2. Relation entre vitamine D3 et épiderme .................................................................... 16 1.3. LYSOSOMES ET SYSTÈME CYTOMEMBRANAIRE ................................. 17 1.3.1. Description................................................................................................................. 17 1.3.2. L’endocytose .............................................................................................................. 18 1.3.3. L’exocytose ................................................................................................................ 18 1.4. LAMP 2 ............................................................................................ 19 1.4.1. Description................................................................................................................. 19 1.4.2. Lien avec le cholestérol ............................................................................................. 20 1.4.3. Lien supposé avec la vitamine D3 .............................................................................. 20 1.5. LES DIFFÉRENTS TYPES DE CULTURE CELLULAIRE ............................... 21 1.5.1. La culture en monocouches ....................................................................................... 21 1.5.2. La culture d’épidermes reconstruits (RHE) ................................................................ 21 2. OBJECTIF ET STRATÉGIE ........................................................................... 22 3. MATÉRIEL ET MÉTHODE .......................................................................... 23 3.1. Culture cellulaire .............................................................................. 23 3.1.1. Matériel et réactifs .................................................................................................... 23 3.1.2. Méthodes .................................................................................................................. 26 3.2. Fixation ............................................................................................ 28 3.2.1. Matériel et réactifs .................................................................................................... 28 3.2.2. Méthodes .................................................................................................................. 28 3.3. Paraffinage et découpe .................................................................... 29 3.3.1. Matériel et réactifs .................................................................................................... 29 3.3.2. Méthodes .................................................................................................................. 29 3.4. Immunomarquages .......................................................................... 31 3.4.1. Matériel et réactifs .................................................................................................... 31 3.4.2. Méthodes .................................................................................................................. 32 3.5. Western Blot .................................................................................... 33 3.5.1. Matériel et réactifs .................................................................................................... 33 3.5.2. Méthode .................................................................................................................... 35 3.6. RT-qPCR ........................................................................................... 39 3.6.1. Matériel et réactifs .................................................................................................... 39 3.6.2. Méthode .................................................................................................................... 40 4. RÉSULTATS ET DISCUSSIONS .................................................................... 42 4.1. Choix de la souche de culture ........................................................... 42 4.2. Immunomarquages .......................................................................... 43 4.3. Western Blot .................................................................................... 50 4.4. RT-qPCR ........................................................................................... 51 5. Conclusion .............................................................................................. 55 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65862

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