Centre de Documentation Campus Montignies
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| Titre : |
Évaluation de la coloration de PAS modifiée pour l’examen direct des phanères |
| Type de document : |
TFE / Mémoire |
| Auteurs : |
Emilie Lemaire ; Gaël Gilbert, Directeur de la recherche |
| Editeur : |
Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale |
| Année de publication : |
2024 |
| Note générale : |
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur |
| Langues : |
Français (fre) |
| Index. décimale : |
TFE Bio Med TFE Biologie médicale |
| Résumé : |
Depuis la découverte de leur rôle pathogène au cours du XIXe siècle, les champignons ont fréquemment été identifiés comme des agresseurs de la barrière cutanée. Afin de les mettre en évidence, de nombreuses méthodes ont vu le jour comme les examens directs par éclaircissement, avec ou sans coloration ; la mise en culture sur milieu spécifique à la culture fongique ou encore la spectrométrie de masse.
L’objectif principal de ce travail est d’évaluer l’utilisation de la coloration de PAS modifiée, selon la méthode de Hotchkiss et MacManus, pour l’examen direct des phanères en laboratoire.
Pour atteindre ce but, cette technique de coloration de PAS simplifiée a été comparée avec la coloration au CalcoFluor White afin d’en déterminer la sensibilité et la spécificité. Cette mise en parallèle a permis de démontrer la viabilité de cette méthode ainsi que la possibilité de l’appliquer en routine hospitalière. |
| Note de contenu : |
Table des matières
Remerciements
Présentation du lieu de stage ........................................................................................... 7
Introduction générale ....................................................................................................... 8
Partie théorique................................................................................................................ 9
Contexte général........................................................................................................... 9
1. Les dermatophytes ............................................................................................. 10
1.1 Un peu d’histoire ............................................................................................... 11
1.2 Classification des dermatophytes ..................................................................... 12
1.2.1 Trichophyton spp. (T. spp.) ......................................................................... 14
1.2.2 Epidermophyton spp. ................................................................................. 15
1.2.3 Microsporum spp. ...................................................................................... 16
1.3 Dermatophyties ................................................................................................. 17
1.3.1 Les teignes du cuir chevelu et folliculites .................................................. 17
1.3.2 Les atteintes de la peau glabre .................................................................. 18
1.3.3 Les onychomycoses à dermatophytes ....................................................... 19
1.3.4 Dermatophytides ....................................................................................... 20
1.3.5 Dermatoses sous cutanées et profondes .................................................. 20
2. Les moisissures d’intérêt médical ...................................................................... 21
2.1 Acremonium spp. ............................................................................................ 22
2.2 Aspergillus spp. ............................................................................................... 23
2.3 Fusarium spp................................................................................................... 24
2.4 Scopulariopsis spp........................................................................................... 25
3. Les levures .......................................................................................................... 26
Diagnostic biologique.................................................................................................. 27
1. Examen direct ................................................................................................. 28
1.1 Après éclaircissement sans coloration.......................................................... 28
1.1.1 Par le chloral-lactophénol d’Amann....................................................... 28
1.1.2 Par les alcalis caustiques ........................................................................ 29
1.2 Après éclaircissement et coloration ............................................................. 29
1.3 Après éclaircissement et révélation par un fluorochrome ........................... 30
1.4 Par coloration histopathologique ................................................................. 30
2. Examen sur milieu de culture ......................................................................... 31
2.1 Milieu d’isolement Sabouraud ..................................................................... 32
2.2 Milieux d’identification par production de pigment .................................... 32
2.3 Milieux de fructification................................................................................ 32
2.4 Milieu avec membrane ................................................................................. 33
3. Identification au Maldi-TOF ............................................................................ 33
Partie pratique ................................................................................................................ 34
Objectifs et stratégie................................................................................................... 34
Matériel et méthodes ................................................................................................. 35
1. Préparation des bains pour la coloration de Pas simplifiée selon Hotchkiss et
MacManus ............................................................................................................... 35
1.1 Réactifs ................................................................................................... 35
1.2 Matériel .................................................................................................. 35
1.3 Préparation des bains ............................................................................. 35
1.3.1 Préparation d’1L de solution aqueuse d’acide périodique à 1% .... 36
1.3.2 Préparation d’1L d’acide chlorhydrique N ...................................... 36
1.3.3 Préparation de l’eau sulfureuse ...................................................... 36
2. Poste des mycoses .......................................................................................... 37
2.1 Matériel .................................................................................................. 37
2.2 Réactifs et solutions utilisé(e)s dans les bains........................................ 37
2.3 Broyage des phanères ............................................................................ 37
2.4 Examen direct ......................................................................................... 38
2.5 Mise en culture ....................................................................................... 39
2.6 Lecture des cultures................................................................................ 39
Résultats et discussion ................................................................................................ 40
1. Comparaison des méthodes ........................................................................... 44
Conclusion ................................................................................................................... 46 |
| Permalink : |
./index.php?lvl=notice_display&id=119412 |
Évaluation de la coloration de PAS modifiée pour l’examen direct des phanères [TFE / Mémoire] / Emilie Lemaire ; Gaël Gilbert, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2024. Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français ( fre)
| Index. décimale : |
TFE Bio Med TFE Biologie médicale |
| Résumé : |
Depuis la découverte de leur rôle pathogène au cours du XIXe siècle, les champignons ont fréquemment été identifiés comme des agresseurs de la barrière cutanée. Afin de les mettre en évidence, de nombreuses méthodes ont vu le jour comme les examens directs par éclaircissement, avec ou sans coloration ; la mise en culture sur milieu spécifique à la culture fongique ou encore la spectrométrie de masse.
L’objectif principal de ce travail est d’évaluer l’utilisation de la coloration de PAS modifiée, selon la méthode de Hotchkiss et MacManus, pour l’examen direct des phanères en laboratoire.
Pour atteindre ce but, cette technique de coloration de PAS simplifiée a été comparée avec la coloration au CalcoFluor White afin d’en déterminer la sensibilité et la spécificité. Cette mise en parallèle a permis de démontrer la viabilité de cette méthode ainsi que la possibilité de l’appliquer en routine hospitalière. |
| Note de contenu : |
Table des matières
Remerciements
Présentation du lieu de stage ........................................................................................... 7
Introduction générale ....................................................................................................... 8
Partie théorique................................................................................................................ 9
Contexte général........................................................................................................... 9
1. Les dermatophytes ............................................................................................. 10
1.1 Un peu d’histoire ............................................................................................... 11
1.2 Classification des dermatophytes ..................................................................... 12
1.2.1 Trichophyton spp. (T. spp.) ......................................................................... 14
1.2.2 Epidermophyton spp. ................................................................................. 15
1.2.3 Microsporum spp. ...................................................................................... 16
1.3 Dermatophyties ................................................................................................. 17
1.3.1 Les teignes du cuir chevelu et folliculites .................................................. 17
1.3.2 Les atteintes de la peau glabre .................................................................. 18
1.3.3 Les onychomycoses à dermatophytes ....................................................... 19
1.3.4 Dermatophytides ....................................................................................... 20
1.3.5 Dermatoses sous cutanées et profondes .................................................. 20
2. Les moisissures d’intérêt médical ...................................................................... 21
2.1 Acremonium spp. ............................................................................................ 22
2.2 Aspergillus spp. ............................................................................................... 23
2.3 Fusarium spp................................................................................................... 24
2.4 Scopulariopsis spp........................................................................................... 25
3. Les levures .......................................................................................................... 26
Diagnostic biologique.................................................................................................. 27
1. Examen direct ................................................................................................. 28
1.1 Après éclaircissement sans coloration.......................................................... 28
1.1.1 Par le chloral-lactophénol d’Amann....................................................... 28
1.1.2 Par les alcalis caustiques ........................................................................ 29
1.2 Après éclaircissement et coloration ............................................................. 29
1.3 Après éclaircissement et révélation par un fluorochrome ........................... 30
1.4 Par coloration histopathologique ................................................................. 30
2. Examen sur milieu de culture ......................................................................... 31
2.1 Milieu d’isolement Sabouraud ..................................................................... 32
2.2 Milieux d’identification par production de pigment .................................... 32
2.3 Milieux de fructification................................................................................ 32
2.4 Milieu avec membrane ................................................................................. 33
3. Identification au Maldi-TOF ............................................................................ 33
Partie pratique ................................................................................................................ 34
Objectifs et stratégie................................................................................................... 34
Matériel et méthodes ................................................................................................. 35
1. Préparation des bains pour la coloration de Pas simplifiée selon Hotchkiss et
MacManus ............................................................................................................... 35
1.1 Réactifs ................................................................................................... 35
1.2 Matériel .................................................................................................. 35
1.3 Préparation des bains ............................................................................. 35
1.3.1 Préparation d’1L de solution aqueuse d’acide périodique à 1% .... 36
1.3.2 Préparation d’1L d’acide chlorhydrique N ...................................... 36
1.3.3 Préparation de l’eau sulfureuse ...................................................... 36
2. Poste des mycoses .......................................................................................... 37
2.1 Matériel .................................................................................................. 37
2.2 Réactifs et solutions utilisé(e)s dans les bains........................................ 37
2.3 Broyage des phanères ............................................................................ 37
2.4 Examen direct ......................................................................................... 38
2.5 Mise en culture ....................................................................................... 39
2.6 Lecture des cultures................................................................................ 39
Résultats et discussion ................................................................................................ 40
1. Comparaison des méthodes ........................................................................... 44
Conclusion ................................................................................................................... 46 |
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