[article]
| Titre : |
Mise au point et validation en portée B selon les recommandations du Cofrac d’un dosage de pyruvate et de corps cétoniques sur un automate ouvert |
| Type de document : |
texte imprimé |
| Auteurs : |
Boulet Lysiane, Auteur |
| Année de publication : |
2014 |
| Article en page(s) : |
312-320 |
| Langues : |
Français (fre) |
| Mots-clés : |
PYRUVATE 3-HYDROXYBUTYRATE ACETO-ACETATE VALIDATION DOSAGE AUTOMATISE |
| Résumé : |
Les dosages du pyruvate et des corps cétoniques (acéto-acétate et 3-hydroxybutyrate) sont essentiels à l’exploration du métabolisme intermédiaire. En effet, leurs concentrations sanguines reflètent un équilibre énergétique influencé par l’état nutritionnel et pouvant être perturbé dans certaines pathologies comme le diabète ou certaines maladies métaboliques héréditaires. Nous avons mis au point des méthodes de dosages sur l’automate ouvert de biochimie Konélab 20 XT (ThermoFischer, Whaltham USA) à partir d’échantillons sanguins déprotéinisés, avec les kits commercialisés par Sobioda (Montbonnot, France) pour le pyruvate et par Wako Chemicals GmbH (Neuss, Allemagne) pour les corps cétoniques. Nous avons validé les performances de ces trois méthodes quantitatives selon les critères de la norme NF EN ISO 15189 (portée B). Nous avons obtenu des résultats satisfaisants concernant la fidélité (CV de répétabilité et de fidélité intermédiaire respectivement inférieurs à 7 % et à 6 %), le domaine de mesure (de 7,7 à 228 μmol/L pour le pyruvate et de 22,6 à 650 μmol/L pour les corps cétoniques), l’estimation de l’incertitude de mesure (10,4 μmol/L dans les valeurs physiologiques pour le pyruvate et 7,1 μmol/L pour le 3-hydroxybutyrate) ainsi que la comparaison de méthodes (versus méthode manuelle spectrophotométrique sur Uvikon XL). L’établissement des valeurs de référence (comprises entre 35 et 74 μmol/L pour le pyruvate, inférieures à 100 μmol/L pour le 3-hydroxybutyrate et à 44 μmol/L pour l’acétoacétate) et la connaissance de la stabilité des réactifs (jusqu’à 12 semaines sous forme congelée), nous ont permis de finaliser le dossier de validation de méthode et d’inclure ces dosages à notre catalogue d’analyses. |
| Permalink : |
./index.php?lvl=notice_display&id=73879 |
in Annales de Biologie Clinique > 72/3 (mai-juin 2014) . - 312-320
[article] Mise au point et validation en portée B selon les recommandations du Cofrac d’un dosage de pyruvate et de corps cétoniques sur un automate ouvert [texte imprimé] / Boulet Lysiane, Auteur . - 2014 . - 312-320. Langues : Français ( fre) in Annales de Biologie Clinique > 72/3 (mai-juin 2014) . - 312-320
| Mots-clés : |
PYRUVATE 3-HYDROXYBUTYRATE ACETO-ACETATE VALIDATION DOSAGE AUTOMATISE |
| Résumé : |
Les dosages du pyruvate et des corps cétoniques (acéto-acétate et 3-hydroxybutyrate) sont essentiels à l’exploration du métabolisme intermédiaire. En effet, leurs concentrations sanguines reflètent un équilibre énergétique influencé par l’état nutritionnel et pouvant être perturbé dans certaines pathologies comme le diabète ou certaines maladies métaboliques héréditaires. Nous avons mis au point des méthodes de dosages sur l’automate ouvert de biochimie Konélab 20 XT (ThermoFischer, Whaltham USA) à partir d’échantillons sanguins déprotéinisés, avec les kits commercialisés par Sobioda (Montbonnot, France) pour le pyruvate et par Wako Chemicals GmbH (Neuss, Allemagne) pour les corps cétoniques. Nous avons validé les performances de ces trois méthodes quantitatives selon les critères de la norme NF EN ISO 15189 (portée B). Nous avons obtenu des résultats satisfaisants concernant la fidélité (CV de répétabilité et de fidélité intermédiaire respectivement inférieurs à 7 % et à 6 %), le domaine de mesure (de 7,7 à 228 μmol/L pour le pyruvate et de 22,6 à 650 μmol/L pour les corps cétoniques), l’estimation de l’incertitude de mesure (10,4 μmol/L dans les valeurs physiologiques pour le pyruvate et 7,1 μmol/L pour le 3-hydroxybutyrate) ainsi que la comparaison de méthodes (versus méthode manuelle spectrophotométrique sur Uvikon XL). L’établissement des valeurs de référence (comprises entre 35 et 74 μmol/L pour le pyruvate, inférieures à 100 μmol/L pour le 3-hydroxybutyrate et à 44 μmol/L pour l’acétoacétate) et la connaissance de la stabilité des réactifs (jusqu’à 12 semaines sous forme congelée), nous ont permis de finaliser le dossier de validation de méthode et d’inclure ces dosages à notre catalogue d’analyses. |
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