Contribution au développement d’un modèle in vitro d’une peau atopique / Hüda IBIS

Public ISBD Titre : Contribution au développement d’un modèle in vitro d’une peau atopique Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Hüda IBIS, Auteur ; Roland HUBAUX, Directeur de la recherche Année de publication : 2017 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale  StratiCell  laboratoire de culture cellulaire. Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : REMERCIEMENT PRÉSENTATION DU LIEU DE STAGE 9 INTRODUCTION GÉNÉRALE 11 I. Contexte Générale 12 A) Biologie Cutanée 12 1. La peau, structure et fonctions générales 12 2. L’hypoderme 13 3. Le derme 13 4. Jonction dermo- épidermique 14 5. L’épiderme 15 5.1 La fonction barrière de l’épiderme 17 5.2 Les mélanocytes 18 6. Le système immunitaire de la peau 18 B) Peau atopique 21 1. Dermatite atopique 21 1.1 Symptômes 21 1.1.1 Évolution de la dermatite atopique d’un point de vue histologique 22 1.2 Pathogenèse – Causes 23 1.2.1 Prédisposition génétique 24 1.2.2 Système immunitaire et la barrière cutanée 24 1.2.3 Facteurs environnementaux 26 1.3 Réponses de la dermatite atopique 26 1.4 Stimulation in vitro d’une réponse de type dermatite atopique 27 II. Objectifs du travail 29 III. Matériels et Méthodes 31 A) Techniques de biologie cellulaire. 31 1. Culture des Kératinocytes primaires humains. 31 1.1 Souche de kératinocytes primaires humains. 31 1.2 Décongélation des kératinocytes. 31 1.3 Culture des kératinocytes. 31 2. Modèle d’épiderme reconstruit 33 2.1 Traitement des épidermes reconstruits. 34 3. Etude de la fonction barrière des épidermes reconstruits : mesure de la résistance trans-épidermique (TEER) 35 B) Techniques d’histologie 36 1. Préparation des échantillons inclus en paraffine 36 2. Coloration histologique à l’Hématoxyline-Eosine 37 C) Technique de biologie moléculaire : analyse de l’expression génique 38 1. Extraction des ARN totaux 38 2. Analyse de l’intégrité des ARN totaux 39 3. Transcription inverse 41 4. Réaction de polymérisation en chaine (PCR) en temps réel 42 D) Analyses statistiques 45 IV. Résultats et discussion 47 1. Etude de la résistance électrique trans-épidermique (TEER) des épidermes reconstruits(RHE) traités avec la méthyl-β-cyclodextrine et les interleukines TH2 (IL-4, IL-13, IL-25) 47 2. Analyse histologique des RHE 48 3. Analyse de l’expression des gènes de RHE traités 50 Conclusion 55 Glossaire 57 Bibliographie 58 Annexes Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65841 Contribution au développement d’un modèle in vitro d’une peau atopique [TFE / Mémoire] / Hüda IBIS, Auteur ; Roland HUBAUX, Directeur de la recherche . - 2017. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale  StratiCell  laboratoire de culture cellulaire. Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : REMERCIEMENT PRÉSENTATION DU LIEU DE STAGE 9 INTRODUCTION GÉNÉRALE 11 I. Contexte Générale 12 A) Biologie Cutanée 12 1. La peau, structure et fonctions générales 12 2. L’hypoderme 13 3. Le derme 13 4. Jonction dermo- épidermique 14 5. L’épiderme 15 5.1 La fonction barrière de l’épiderme 17 5.2 Les mélanocytes 18 6. Le système immunitaire de la peau 18 B) Peau atopique 21 1. Dermatite atopique 21 1.1 Symptômes 21 1.1.1 Évolution de la dermatite atopique d’un point de vue histologique 22 1.2 Pathogenèse – Causes 23 1.2.1 Prédisposition génétique 24 1.2.2 Système immunitaire et la barrière cutanée 24 1.2.3 Facteurs environnementaux 26 1.3 Réponses de la dermatite atopique 26 1.4 Stimulation in vitro d’une réponse de type dermatite atopique 27 II. Objectifs du travail 29 III. Matériels et Méthodes 31 A) Techniques de biologie cellulaire. 31 1. Culture des Kératinocytes primaires humains. 31 1.1 Souche de kératinocytes primaires humains. 31 1.2 Décongélation des kératinocytes. 31 1.3 Culture des kératinocytes. 31 2. Modèle d’épiderme reconstruit 33 2.1 Traitement des épidermes reconstruits. 34 3. Etude de la fonction barrière des épidermes reconstruits : mesure de la résistance trans-épidermique (TEER) 35 B) Techniques d’histologie 36 1. Préparation des échantillons inclus en paraffine 36 2. Coloration histologique à l’Hématoxyline-Eosine 37 C) Technique de biologie moléculaire : analyse de l’expression génique 38 1. Extraction des ARN totaux 38 2. Analyse de l’intégrité des ARN totaux 39 3. Transcription inverse 41 4. Réaction de polymérisation en chaine (PCR) en temps réel 42 D) Analyses statistiques 45 IV. Résultats et discussion 47 1. Etude de la résistance électrique trans-épidermique (TEER) des épidermes reconstruits(RHE) traités avec la méthyl-β-cyclodextrine et les interleukines TH2 (IL-4, IL-13, IL-25) 47 2. Analyse histologique des RHE 48 3. Analyse de l’expression des gènes de RHE traités 50 Conclusion 55 Glossaire 57 Bibliographie 58 Annexes Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65841

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