Anticoagulants directs oraux : actualités pour les biologistes / François Mullier in Annales de Biologie Clinique, 73/3 (Mai-Juin 2015)

Public ISBD [article]  inAnnales de Biologie Clinique > 73/3 (Mai-Juin 2015) . - 333-344 Titre : Anticoagulants directs oraux : actualités pour les biologistes Type de document : texte imprimé Auteurs : François Mullier, Auteur ; Jonathan Douxfils, Auteur ; Anne Tamigniau, Auteur Année de publication : 2015 Article en page(s) : 333-344 Langues : Français (fre) Mots-clés : monitoring  tests de coagulation  NOAC  anticoagulant  dabigatran  rivaroxaban  apixaban Résumé : Plusieurs anticoagulants oraux directs (Non-VKA oral anticoagulants, NOAC) sont maintenant largement utilisés dans la prévention et le traitement de la maladie thromboembolique. Contrairement aux antagonistes de la vitamine K, les NOAC possèdent une pharmacocinétique et une pharmacodynamique prédictibles. C’est pourquoi ils sont administrés le plus souvent à dose fixe sans suivi biologique en routine. Cependant, pour certaines sous-populations ou circonstances cliniques, la mesure de l’exposition au médicament peut être utile : suspicion de surdosage, patients présentant un événement hémorragique ou thrombotique en cours de traitement, patients en insuffisance rénale, ou encore patients nécessitant une chirurgie ou un geste invasif en urgence. Cet article fournit des lignes de conduite pratiques et résume l’influence des NOAC sur les tests classiques de coagulation. Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=66394 [article] Anticoagulants directs oraux : actualités pour les biologistes [texte imprimé] / François Mullier, Auteur ; Jonathan Douxfils, Auteur ; Anne Tamigniau, Auteur . - 2015 . - 333-344. Langues : Français (fre) in Annales de Biologie Clinique > 73/3 (Mai-Juin 2015) . - 333-344 Mots-clés : monitoring  tests de coagulation  NOAC  anticoagulant  dabigatran  rivaroxaban  apixaban Résumé : Plusieurs anticoagulants oraux directs (Non-VKA oral anticoagulants, NOAC) sont maintenant largement utilisés dans la prévention et le traitement de la maladie thromboembolique. Contrairement aux antagonistes de la vitamine K, les NOAC possèdent une pharmacocinétique et une pharmacodynamique prédictibles. C’est pourquoi ils sont administrés le plus souvent à dose fixe sans suivi biologique en routine. Cependant, pour certaines sous-populations ou circonstances cliniques, la mesure de l’exposition au médicament peut être utile : suspicion de surdosage, patients présentant un événement hémorragique ou thrombotique en cours de traitement, patients en insuffisance rénale, ou encore patients nécessitant une chirurgie ou un geste invasif en urgence. Cet article fournit des lignes de conduite pratiques et résume l’influence des NOAC sur les tests classiques de coagulation. Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=66394

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Comparaison et validation de méthodes de mesure du temps de fibrinolyse sur Lysis Timer® / Alexandre Petit

Public ISBD Titre : Comparaison et validation de méthodes de mesure du temps de fibrinolyse sur Lysis Timer® Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Alexandre Petit, Auteur ; François Mullier, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2020 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Ce travail concerne la comparaison de la mesure du temps de fibrinolyse entre la méthode de référence actuelle qu’est le temps de lyse des euglobulines et une nouvelle méthode, la capacité globale fibrinolytique. La fibrinolyse est une partie intégrante du processus d’hémostase qui permet la cicatrisation d’un vaisseau sanguin. Pour déterminer cette fibrinolyse, le temps de lyse du caillot est mesuré et son diagnostic permet d’évaluer les risques thrombotiques ou hémorragiques du patient lors d’une lésion vasculaire. Les méthodes de mesure du temps de lyse, pour arriver à ce diagnostic, sont variées mais elles reposent toujours sur un même principe général : la spectrophotométrie. Après cela, les méthodes diffèrent dans le traitement de l’échantillon, la conservation de celui-ci et les conditions de mesure. L’objectif principal de ce travail est la détermination des influences et l’observation des différences de résultats entre deux méthodes de mesure du temps de fibrinolyse. L’une étant une référence au sein d’un laboratoire et l’autre étant en cours de développement et d’évaluation. Par conséquent, cette dernière est-elle vraiment aussi précise et fiable que la méthode actuelle? Les diagnostiques obtenus sont-ils identiques? Quelles sont les limites de cette nouvelle méthode? La méthode de référence pourrait bientôt être remplacée par la nouvelle génération… Note de contenu : Table des matières Remerciements Présentation du lieu de stage Introduction Partie théorique .............................................................................................................................. 11 1. L’hémostase ........................................................................................................................... 11 1.1 Physiologie ......................................................................................................................... 11 1.2 Mécanisme général ............................................................................................................. 12 1.3 Hémostase primaire ............................................................................................................ 12 1.4 Coagulation in vitro ............................................................................................................ 14 1.5 Coagulation in vivo ............................................................................................................ 17 2. La fibrinolyse ......................................................................................................................... 18 2.1 Physiologie ......................................................................................................................... 18 2.2 Activation et inhibition ....................................................................................................... 19 2.3 Troubles et risques .............................................................................................................. 20 2.4 Traitement ........................................................................................................................... 24 3. Exploration de la fibrinolyse .................................................................................................. 25 3.1 Temps de lyse des euglobulines plasmatiques ................................................................... 25 3.2 Les tests spécifiques ........................................................................................................... 26 3.3 Les tests indirects ............................................................................................................... 26 4. Conditions de prélèvement ..................................................................................................... 26 5. Causes d’erreurs spécifiques .................................................................................................. 28 5.1 Erreurs de l’opérateur ......................................................................................................... 28 5.2 Erreurs d’appareillage et de réactifs ................................................................................... 28 6. Vérification analytique ........................................................................................................... 29 6.1 Spécificité ........................................................................................................................... 29 6.2 Précision ............................................................................................................................. 29 6.3 Comparaison de méthodes .................................................................................................. 30 6.4 La spectrophotométrie ........................................................................................................ 30 6.5 Principe d’analyse du Lysis Timer (Hyphen BioMed®) .................................................... 31 6.6 Méthode de référence ......................................................................................................... 33 7. Objectif ................................................................................................................................... 33 Partie pratique ................................................................................................................................ 34 1. Matériels et réactifs ................................................................................................................ 34 2. Méthodes ................................................................................................................................ 35 2.1 Temps de lyse des euglobulines ......................................................................................... 35 2.2 Capacité globale fibrinolytique .......................................................................................... 36 3. Test de répétabilité ................................................................................................................. 37 4. Test de reproductibilité........................................................................................................... 37 5. Comparaison de méthodes ..................................................................................................... 39 6. Influence de paramètres sur la fibrinolyse ............................................................................. 40 6.1 Prélèvement sur glace ......................................................................................................... 40 6.2 Influence de la congélation des échantillons ...................................................................... 41 6.3 Influence du délai d’analyse ............................................................................................... 42 Conclusion Bibliographie Annexes Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89122 Comparaison et validation de méthodes de mesure du temps de fibrinolyse sur Lysis Timer® [TFE / Mémoire] / Alexandre Petit, Auteur ; François Mullier, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2020. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Ce travail concerne la comparaison de la mesure du temps de fibrinolyse entre la méthode de référence actuelle qu’est le temps de lyse des euglobulines et une nouvelle méthode, la capacité globale fibrinolytique. La fibrinolyse est une partie intégrante du processus d’hémostase qui permet la cicatrisation d’un vaisseau sanguin. Pour déterminer cette fibrinolyse, le temps de lyse du caillot est mesuré et son diagnostic permet d’évaluer les risques thrombotiques ou hémorragiques du patient lors d’une lésion vasculaire. Les méthodes de mesure du temps de lyse, pour arriver à ce diagnostic, sont variées mais elles reposent toujours sur un même principe général : la spectrophotométrie. Après cela, les méthodes diffèrent dans le traitement de l’échantillon, la conservation de celui-ci et les conditions de mesure. L’objectif principal de ce travail est la détermination des influences et l’observation des différences de résultats entre deux méthodes de mesure du temps de fibrinolyse. L’une étant une référence au sein d’un laboratoire et l’autre étant en cours de développement et d’évaluation. Par conséquent, cette dernière est-elle vraiment aussi précise et fiable que la méthode actuelle? Les diagnostiques obtenus sont-ils identiques? Quelles sont les limites de cette nouvelle méthode? La méthode de référence pourrait bientôt être remplacée par la nouvelle génération… Note de contenu : Table des matières Remerciements Présentation du lieu de stage Introduction Partie théorique .............................................................................................................................. 11 1. L’hémostase ........................................................................................................................... 11 1.1 Physiologie ......................................................................................................................... 11 1.2 Mécanisme général ............................................................................................................. 12 1.3 Hémostase primaire ............................................................................................................ 12 1.4 Coagulation in vitro ............................................................................................................ 14 1.5 Coagulation in vivo ............................................................................................................ 17 2. La fibrinolyse ......................................................................................................................... 18 2.1 Physiologie ......................................................................................................................... 18 2.2 Activation et inhibition ....................................................................................................... 19 2.3 Troubles et risques .............................................................................................................. 20 2.4 Traitement ........................................................................................................................... 24 3. Exploration de la fibrinolyse .................................................................................................. 25 3.1 Temps de lyse des euglobulines plasmatiques ................................................................... 25 3.2 Les tests spécifiques ........................................................................................................... 26 3.3 Les tests indirects ............................................................................................................... 26 4. Conditions de prélèvement ..................................................................................................... 26 5. Causes d’erreurs spécifiques .................................................................................................. 28 5.1 Erreurs de l’opérateur ......................................................................................................... 28 5.2 Erreurs d’appareillage et de réactifs ................................................................................... 28 6. Vérification analytique ........................................................................................................... 29 6.1 Spécificité ........................................................................................................................... 29 6.2 Précision ............................................................................................................................. 29 6.3 Comparaison de méthodes .................................................................................................. 30 6.4 La spectrophotométrie ........................................................................................................ 30 6.5 Principe d’analyse du Lysis Timer (Hyphen BioMed®) .................................................... 31 6.6 Méthode de référence ......................................................................................................... 33 7. Objectif ................................................................................................................................... 33 Partie pratique ................................................................................................................................ 34 1. Matériels et réactifs ................................................................................................................ 34 2. Méthodes ................................................................................................................................ 35 2.1 Temps de lyse des euglobulines ......................................................................................... 35 2.2 Capacité globale fibrinolytique .......................................................................................... 36 3. Test de répétabilité ................................................................................................................. 37 4. Test de reproductibilité........................................................................................................... 37 5. Comparaison de méthodes ..................................................................................................... 39 6. Influence de paramètres sur la fibrinolyse ............................................................................. 40 6.1 Prélèvement sur glace ......................................................................................................... 40 6.2 Influence de la congélation des échantillons ...................................................................... 41 6.3 Influence du délai d’analyse ............................................................................................... 42 Conclusion Bibliographie Annexes Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89122

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Étude comparative de lots de plasma normal (NPP) utilisé dans la recherche d’un anticoagulant lupique lors de l’étape de mélange et de confirmation / Lucas Lowie

Public ISBD Titre : Étude comparative de lots de plasma normal (NPP) utilisé dans la recherche d’un anticoagulant lupique lors de l’étape de mélange et de confirmation Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Lucas Lowie ; François Mullier, Promoteur du mémoire Editeur : Montignies-sur-Sambre : Haute Ecole Louvain en Hainaut Année de publication : 2023 Importance : 82p. Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur . Langues : Français (fre) Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Contexte : En 2022, Julien Cabot démontra d’importantes variations de valeurs de références de Normal Pool Plasma (NPP) selon le lot utilisé. Celui-ci est utilisé lors de la recherche d’anticoagulant lupique (AL), critère pour le diagnostic d’un syndrome des antiphospholipides. Ces variations impactent les interprétations des résultats des différents tests, obligeant alors le laboratoire, à chaque changement de lot, à recalculer ces différentes valeurs. C’est onéreux et chronophage. Le laboratoire de Mont-Godinne souhaite tester des lots de NPP de la firme Technoclone afin d’en observer les variations, ainsi que vérifier la régularité d’un kit de réactif selon le lot d’un des tests présents dans la recherche d’AL. Objectif : Ce travail se divise en trois objectifs. Premièrement, deux lots de NPP vont être soumis à une validation en testant leurs répétabilité et reproductibilité. Avec ces résultats, les deux lots seront comparés afin d’en observer les variations. Ensuite, le deuxième objectif sera d’évaluer la capacité de correction de temps de coagulation de trois NPP différents (deux de la firme Technoclone et un de Precision BioLogic). Enfin, le dernier objectif est de déterminer s’il est nécessaire de recalculer les valeurs de références pour le Staclot LA, test de confirmation de la voie TCAse, suite à un changement de lot de kit qui utilise du NPP dans sa méthode. Méthode : Pour la répétabilité, 30 répétitions ont été réalisées sur un même échantillon par l’automate StaR Max2 sur différents tests utilisés pour la recherche de l’AL. Les tests sont : un TCAse sur NPP et mélange, un dRVVT screen sur NPP et mélange et dRVVT confirm sur NPP. La reproductibilité a été faite sur 10 répétitions à raison de deux tests répartis sur cinq jours. La validation se fera sur deux lots. Afin d’évaluer les capacités de correction des trois NPP, ceux-ci ont été mélangés avec des plasmas de patients révélés positifs au screening. Un TCAse ou un dRVVT screen a ensuite été réalisé sur le StaR Max2. Huit échantillons ont pu être utilisés. A l’aide de 40 échantillons sains, les valeurs de références ont été calculées à l’aide d’un autre kit de réactif de Staclot LA que celui ayant permis de calculer les valeurs de références utilisées en ce moment. Les tests étaient effectués manuellement. Résultats : Il ressort des résultats que la répétabilité et la reproductibilité sont inférieures à celles fournies par la firme ou les articles de références. La comparaison des différents tests réalisés sur les deux lots montre des différences significatives statistiquement mais n’ayant pas d’un impact sur les diagnostics. Pour ce qui est des capacités de correction, il y a des variations pour certains indices utilisés mais sont similaires pour d’autres entre les deux lots de la même firme et différents entre les deux firmes. Les indices recommandés pour les interprétations sont quant à eux identiques pour les lots d’une même firme. Enfin, il n’est pas possible de démontrer de différences statistiques entre les deux valeurs de références calculées avec deux lots de kit de Staclot LA différents. Conclusion : Les deux lots de NPP testés sont validés. Il est nécessaire de continuer les expérimentations afin de déterminer si les variations analytiques ont un impact clinique pour le diagnostic du patient mais aussi de réaliser les tests sur plus de lots. Les variations de capacités de correction sont effacées lors de l’utilisation de ratio normalisé pour les NPP d’une même firme, faisant penser qu’il ne serait pas nécessaire de recalculer les valeurs de références entre ces deux lots. Pour généraliser cela, il serait nécessaire de continuer les tests sur plus d’échantillons et plus de lots. Enfin il n’est pas nécessaire de recalculer les valeurs de références lors d’un changement de lots de Staclot LA. Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=114752 Étude comparative de lots de plasma normal (NPP) utilisé dans la recherche d’un anticoagulant lupique lors de l’étape de mélange et de confirmation [TFE / Mémoire] / Lucas Lowie ; François Mullier, Promoteur du mémoire . - Montignies-sur-Sambre : Haute Ecole Louvain en Hainaut, 2023 . - 82p. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur . Langues : Français (fre) Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Contexte : En 2022, Julien Cabot démontra d’importantes variations de valeurs de références de Normal Pool Plasma (NPP) selon le lot utilisé. Celui-ci est utilisé lors de la recherche d’anticoagulant lupique (AL), critère pour le diagnostic d’un syndrome des antiphospholipides. Ces variations impactent les interprétations des résultats des différents tests, obligeant alors le laboratoire, à chaque changement de lot, à recalculer ces différentes valeurs. C’est onéreux et chronophage. Le laboratoire de Mont-Godinne souhaite tester des lots de NPP de la firme Technoclone afin d’en observer les variations, ainsi que vérifier la régularité d’un kit de réactif selon le lot d’un des tests présents dans la recherche d’AL. Objectif : Ce travail se divise en trois objectifs. Premièrement, deux lots de NPP vont être soumis à une validation en testant leurs répétabilité et reproductibilité. Avec ces résultats, les deux lots seront comparés afin d’en observer les variations. Ensuite, le deuxième objectif sera d’évaluer la capacité de correction de temps de coagulation de trois NPP différents (deux de la firme Technoclone et un de Precision BioLogic). Enfin, le dernier objectif est de déterminer s’il est nécessaire de recalculer les valeurs de références pour le Staclot LA, test de confirmation de la voie TCAse, suite à un changement de lot de kit qui utilise du NPP dans sa méthode. Méthode : Pour la répétabilité, 30 répétitions ont été réalisées sur un même échantillon par l’automate StaR Max2 sur différents tests utilisés pour la recherche de l’AL. Les tests sont : un TCAse sur NPP et mélange, un dRVVT screen sur NPP et mélange et dRVVT confirm sur NPP. La reproductibilité a été faite sur 10 répétitions à raison de deux tests répartis sur cinq jours. La validation se fera sur deux lots. Afin d’évaluer les capacités de correction des trois NPP, ceux-ci ont été mélangés avec des plasmas de patients révélés positifs au screening. Un TCAse ou un dRVVT screen a ensuite été réalisé sur le StaR Max2. Huit échantillons ont pu être utilisés. A l’aide de 40 échantillons sains, les valeurs de références ont été calculées à l’aide d’un autre kit de réactif de Staclot LA que celui ayant permis de calculer les valeurs de références utilisées en ce moment. Les tests étaient effectués manuellement. Résultats : Il ressort des résultats que la répétabilité et la reproductibilité sont inférieures à celles fournies par la firme ou les articles de références. La comparaison des différents tests réalisés sur les deux lots montre des différences significatives statistiquement mais n’ayant pas d’un impact sur les diagnostics. Pour ce qui est des capacités de correction, il y a des variations pour certains indices utilisés mais sont similaires pour d’autres entre les deux lots de la même firme et différents entre les deux firmes. Les indices recommandés pour les interprétations sont quant à eux identiques pour les lots d’une même firme. Enfin, il n’est pas possible de démontrer de différences statistiques entre les deux valeurs de références calculées avec deux lots de kit de Staclot LA différents. Conclusion : Les deux lots de NPP testés sont validés. Il est nécessaire de continuer les expérimentations afin de déterminer si les variations analytiques ont un impact clinique pour le diagnostic du patient mais aussi de réaliser les tests sur plus de lots. Les variations de capacités de correction sont effacées lors de l’utilisation de ratio normalisé pour les NPP d’une même firme, faisant penser qu’il ne serait pas nécessaire de recalculer les valeurs de références entre ces deux lots. Pour généraliser cela, il serait nécessaire de continuer les tests sur plus d’échantillons et plus de lots. Enfin il n’est pas nécessaire de recalculer les valeurs de références lors d’un changement de lots de Staclot LA. Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=114752

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Évaluation de la morphologie érythrocytaire avec le RBC Advanced / Rhita Bennis in Annales de Biologie Clinique, Vol.81 N°5 (Septembre-octobre 2023)

Public ISBD [article]  inAnnales de Biologie Clinique > Vol.81 N°5 (Septembre-octobre 2023) . - p. 499-509 Titre : Évaluation de la morphologie érythrocytaire avec le RBC Advanced : quels seuils pour quelles anomalies ? Type de document : texte imprimé Auteurs : Rhita Bennis ; François Mullier ; Pascala Saussoy Année de publication : 2023 Article en page(s) : p. 499-509 Note générale : https://doi.org/10.1684/abc.2023.1837 Langues : Français (fre) Mots-clés : anomalies morphologiques érythrocytaires  module RBC Advanced  Biologie clinique  Cellavision DM9600  gradation  morphologie des globules rouges  hématologie  standardisation Résumé : La reconnaissance des anomalies morphologiques érythrocytaires est un élément clé et parfois méconnu, pouvant orienter le diagnostic étiologique des anémies. Le but de cet article est d’évaluer la performance clinique des différents seuils de détection étudiés par notre laboratoire à l’aide du module CellaVision® RBC Advanced, après reclassification manuelle par des opérateurs expérimentés, en les comparant aux recommandations émises par l’ICSH (International Council for Standardization in Haematology). Nous avons établi arbitrairement des seuils à 1 % pour les anomalies « critiques » (dacryocytes, cellules cibles, schizocytes et sphérocytes) sauf pour les drépanocytes (seuil fixé à 0,01 %). Nos données montrent une excellente sensibilité de 100 % pour les cut-offs définis par l’étude pour les dacryocytes et les drépanocytes, mais une faible spécificité pour la détection des pathologies cliniques associées en comparaison avec les seuils de l’ICSH, allant de 4 % pour les dacryocytes (détection de myélofibrose), 26 % pour les cellules cibles (détection de carence martiale), jusqu’à 55 % pour les schizocytes (présence d’anémie hémolytique). Nos résultats montrent une meilleure spécificité des seuils établis par l’ICSH comparativement aux seuils étudiés pour la détection des pathologies d’intérêt, suggérant une meilleure pertinence clinique des résultats rendus. Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=115537 [article] Évaluation de la morphologie érythrocytaire avec le RBC Advanced : quels seuils pour quelles anomalies ? [texte imprimé] / Rhita Bennis ; François Mullier ; Pascala Saussoy . - 2023 . - p. 499-509. https://doi.org/10.1684/abc.2023.1837 Langues : Français (fre) in Annales de Biologie Clinique > Vol.81 N°5 (Septembre-octobre 2023) . - p. 499-509 Mots-clés : anomalies morphologiques érythrocytaires  module RBC Advanced  Biologie clinique  Cellavision DM9600  gradation  morphologie des globules rouges  hématologie  standardisation Résumé : La reconnaissance des anomalies morphologiques érythrocytaires est un élément clé et parfois méconnu, pouvant orienter le diagnostic étiologique des anémies. Le but de cet article est d’évaluer la performance clinique des différents seuils de détection étudiés par notre laboratoire à l’aide du module CellaVision® RBC Advanced, après reclassification manuelle par des opérateurs expérimentés, en les comparant aux recommandations émises par l’ICSH (International Council for Standardization in Haematology). Nous avons établi arbitrairement des seuils à 1 % pour les anomalies « critiques » (dacryocytes, cellules cibles, schizocytes et sphérocytes) sauf pour les drépanocytes (seuil fixé à 0,01 %). Nos données montrent une excellente sensibilité de 100 % pour les cut-offs définis par l’étude pour les dacryocytes et les drépanocytes, mais une faible spécificité pour la détection des pathologies cliniques associées en comparaison avec les seuils de l’ICSH, allant de 4 % pour les dacryocytes (détection de myélofibrose), 26 % pour les cellules cibles (détection de carence martiale), jusqu’à 55 % pour les schizocytes (présence d’anémie hémolytique). Nos résultats montrent une meilleure spécificité des seuils établis par l’ICSH comparativement aux seuils étudiés pour la détection des pathologies d’intérêt, suggérant une meilleure pertinence clinique des résultats rendus. Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=115537

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Validation du test à la mépacrine sur FACS lyric / Vincent Cauchie

Public ISBD Titre : Validation du test à la mépacrine sur FACS lyric Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Vincent Cauchie, Auteur ; François Mullier, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2020 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’analyse scientifique a de plus en plus souvent besoin de tests rapides et fiables pour diagnostiquer des patients tout en évitant un coût financier trop important. L’analyse cytométrique couplée à la fluorescence permet de réunir ces avantages, malgré le coût élevé des réactifs. Ce travail traitera du test à la mépacrine sur un cytomètre en flux, le FACS Lyric. Il y sera abordé divers points essentiels, en commençant par la présentation générale de l’automate, de ses fonctions et applications, mais également une étude approfondie du test à la mépacrine. Une partie théorique viendra compléter l’application pratique de notre analyse : principes de validation d’une méthode et des différents paramètres explorés, répétabilité et établissement des valeurs de référence. Ce travail permettra de suivre l’évolution de la démarche scientifique mise en place pour valider le protocole préétabli du test à la mépacrine, et de le rendre réalisable à plus grande échelle. Note de contenu : Table des matières 1. Présentation du lieu de stage ........................................................................................................ 8 Introduction générale ........................................................................................................................ 9 2. Partie théorique ........................................................................................................................... 11 Chapitre 1 : Le FACS Lyric ............................................................................................................ 11 1.1. La cytométrie en flux ........................................................................................................ 11 1.2. La fluorescence ................................................................................................................. 13 1.2.1. Les colorants fluorescents ........................................................................................ 13 1.2.2. L’immunofluorescence ............................................................................................. 13 1.3. Présentation du cytomètre en flux « FACS Lyric » ........................................................... 15 Chapitre 2 : Test à la mépacrine .................................................................................................. 16 2.1. L’hémostase primaire et le rôle des plaquettes ............................................................... 16 2.1.1. Les 3 phases de l’hémostase .................................................................................... 16 2.1.2. Origine des plaquettes sanguines ............................................................................ 16 2.1.3. L’hémostase primaire ............................................................................................... 18 2.2. Les thrombopathies constitutionnelles ............................................................................ 18 2.2.1. Pathologies des récepteurs des agonistes solubles ................................................. 19 2.2.2. Altérations des voies de signalisation plaquettaire ................................................. 19 2.2.3. Pathologies sécrétoires ............................................................................................ 20 2.2.4. Pathologies des récepteurs glycoprotéiques des protéines adhésives .................... 20 2.2.5. Anomalies des phospholipides membranaires plaquettaires .................................. 21 2.3. Les anomalies de sécrétion et leur exploration ............................................................... 21 2.3.1. Granules denses ....................................................................................................... 22 2.3.1.1. Formation des granules denses .......................................................................... 22 2.3.1.2. Défaut des granules denses ................................................................................ 23 2.4. La mépacrine et principes généraux du test .................................................................... 24 2.4.1. Le test à la mépacrine .............................................................................................. 24 2.4.1.1. Pré-analytique .................................................................................................... 24 2.4.1.2. Analytique........................................................................................................... 25 2.4.1.3. Remarques .......................................................................................................... 26 2.4.2. Etablissement de valeurs de référence sur automate .............................................. 27 2.4.3. Validation d’un test et modification de paramètres ................................................ 28 2.4.4. Répétabilité .............................................................................................................. 28 7 3. Partie pratique ............................................................................................................................. 29 Chapitre 1 : Test à la mépacrine .................................................................................................. 29 Chapitre 2 : Validation du test à la mépacrine ............................................................................ 30 2.1. Activation au TRAP : avant et après addition de mépacrine ............................................ 31 2.2. Réévaluation des différentes concentrations en mépacrine (Lyric 1) ............................. 32 2.3. Stabilité de l’attente devant le cytomètre ....................................................................... 34 2.4. Stabilité échantillon sur 2 jours : H0, H1, H2, H4, H6, H24 .............................................. 35 2.5. Etude de la stabilité de la mépacrine en fonction du temps (Lyric 1) .............................. 35 2.5.1. Stabilité de la solution stock sur 1 mois ................................................................... 36 2.5.2. Stabilité de la solution mère sur 5 jours ................................................................... 37 2.5.3. Stabilité de la solution fille sur 5 jours ..................................................................... 37 2.6. Répétabilité et reproductibilité ........................................................................................ 39 2.7. Calcul du biais entre les 2 cytomètres .............................................................................. 40 Chapitre 3 : Etablissement des valeurs de référence .................................................................. 42 4. Conclusion générale et perspectives ........................................................................................... 44 5. Glossaire ...................................................................................................................................... 45 6. Bibliographie ................................................................................................................................ 47 7. Annexes ....................................................................................................................................... 50 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89149 Validation du test à la mépacrine sur FACS lyric [TFE / Mémoire] / Vincent Cauchie, Auteur ; François Mullier, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2020. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’analyse scientifique a de plus en plus souvent besoin de tests rapides et fiables pour diagnostiquer des patients tout en évitant un coût financier trop important. L’analyse cytométrique couplée à la fluorescence permet de réunir ces avantages, malgré le coût élevé des réactifs. Ce travail traitera du test à la mépacrine sur un cytomètre en flux, le FACS Lyric. Il y sera abordé divers points essentiels, en commençant par la présentation générale de l’automate, de ses fonctions et applications, mais également une étude approfondie du test à la mépacrine. Une partie théorique viendra compléter l’application pratique de notre analyse : principes de validation d’une méthode et des différents paramètres explorés, répétabilité et établissement des valeurs de référence. Ce travail permettra de suivre l’évolution de la démarche scientifique mise en place pour valider le protocole préétabli du test à la mépacrine, et de le rendre réalisable à plus grande échelle. Note de contenu : Table des matières 1. Présentation du lieu de stage ........................................................................................................ 8 Introduction générale ........................................................................................................................ 9 2. Partie théorique ........................................................................................................................... 11 Chapitre 1 : Le FACS Lyric ............................................................................................................ 11 1.1. La cytométrie en flux ........................................................................................................ 11 1.2. La fluorescence ................................................................................................................. 13 1.2.1. Les colorants fluorescents ........................................................................................ 13 1.2.2. L’immunofluorescence ............................................................................................. 13 1.3. Présentation du cytomètre en flux « FACS Lyric » ........................................................... 15 Chapitre 2 : Test à la mépacrine .................................................................................................. 16 2.1. L’hémostase primaire et le rôle des plaquettes ............................................................... 16 2.1.1. Les 3 phases de l’hémostase .................................................................................... 16 2.1.2. Origine des plaquettes sanguines ............................................................................ 16 2.1.3. L’hémostase primaire ............................................................................................... 18 2.2. Les thrombopathies constitutionnelles ............................................................................ 18 2.2.1. Pathologies des récepteurs des agonistes solubles ................................................. 19 2.2.2. Altérations des voies de signalisation plaquettaire ................................................. 19 2.2.3. Pathologies sécrétoires ............................................................................................ 20 2.2.4. Pathologies des récepteurs glycoprotéiques des protéines adhésives .................... 20 2.2.5. Anomalies des phospholipides membranaires plaquettaires .................................. 21 2.3. Les anomalies de sécrétion et leur exploration ............................................................... 21 2.3.1. Granules denses ....................................................................................................... 22 2.3.1.1. Formation des granules denses .......................................................................... 22 2.3.1.2. Défaut des granules denses ................................................................................ 23 2.4. La mépacrine et principes généraux du test .................................................................... 24 2.4.1. Le test à la mépacrine .............................................................................................. 24 2.4.1.1. Pré-analytique .................................................................................................... 24 2.4.1.2. Analytique........................................................................................................... 25 2.4.1.3. Remarques .......................................................................................................... 26 2.4.2. Etablissement de valeurs de référence sur automate .............................................. 27 2.4.3. Validation d’un test et modification de paramètres ................................................ 28 2.4.4. Répétabilité .............................................................................................................. 28 7 3. Partie pratique ............................................................................................................................. 29 Chapitre 1 : Test à la mépacrine .................................................................................................. 29 Chapitre 2 : Validation du test à la mépacrine ............................................................................ 30 2.1. Activation au TRAP : avant et après addition de mépacrine ............................................ 31 2.2. Réévaluation des différentes concentrations en mépacrine (Lyric 1) ............................. 32 2.3. Stabilité de l’attente devant le cytomètre ....................................................................... 34 2.4. Stabilité échantillon sur 2 jours : H0, H1, H2, H4, H6, H24 .............................................. 35 2.5. Etude de la stabilité de la mépacrine en fonction du temps (Lyric 1) .............................. 35 2.5.1. Stabilité de la solution stock sur 1 mois ................................................................... 36 2.5.2. Stabilité de la solution mère sur 5 jours ................................................................... 37 2.5.3. Stabilité de la solution fille sur 5 jours ..................................................................... 37 2.6. Répétabilité et reproductibilité ........................................................................................ 39 2.7. Calcul du biais entre les 2 cytomètres .............................................................................. 40 Chapitre 3 : Etablissement des valeurs de référence .................................................................. 42 4. Conclusion générale et perspectives ........................................................................................... 44 5. Glossaire ...................................................................................................................................... 45 6. Bibliographie ................................................................................................................................ 47 7. Annexes ....................................................................................................................................... 50 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89149

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