COMPARAISON DE METHODES DE DOSAGES SEROLOGIQUES (ELISA, FIXATION DU COMPLEMENT, TECHNIQUES AUTOMATISEES) POUR LA DETECTION DE LA ROUGEOLE, DES OREILLONS ET DE CHLAMYDIA PNEUMONIAE / MARIE VAN DEN BERGHE

Public ISBD Titre : COMPARAISON DE METHODES DE DOSAGES SEROLOGIQUES (ELISA, FIXATION DU COMPLEMENT, TECHNIQUES AUTOMATISEES) POUR LA DETECTION DE LA ROUGEOLE, DES OREILLONS ET DE CHLAMYDIA PNEUMONIAE Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : MARIE VAN DEN BERGHE, Auteur ; Alexandre Athanasopoulos, Directeur de la recherche ; Vincenzo Farniella, Directeur de la recherche Année de publication : 2015 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale  hôpital marie Curie  Dosages sérologiques  rougeole  oreillons  Chlamydia pneumoniae  hôpital Marie curie  Immunologie Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Trois méthodes d’analyses (ELISA ; CLIA ; fixation du complément) ont été testées pour la détection d’anticorps anti-virus de la rougeole et des oreillons. La technique de fixation du complément est une méthode manuelle tandis que les techniques CLIA et ELISA sont des techniques automatisées respectivement sur l’automate Liaison XL et sur l’ETI-Max 3000. Quarante-trois échantillons provenant de la routine du laboratoire ont été testés. Les résultats pour ces différents échantillons étaient sensiblement identiques avec les méthodes automatisées mais nettement différents des résultats obtenus à l’aide de la technique de fixation du complément, technique peu sensible, dépassée, ayant pour but de diagnostiquer une infection active. Les kits de la firme DiaSorin seront utilisés pour la détection des anticorps anti-virus de la rougeole et des oreillons. Ces kits offrant une plus grande facilité d’utilisation et la possibilité d’une automatisation complète. De plus, un plus faible volume de sérum est nécessaire pour réaliser les analyses avec cette technique. Les kits de deux firmes différentes (Savyon ; Médac) ont été comparés pour le diagnostic sérologique d’infection à Chlamydia pneumoniae. Bien qu’une très nette différence au niveau des « titres » d’anticorps IgA et IgG a été constatée, la classification des résultats (infection active, négatif, …) est relativement semblable dans les cas plus évidents. Les kits de la firme Médac offrent néanmoins plus de souplesse et de facilité d’interprétation. C’est pourquoi, ce sont les kits de cette firme qui seront dorénavant utilisés au laboratoire de l’Hopital Civil Marie Curie. Note de contenu : Table des matières 1. Présentation du lieu de stage ______________________________________________ 7 2. Introduction générale ____________________________________________________ 8 Partie théorique ____________________________________________________________ 9 1. Notions d’immunologie __________________________________________________ 9 1.1 Système du complément ______________________________________________________ 9 2. Virus ________________________________________________________________ 11 2.1 Oreillons __________________________________________________________________ 11 2.1.1 Description ______________________________________________________________________ 11 2.1.2 Structure : _______________________________________________________________________ 12 2.1.3 Cycle de vie du virus : ______________________________________________________________ 13 2.1.4 Complications chez la femme enceinte ________________________________________________ 14 2.1.5 Diagnostic : ______________________________________________________________________ 15  Direct ________________________________________________________________________ 15  Indirect _______________________________________________________________________ 15 2.1.6 Traitement et prévention ___________________________________________________________ 16  Curatif _______________________________________________________________________ 16  Préventif (Vaccination) __________________________________________________________ 16 2.1.7 Surveillance ______________________________________________________________________ 17 2.1.8 Incidence ________________________________________________________________________ 17 2.2 Rougeole __________________________________________________________________ 18 2.2.1 Description ______________________________________________________________________ 18 2.2.2 Structure ________________________________________________________________________ 19 2.2.3 Cycle de vie du virus _______________________________________________________________ 20 2.2.4 Complication chez la femme enceinte _________________________________________________ 21 2.2.5 Méthodes de diagnostic : ___________________________________________________________ 21  Diagnostic direct _______________________________________________________________ 21  Diagnostic indirect ______________________________________________________________ 22 2.2.6 Traitement et prévention ___________________________________________________________ 23  Curatif _______________________________________________________________________ 23  Préventif _____________________________________________________________________ 23 2.2.7 Incidence ________________________________________________________________________ 24 3. Bactéries _____________________________________________________________ 25 3.1 Chlamydia _________________________________________________________________ 25 3.1.1 Structure générale ________________________________________________________________ 25 3.2 Chlamydia pneumoniae ______________________________________________________________ 26  3.2.1 Description _______________________________________________________________ 26  3.2.2 Signes cliniques : __________________________________________________________ 27  3.2.3 Cycle de vie _______________________________________________________________ 27  3.2.4 Méthodes de détection _____________________________________________________ 28 4. Objectifs et stratégie ___________________________________________________ 30 4.1 Oreillons et rougeole ________________________________________________________ 30 4.2 Chlamydia pneumoniae ______________________________________________________ 30 5. Principes _____________________________________________________________ 31 5.1 Liaison XL : _______________________________________________________________ 31  Description du système : _________________________________________________________ 32 5.2 Etimax ____________________________________________________________________ 32 Partie pratique ____________________________________________________________ 33 1. Oreillons _____________________________________________________________ 33 1.1 Matériel et méthodes _______________________________________________________ 33 1.1.1 Fixation du complément : ___________________________________________________________ 33 1.1.2 Technique CLIA sur Liaison XL _______________________________________________________ 35  Principe ______________________________________________________________________ 35  Matériel ______________________________________________________________________ 35  Protocole _____________________________________________________________________ 35  Interprétation _________________________________________________________________ 36 1.1.3 Technique ELISA sur ETI-Max ________________________________________________________ 36  Principe ______________________________________________________________________ 36  Matériel ______________________________________________________________________ 36  Protocole _____________________________________________________________________ 36  Interprétation des résultats ______________________________________________________ 36 1.2 Résultats et discussion _______________________________________________________ 37 2. Rougeole _____________________________________________________________ 40 2.1 Matériel et Méthodes _______________________________________________________ 40 2.1.1 Fixation du complément ____________________________________________________________ 40 2.1.2 Technique CLIA sue Liaison XL _______________________________________________________ 40  Principe ______________________________________________________________________ 40  Matériel ______________________________________________________________________ 41  Protocole _____________________________________________________________________ 41  Interprétation _________________________________________________________________ 41 2.1.3 Technique ELISA sur ETI-Max 3000 ___________________________________________________ 41  Principe ______________________________________________________________________ 41  Matériel ______________________________________________________________________ 41  Protocole _____________________________________________________________________ 41  Interprétation des résultats ______________________________________________________ 42 2.2 Résultats et discussion : ______________________________________________________ 42 3. Chlamydia pneumoniae _________________________________________________ 45 3.1 Matériel et méthode ________________________________________________________ 45 3.1.1 Kit Savyon _______________________________________________________________________ 45  Chlamydia pneumoniae IgA ______________________________________________________ 45  Chlamydia pneumoniae IgG ______________________________________________________ 46 3.1.2 Interprétation globale des résultats kits Savyon _________________________________________ 46 3.1.3 Kit Médac _______________________________________________________________________ 47  Chlamydia pneumonieae IgG-ELISA plus ____________________________________________ 47  Chlamydien IgA-rELISA __________________________________________________________ 47  Chlamydien IgG-rELISA __________________________________________________________ 47 3.1.4 Appareillage : ____________________________________________________________________ 48 Méthode globale : ______________________________________________________________ 48 3.1.5 Interprétation globale des résultats kits Médac _________________________________________ 48 3.2 Résultats et discussion _______________________________________________________ 50 Conclusions générales (et perspectives) ________________________________________ 52 Lexique TFE _______________________________________________________________ 53 Bibliographie : _____________________________________________________________ 55 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65560 COMPARAISON DE METHODES DE DOSAGES SEROLOGIQUES (ELISA, FIXATION DU COMPLEMENT, TECHNIQUES AUTOMATISEES) POUR LA DETECTION DE LA ROUGEOLE, DES OREILLONS ET DE CHLAMYDIA PNEUMONIAE [TFE / Mémoire] / MARIE VAN DEN BERGHE, Auteur ; Alexandre Athanasopoulos, Directeur de la recherche ; Vincenzo Farniella, Directeur de la recherche . - 2015. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale  hôpital marie Curie  Dosages sérologiques  rougeole  oreillons  Chlamydia pneumoniae  hôpital Marie curie  Immunologie Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Trois méthodes d’analyses (ELISA ; CLIA ; fixation du complément) ont été testées pour la détection d’anticorps anti-virus de la rougeole et des oreillons. La technique de fixation du complément est une méthode manuelle tandis que les techniques CLIA et ELISA sont des techniques automatisées respectivement sur l’automate Liaison XL et sur l’ETI-Max 3000. Quarante-trois échantillons provenant de la routine du laboratoire ont été testés. Les résultats pour ces différents échantillons étaient sensiblement identiques avec les méthodes automatisées mais nettement différents des résultats obtenus à l’aide de la technique de fixation du complément, technique peu sensible, dépassée, ayant pour but de diagnostiquer une infection active. Les kits de la firme DiaSorin seront utilisés pour la détection des anticorps anti-virus de la rougeole et des oreillons. Ces kits offrant une plus grande facilité d’utilisation et la possibilité d’une automatisation complète. De plus, un plus faible volume de sérum est nécessaire pour réaliser les analyses avec cette technique. Les kits de deux firmes différentes (Savyon ; Médac) ont été comparés pour le diagnostic sérologique d’infection à Chlamydia pneumoniae. Bien qu’une très nette différence au niveau des « titres » d’anticorps IgA et IgG a été constatée, la classification des résultats (infection active, négatif, …) est relativement semblable dans les cas plus évidents. Les kits de la firme Médac offrent néanmoins plus de souplesse et de facilité d’interprétation. C’est pourquoi, ce sont les kits de cette firme qui seront dorénavant utilisés au laboratoire de l’Hopital Civil Marie Curie. Note de contenu : Table des matières 1. Présentation du lieu de stage ______________________________________________ 7 2. Introduction générale ____________________________________________________ 8 Partie théorique ____________________________________________________________ 9 1. Notions d’immunologie __________________________________________________ 9 1.1 Système du complément ______________________________________________________ 9 2. Virus ________________________________________________________________ 11 2.1 Oreillons __________________________________________________________________ 11 2.1.1 Description ______________________________________________________________________ 11 2.1.2 Structure : _______________________________________________________________________ 12 2.1.3 Cycle de vie du virus : ______________________________________________________________ 13 2.1.4 Complications chez la femme enceinte ________________________________________________ 14 2.1.5 Diagnostic : ______________________________________________________________________ 15  Direct ________________________________________________________________________ 15  Indirect _______________________________________________________________________ 15 2.1.6 Traitement et prévention ___________________________________________________________ 16  Curatif _______________________________________________________________________ 16  Préventif (Vaccination) __________________________________________________________ 16 2.1.7 Surveillance ______________________________________________________________________ 17 2.1.8 Incidence ________________________________________________________________________ 17 2.2 Rougeole __________________________________________________________________ 18 2.2.1 Description ______________________________________________________________________ 18 2.2.2 Structure ________________________________________________________________________ 19 2.2.3 Cycle de vie du virus _______________________________________________________________ 20 2.2.4 Complication chez la femme enceinte _________________________________________________ 21 2.2.5 Méthodes de diagnostic : ___________________________________________________________ 21  Diagnostic direct _______________________________________________________________ 21  Diagnostic indirect ______________________________________________________________ 22 2.2.6 Traitement et prévention ___________________________________________________________ 23  Curatif _______________________________________________________________________ 23  Préventif _____________________________________________________________________ 23 2.2.7 Incidence ________________________________________________________________________ 24 3. Bactéries _____________________________________________________________ 25 3.1 Chlamydia _________________________________________________________________ 25 3.1.1 Structure générale ________________________________________________________________ 25 3.2 Chlamydia pneumoniae ______________________________________________________________ 26  3.2.1 Description _______________________________________________________________ 26  3.2.2 Signes cliniques : __________________________________________________________ 27  3.2.3 Cycle de vie _______________________________________________________________ 27  3.2.4 Méthodes de détection _____________________________________________________ 28 4. Objectifs et stratégie ___________________________________________________ 30 4.1 Oreillons et rougeole ________________________________________________________ 30 4.2 Chlamydia pneumoniae ______________________________________________________ 30 5. Principes _____________________________________________________________ 31 5.1 Liaison XL : _______________________________________________________________ 31  Description du système : _________________________________________________________ 32 5.2 Etimax ____________________________________________________________________ 32 Partie pratique ____________________________________________________________ 33 1. Oreillons _____________________________________________________________ 33 1.1 Matériel et méthodes _______________________________________________________ 33 1.1.1 Fixation du complément : ___________________________________________________________ 33 1.1.2 Technique CLIA sur Liaison XL _______________________________________________________ 35  Principe ______________________________________________________________________ 35  Matériel ______________________________________________________________________ 35  Protocole _____________________________________________________________________ 35  Interprétation _________________________________________________________________ 36 1.1.3 Technique ELISA sur ETI-Max ________________________________________________________ 36  Principe ______________________________________________________________________ 36  Matériel ______________________________________________________________________ 36  Protocole _____________________________________________________________________ 36  Interprétation des résultats ______________________________________________________ 36 1.2 Résultats et discussion _______________________________________________________ 37 2. Rougeole _____________________________________________________________ 40 2.1 Matériel et Méthodes _______________________________________________________ 40 2.1.1 Fixation du complément ____________________________________________________________ 40 2.1.2 Technique CLIA sue Liaison XL _______________________________________________________ 40  Principe ______________________________________________________________________ 40  Matériel ______________________________________________________________________ 41  Protocole _____________________________________________________________________ 41  Interprétation _________________________________________________________________ 41 2.1.3 Technique ELISA sur ETI-Max 3000 ___________________________________________________ 41  Principe ______________________________________________________________________ 41  Matériel ______________________________________________________________________ 41  Protocole _____________________________________________________________________ 41  Interprétation des résultats ______________________________________________________ 42 2.2 Résultats et discussion : ______________________________________________________ 42 3. Chlamydia pneumoniae _________________________________________________ 45 3.1 Matériel et méthode ________________________________________________________ 45 3.1.1 Kit Savyon _______________________________________________________________________ 45  Chlamydia pneumoniae IgA ______________________________________________________ 45  Chlamydia pneumoniae IgG ______________________________________________________ 46 3.1.2 Interprétation globale des résultats kits Savyon _________________________________________ 46 3.1.3 Kit Médac _______________________________________________________________________ 47  Chlamydia pneumonieae IgG-ELISA plus ____________________________________________ 47  Chlamydien IgA-rELISA __________________________________________________________ 47  Chlamydien IgG-rELISA __________________________________________________________ 47 3.1.4 Appareillage : ____________________________________________________________________ 48 Méthode globale : ______________________________________________________________ 48 3.1.5 Interprétation globale des résultats kits Médac _________________________________________ 48 3.2 Résultats et discussion _______________________________________________________ 50 Conclusions générales (et perspectives) ________________________________________ 52 Lexique TFE _______________________________________________________________ 53 Bibliographie : _____________________________________________________________ 55 Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65560

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