Centre de Documentation Campus Montignies
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Validation du test à la mépacrine sur FACS lyric / Vincent Cauchie
Titre : Validation du test à la mépacrine sur FACS lyric Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Vincent Cauchie, Auteur ; François Mullier, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2020 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’analyse scientifique a de plus en plus souvent besoin de tests rapides et fiables pour diagnostiquer des patients tout en évitant un coût financier trop important. L’analyse cytométrique couplée à la fluorescence permet de réunir ces avantages, malgré le coût élevé des réactifs.
Ce travail traitera du test à la mépacrine sur un cytomètre en flux, le FACS Lyric. Il y sera abordé divers points essentiels, en commençant par la présentation générale de l’automate, de ses fonctions et applications, mais également une étude approfondie du test à la mépacrine.
Une partie théorique viendra compléter l’application pratique de notre analyse : principes de validation d’une méthode et des différents paramètres explorés, répétabilité et établissement des valeurs de référence. Ce travail permettra de suivre l’évolution de la démarche scientifique mise en place pour valider le protocole préétabli du test à la mépacrine, et de le rendre réalisable à plus grande échelle.Note de contenu : Table des matières
1. Présentation du lieu de stage ........................................................................................................ 8
Introduction générale ........................................................................................................................ 9
2. Partie théorique ........................................................................................................................... 11
Chapitre 1 : Le FACS Lyric ............................................................................................................ 11
1.1. La cytométrie en flux ........................................................................................................ 11
1.2. La fluorescence ................................................................................................................. 13
1.2.1. Les colorants fluorescents ........................................................................................ 13
1.2.2. L’immunofluorescence ............................................................................................. 13
1.3. Présentation du cytomètre en flux « FACS Lyric » ........................................................... 15
Chapitre 2 : Test à la mépacrine .................................................................................................. 16
2.1. L’hémostase primaire et le rôle des plaquettes ............................................................... 16
2.1.1. Les 3 phases de l’hémostase .................................................................................... 16
2.1.2. Origine des plaquettes sanguines ............................................................................ 16
2.1.3. L’hémostase primaire ............................................................................................... 18
2.2. Les thrombopathies constitutionnelles ............................................................................ 18
2.2.1. Pathologies des récepteurs des agonistes solubles ................................................. 19
2.2.2. Altérations des voies de signalisation plaquettaire ................................................. 19
2.2.3. Pathologies sécrétoires ............................................................................................ 20
2.2.4. Pathologies des récepteurs glycoprotéiques des protéines adhésives .................... 20
2.2.5. Anomalies des phospholipides membranaires plaquettaires .................................. 21
2.3. Les anomalies de sécrétion et leur exploration ............................................................... 21
2.3.1. Granules denses ....................................................................................................... 22
2.3.1.1. Formation des granules denses .......................................................................... 22
2.3.1.2. Défaut des granules denses ................................................................................ 23
2.4. La mépacrine et principes généraux du test .................................................................... 24
2.4.1. Le test à la mépacrine .............................................................................................. 24
2.4.1.1. Pré-analytique .................................................................................................... 24
2.4.1.2. Analytique........................................................................................................... 25
2.4.1.3. Remarques .......................................................................................................... 26
2.4.2. Etablissement de valeurs de référence sur automate .............................................. 27
2.4.3. Validation d’un test et modification de paramètres ................................................ 28
2.4.4. Répétabilité .............................................................................................................. 28
7
3. Partie pratique ............................................................................................................................. 29
Chapitre 1 : Test à la mépacrine .................................................................................................. 29
Chapitre 2 : Validation du test à la mépacrine ............................................................................ 30
2.1. Activation au TRAP : avant et après addition de mépacrine ............................................ 31
2.2. Réévaluation des différentes concentrations en mépacrine (Lyric 1) ............................. 32
2.3. Stabilité de l’attente devant le cytomètre ....................................................................... 34
2.4. Stabilité échantillon sur 2 jours : H0, H1, H2, H4, H6, H24 .............................................. 35
2.5. Etude de la stabilité de la mépacrine en fonction du temps (Lyric 1) .............................. 35
2.5.1. Stabilité de la solution stock sur 1 mois ................................................................... 36
2.5.2. Stabilité de la solution mère sur 5 jours ................................................................... 37
2.5.3. Stabilité de la solution fille sur 5 jours ..................................................................... 37
2.6. Répétabilité et reproductibilité ........................................................................................ 39
2.7. Calcul du biais entre les 2 cytomètres .............................................................................. 40
Chapitre 3 : Etablissement des valeurs de référence .................................................................. 42
4. Conclusion générale et perspectives ........................................................................................... 44
5. Glossaire ...................................................................................................................................... 45
6. Bibliographie ................................................................................................................................ 47
7. Annexes ....................................................................................................................................... 50Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89149 Validation du test à la mépacrine sur FACS lyric [TFE / Mémoire] / Vincent Cauchie, Auteur ; François Mullier, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2020.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’analyse scientifique a de plus en plus souvent besoin de tests rapides et fiables pour diagnostiquer des patients tout en évitant un coût financier trop important. L’analyse cytométrique couplée à la fluorescence permet de réunir ces avantages, malgré le coût élevé des réactifs.
Ce travail traitera du test à la mépacrine sur un cytomètre en flux, le FACS Lyric. Il y sera abordé divers points essentiels, en commençant par la présentation générale de l’automate, de ses fonctions et applications, mais également une étude approfondie du test à la mépacrine.
Une partie théorique viendra compléter l’application pratique de notre analyse : principes de validation d’une méthode et des différents paramètres explorés, répétabilité et établissement des valeurs de référence. Ce travail permettra de suivre l’évolution de la démarche scientifique mise en place pour valider le protocole préétabli du test à la mépacrine, et de le rendre réalisable à plus grande échelle.Note de contenu : Table des matières
1. Présentation du lieu de stage ........................................................................................................ 8
Introduction générale ........................................................................................................................ 9
2. Partie théorique ........................................................................................................................... 11
Chapitre 1 : Le FACS Lyric ............................................................................................................ 11
1.1. La cytométrie en flux ........................................................................................................ 11
1.2. La fluorescence ................................................................................................................. 13
1.2.1. Les colorants fluorescents ........................................................................................ 13
1.2.2. L’immunofluorescence ............................................................................................. 13
1.3. Présentation du cytomètre en flux « FACS Lyric » ........................................................... 15
Chapitre 2 : Test à la mépacrine .................................................................................................. 16
2.1. L’hémostase primaire et le rôle des plaquettes ............................................................... 16
2.1.1. Les 3 phases de l’hémostase .................................................................................... 16
2.1.2. Origine des plaquettes sanguines ............................................................................ 16
2.1.3. L’hémostase primaire ............................................................................................... 18
2.2. Les thrombopathies constitutionnelles ............................................................................ 18
2.2.1. Pathologies des récepteurs des agonistes solubles ................................................. 19
2.2.2. Altérations des voies de signalisation plaquettaire ................................................. 19
2.2.3. Pathologies sécrétoires ............................................................................................ 20
2.2.4. Pathologies des récepteurs glycoprotéiques des protéines adhésives .................... 20
2.2.5. Anomalies des phospholipides membranaires plaquettaires .................................. 21
2.3. Les anomalies de sécrétion et leur exploration ............................................................... 21
2.3.1. Granules denses ....................................................................................................... 22
2.3.1.1. Formation des granules denses .......................................................................... 22
2.3.1.2. Défaut des granules denses ................................................................................ 23
2.4. La mépacrine et principes généraux du test .................................................................... 24
2.4.1. Le test à la mépacrine .............................................................................................. 24
2.4.1.1. Pré-analytique .................................................................................................... 24
2.4.1.2. Analytique........................................................................................................... 25
2.4.1.3. Remarques .......................................................................................................... 26
2.4.2. Etablissement de valeurs de référence sur automate .............................................. 27
2.4.3. Validation d’un test et modification de paramètres ................................................ 28
2.4.4. Répétabilité .............................................................................................................. 28
7
3. Partie pratique ............................................................................................................................. 29
Chapitre 1 : Test à la mépacrine .................................................................................................. 29
Chapitre 2 : Validation du test à la mépacrine ............................................................................ 30
2.1. Activation au TRAP : avant et après addition de mépacrine ............................................ 31
2.2. Réévaluation des différentes concentrations en mépacrine (Lyric 1) ............................. 32
2.3. Stabilité de l’attente devant le cytomètre ....................................................................... 34
2.4. Stabilité échantillon sur 2 jours : H0, H1, H2, H4, H6, H24 .............................................. 35
2.5. Etude de la stabilité de la mépacrine en fonction du temps (Lyric 1) .............................. 35
2.5.1. Stabilité de la solution stock sur 1 mois ................................................................... 36
2.5.2. Stabilité de la solution mère sur 5 jours ................................................................... 37
2.5.3. Stabilité de la solution fille sur 5 jours ..................................................................... 37
2.6. Répétabilité et reproductibilité ........................................................................................ 39
2.7. Calcul du biais entre les 2 cytomètres .............................................................................. 40
Chapitre 3 : Etablissement des valeurs de référence .................................................................. 42
4. Conclusion générale et perspectives ........................................................................................... 44
5. Glossaire ...................................................................................................................................... 45
6. Bibliographie ................................................................................................................................ 47
7. Annexes ....................................................................................................................................... 50Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89149 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Valodation du kit Xpert® MTB/RIF Ultra sur le GeneXpert dx pour la détection de la bactérie Mycobacterium tuberculosis et sa résistance à la rifampicine dans les prélèvements respiratoires / Ikrame Zekhnini
Titre : Valodation du kit Xpert® MTB/RIF Ultra sur le GeneXpert dx pour la détection de la bactérie Mycobacterium tuberculosis et sa résistance à la rifampicine dans les prélèvements respiratoires Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Ikrame Zekhnini, Auteur ; Luc Blockx, Directeur de la recherche Année de publication : 2018 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=66094 Valodation du kit Xpert® MTB/RIF Ultra sur le GeneXpert dx pour la détection de la bactérie Mycobacterium tuberculosis et sa résistance à la rifampicine dans les prélèvements respiratoires [TFE / Mémoire] / Ikrame Zekhnini, Auteur ; Luc Blockx, Directeur de la recherche . - 2018.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=66094 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Vérification de méthode pour l’analyse des liquides de ponction sur l’IQ200 / Antoine Verriez
Titre : Vérification de méthode pour l’analyse des liquides de ponction sur l’IQ200 Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Antoine Verriez, Auteur ; Caroline Charlier, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2019 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Centre hospitalier de Valenciennes Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’organisme humain est composé de cavités contenant un liquide nécessaire au bon fonctionnement de ce dernier. La sécrétion importante de liquide nécessite des investigations biologiques car cette dernière peut être d’origine infectieuse et ou inflammatoire. Pour ce faire, le clinicien réalise des prélèvements afin que ceux-ci soient exploités. Ces liquides de ponction proviennent de l’abdomen, la plèvre, le péricarde et des articulations. Leur analyse est incontournable puisqu’elle oriente les hypothèses diagnostiques du clinicien, et permet la mise en oeuvre d’un traitement éventuel. Cette analyse repose sur le décompte des leucocytes et des hématies. Actuellement, au Centre Hospitalier de Valenciennes, cet examen est réalisé manuellement.
L’objectif du stage consiste à développer la numération de liquides de ponction à l’aide d’un automate, l’IQ200, par la construction d’un dossier de vérification. Ainsi, l’évaluation des performances consiste en l’étude de la répétabilité, la fidélité intermédiaire (ou reproductibilité), la variabilité inter-opérateurs, la comparaison de méthodes, l’étendue de mesure, la contamination et l’intervalle de références.
En pratique, 132 liquides ont été analysés à la fois manuellement (décompte sur KOVA slide) et sur l’automate. Seuls 131 liquides ont été comparés dont 95 ascites, 31 pleuraux, 2 articulaires, 1 péricardique ainsi que 2 liquides de dialyse péritonéale. 119 d’entre eux possèdent des résultats concordants entre la numération automatique et la numération manuelle, soit 90,8% de corrélation.
La majorité des résultats montre les mêmes significations cliniques en méthode manuelle et automatique. De plus, nous avons pu déterminer la précision de la méthode par la mesure de la répétabilité, la reproductibilité de la méthode, le seuil de détection et de quantification ainsi qu’une étude sur la contamination inter-échantillons. Cependant, la variabilité inter-opérateurs n’a pas pu être étudiée. Alors que la cytologie automatisée des liquides pleuraux et d’ascites pourra très prochainement être mise en place, une prolongation d’étude est à envisager pour les liquides péricardiques, articulaires et les liquides de dialyse péritonéale.Note de contenu : Table des matières
1 Présentation de l’établissement ......................................................................................... 8
1.1 Généralités ................................................................................................................... 8
1.2 Politique de l’établissement ........................................................................................ 8
1.3 Présentation du laboratoire ........................................................................................ 9
1.3.1 Secteur ICAAR ....................................................................................................... 9
1.3.2 Hématologie et hémostase ................................................................................ 10
1.3.3 Immuno-sérologie .............................................................................................. 10
1.3.4 Microbiologie ..................................................................................................... 11
1.4 La certification et l’accréditation ............................................................................... 11
Introduction .............................................................................................................................. 12
2 Contexte théorique ........................................................................................................... 13
2.1 Liquide d’ascite .......................................................................................................... 13
2.1.1 Définition ............................................................................................................ 13
2.1.2 Etiologie .............................................................................................................. 13
2.1.3 Biochimie ............................................................................................................ 14
2.1.4 Cytologie ............................................................................................................. 14
2.1.5 Arbre décisionnel ............................................................................................... 16
2.2 Liquide pleural ........................................................................................................... 17
2.2.1 Définition ............................................................................................................ 17
2.2.2 Etiologie .............................................................................................................. 17
2.2.3 Biochimie ............................................................................................................ 18
2.2.4 Cytologie ............................................................................................................. 19
2.2.5 Arbre décisionnel ............................................................................................... 20
2.3 Liquide articulaire ...................................................................................................... 21
2.3.1 Définition ............................................................................................................ 21
2.3.2 Etiologie .............................................................................................................. 22
2.3.3 Biochimie ............................................................................................................ 22
2.3.4 Cytologie ............................................................................................................. 22
2.3.5 Arbre décisionnel ............................................................................................... 23
2.4 Liquide péricardique .................................................................................................. 24
2.4.1 Définition ............................................................................................................ 24
2.4.2 Etiologie .............................................................................................................. 25
2.4.3 Biochimie ............................................................................................................ 26
2.4.4 Cytologie ............................................................................................................. 26
2.5 IQ 200 ......................................................................................................................... 26
2.5.1 Principe ............................................................................................................... 26
2.5.2 Consommables ................................................................................................... 28
2.5.3 Contrôles internes de qualité ............................................................................. 29
2.5.4 Liquides analysables sur IQ200 .......................................................................... 31
3 Objectifs et stratégie ......................................................................................................... 32
4 Matériel et méthodes ....................................................................................................... 32
4.1 Echantillons étudiés ................................................................................................... 32
4.2 Méthodes ................................................................................................................... 33
4.2.1 Mode opératoire pour le passage des CIQ ......................................................... 33
4.2.2 Mode opératoire pour le passage des échantillons patients............................. 33
4.2.3 Mode opératoire pour le décompte sur cellule KOVA® ..................................... 34
4.2.4 Etude de la linéarité ........................................................................................... 34
4.2.5 Vérification du bruit de fond .............................................................................. 35
5 Résultats et discussion ...................................................................................................... 35
5.1 Etendue des valeurs................................................................................................... 35
5.2 Etude de la répétabilité ............................................................................................. 36
5.3 Etude de la fidélité intermédiaire .............................................................................. 37
5.4 Etude de la variabilité inter-opérateurs .................................................................... 38
5.5 Comparaison de méthodes........................................................................................ 38
5.5.1 Liquide d’ascite ................................................................................................... 39
5.5.2 Liquides pleuraux ............................................................................................... 41
5.5.3 Autres liquides .................................................................................................... 41
5.5.4 Résultats globaux de la comparaison de méthodes .......................................... 42
5.6 Etendue de mesure.................................................................................................... 43
5.6.1 Limite de détection ............................................................................................ 43
5.6.2 Limite de quantification ..................................................................................... 43
5.6.3 Linéarité .............................................................................................................. 43
5.6.4 Conclusion de l’étude ......................................................................................... 45
5.7 Etude de la contamination inter-échantillons ........................................................... 45
5.8 Intervalles de référence et valeurs de décision clinique ........................................... 47
5.9 Mise en pratique ........................................................................................................ 47
Conclusion et perspectives ....................................................................................................... 48
Liste des figures ........................................................................................................................ 49
Liste des abréviations ............................................................................................................... 50
Bibliographie ............................................................................................................................ 51
Table des annexes .................................................................................................................... 53Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=80005 Vérification de méthode pour l’analyse des liquides de ponction sur l’IQ200 [TFE / Mémoire] / Antoine Verriez, Auteur ; Caroline Charlier, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2019.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Centre hospitalier de Valenciennes Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’organisme humain est composé de cavités contenant un liquide nécessaire au bon fonctionnement de ce dernier. La sécrétion importante de liquide nécessite des investigations biologiques car cette dernière peut être d’origine infectieuse et ou inflammatoire. Pour ce faire, le clinicien réalise des prélèvements afin que ceux-ci soient exploités. Ces liquides de ponction proviennent de l’abdomen, la plèvre, le péricarde et des articulations. Leur analyse est incontournable puisqu’elle oriente les hypothèses diagnostiques du clinicien, et permet la mise en oeuvre d’un traitement éventuel. Cette analyse repose sur le décompte des leucocytes et des hématies. Actuellement, au Centre Hospitalier de Valenciennes, cet examen est réalisé manuellement.
L’objectif du stage consiste à développer la numération de liquides de ponction à l’aide d’un automate, l’IQ200, par la construction d’un dossier de vérification. Ainsi, l’évaluation des performances consiste en l’étude de la répétabilité, la fidélité intermédiaire (ou reproductibilité), la variabilité inter-opérateurs, la comparaison de méthodes, l’étendue de mesure, la contamination et l’intervalle de références.
En pratique, 132 liquides ont été analysés à la fois manuellement (décompte sur KOVA slide) et sur l’automate. Seuls 131 liquides ont été comparés dont 95 ascites, 31 pleuraux, 2 articulaires, 1 péricardique ainsi que 2 liquides de dialyse péritonéale. 119 d’entre eux possèdent des résultats concordants entre la numération automatique et la numération manuelle, soit 90,8% de corrélation.
La majorité des résultats montre les mêmes significations cliniques en méthode manuelle et automatique. De plus, nous avons pu déterminer la précision de la méthode par la mesure de la répétabilité, la reproductibilité de la méthode, le seuil de détection et de quantification ainsi qu’une étude sur la contamination inter-échantillons. Cependant, la variabilité inter-opérateurs n’a pas pu être étudiée. Alors que la cytologie automatisée des liquides pleuraux et d’ascites pourra très prochainement être mise en place, une prolongation d’étude est à envisager pour les liquides péricardiques, articulaires et les liquides de dialyse péritonéale.Note de contenu : Table des matières
1 Présentation de l’établissement ......................................................................................... 8
1.1 Généralités ................................................................................................................... 8
1.2 Politique de l’établissement ........................................................................................ 8
1.3 Présentation du laboratoire ........................................................................................ 9
1.3.1 Secteur ICAAR ....................................................................................................... 9
1.3.2 Hématologie et hémostase ................................................................................ 10
1.3.3 Immuno-sérologie .............................................................................................. 10
1.3.4 Microbiologie ..................................................................................................... 11
1.4 La certification et l’accréditation ............................................................................... 11
Introduction .............................................................................................................................. 12
2 Contexte théorique ........................................................................................................... 13
2.1 Liquide d’ascite .......................................................................................................... 13
2.1.1 Définition ............................................................................................................ 13
2.1.2 Etiologie .............................................................................................................. 13
2.1.3 Biochimie ............................................................................................................ 14
2.1.4 Cytologie ............................................................................................................. 14
2.1.5 Arbre décisionnel ............................................................................................... 16
2.2 Liquide pleural ........................................................................................................... 17
2.2.1 Définition ............................................................................................................ 17
2.2.2 Etiologie .............................................................................................................. 17
2.2.3 Biochimie ............................................................................................................ 18
2.2.4 Cytologie ............................................................................................................. 19
2.2.5 Arbre décisionnel ............................................................................................... 20
2.3 Liquide articulaire ...................................................................................................... 21
2.3.1 Définition ............................................................................................................ 21
2.3.2 Etiologie .............................................................................................................. 22
2.3.3 Biochimie ............................................................................................................ 22
2.3.4 Cytologie ............................................................................................................. 22
2.3.5 Arbre décisionnel ............................................................................................... 23
2.4 Liquide péricardique .................................................................................................. 24
2.4.1 Définition ............................................................................................................ 24
2.4.2 Etiologie .............................................................................................................. 25
2.4.3 Biochimie ............................................................................................................ 26
2.4.4 Cytologie ............................................................................................................. 26
2.5 IQ 200 ......................................................................................................................... 26
2.5.1 Principe ............................................................................................................... 26
2.5.2 Consommables ................................................................................................... 28
2.5.3 Contrôles internes de qualité ............................................................................. 29
2.5.4 Liquides analysables sur IQ200 .......................................................................... 31
3 Objectifs et stratégie ......................................................................................................... 32
4 Matériel et méthodes ....................................................................................................... 32
4.1 Echantillons étudiés ................................................................................................... 32
4.2 Méthodes ................................................................................................................... 33
4.2.1 Mode opératoire pour le passage des CIQ ......................................................... 33
4.2.2 Mode opératoire pour le passage des échantillons patients............................. 33
4.2.3 Mode opératoire pour le décompte sur cellule KOVA® ..................................... 34
4.2.4 Etude de la linéarité ........................................................................................... 34
4.2.5 Vérification du bruit de fond .............................................................................. 35
5 Résultats et discussion ...................................................................................................... 35
5.1 Etendue des valeurs................................................................................................... 35
5.2 Etude de la répétabilité ............................................................................................. 36
5.3 Etude de la fidélité intermédiaire .............................................................................. 37
5.4 Etude de la variabilité inter-opérateurs .................................................................... 38
5.5 Comparaison de méthodes........................................................................................ 38
5.5.1 Liquide d’ascite ................................................................................................... 39
5.5.2 Liquides pleuraux ............................................................................................... 41
5.5.3 Autres liquides .................................................................................................... 41
5.5.4 Résultats globaux de la comparaison de méthodes .......................................... 42
5.6 Etendue de mesure.................................................................................................... 43
5.6.1 Limite de détection ............................................................................................ 43
5.6.2 Limite de quantification ..................................................................................... 43
5.6.3 Linéarité .............................................................................................................. 43
5.6.4 Conclusion de l’étude ......................................................................................... 45
5.7 Etude de la contamination inter-échantillons ........................................................... 45
5.8 Intervalles de référence et valeurs de décision clinique ........................................... 47
5.9 Mise en pratique ........................................................................................................ 47
Conclusion et perspectives ....................................................................................................... 48
Liste des figures ........................................................................................................................ 49
Liste des abréviations ............................................................................................................... 50
Bibliographie ............................................................................................................................ 51
Table des annexes .................................................................................................................... 53Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=80005 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Vérification des performances analytiques de 2 kits commerciaux pour le dosage des vitamines A/E et du bêta-carotène par chromatographie liquide (HPLC-UV) / Cemile Develi
Titre : Vérification des performances analytiques de 2 kits commerciaux pour le dosage des vitamines A/E et du bêta-carotène par chromatographie liquide (HPLC-UV) Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Cemile Develi, Auteur ; Luc Blockx, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2022 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Les vitamines A et E sont des substances organiques qui font parties des vitamines liposolubles. Le bêta-carotène est un précurseur de vitamine A. il s’agit de la principale provitamine A qui se transforme dans l’organisme via des processus métaboliques. Ces trois molécules sont synthétisées en faible quantité ou non synthétisés par l’homme, elles sont fournies par l’alimentation. Elles sont indispensables à la vie et participent à différentes fonctions de l’organisme. Leur dosage dans le sang permet de diagnostiquer une carence ou un excès vitaminique.
La méthode de référence du dosage de ces composés est la chromatographie liquide à haute pression. Le secteur de biochimie spéciale du Laboratoire Hospitalier Universitaire de Bruxelles – Universitair Laboratorium van Brussel (LHUB-ULB) utilise une méthode HPLC couplé à un détecteur UV-Visible de type DAD, qui a été développée au sein même du laboratoire selon les procédures internes du LHUB-ULB.
Cependant, une nouvelle réglementation IVDR, Règlement Diagnostic In Vitro, de type Européen qui entrera bientôt en vigueur, impose les laboratoires de biologie médicale d’utiliser des méthodes commerciales marquées CE-IVD s’ils en existent sur le marché.
En vue de cette future réglementation, le laboratoire de Biochimie spéciale est tenu de remplacer la méthode non commerciale dite « home made » par deux méthodes commerciales qui existe sur le marché. Ces méthodes sont fournies par la firme Chromsystems®.
Afin de voir si les performances analytiques de ces méthodes commerciales sont satisfaisantes, le laboratoire réalise une vérification des performances analytiques qui consiste le sujet principal de ce travail. La vérification s’effectue en évaluant certains critères comme la répétabilité, la fidélité intermédiaire, la robustesse, l’exactitude et la corrélation. D’autres tests qui ne sont pas censés être réalisés lors d’une vérification des performances analytiques et une comparaison entre les méthodes commerciales et la méthode « home made » du laboratoire ont également été réalisés.Note de contenu : 4
Tables des matières
Remerciements ..................................................................................................................... 3
Tables des matières ............................................................................................................... 4
Présentation du lieu de stage................................................................................................ 6
Introduction générale............................................................................................................ 7
Contexte général ................................................................................................................... 9
1 Les vitamines ..................................................................................................................... 9
1.1 Généralités ................................................................................................................ 9
1.2 La vitamine A ........................................................................................................... 10
1.3 Le bêta-carotène ..................................................................................................... 11
1.4 La vitamine E ........................................................................................................... 12
2 La chromatographie ........................................................................................................ 14
2.1 Définition ................................................................................................................. 14
2.2 La chromatographie liquide .................................................................................... 15
2.2.1 Méthode de séparation ..................................................................................... 15
2.2.2 La chromatographie liquide à haute/ultra performance .................................. 17
3 Traitement des échantillons ............................................................................................ 20
3.1 Contexte .................................................................................................................. 20
3.2 Les techniques de préparations des échantillons ................................................... 20
4 La validation et la vérification ......................................................................................... 23
4.1 La vérification des performances analytiques ........................................................ 24
4.1.1 La fidélité ........................................................................................................... 24
4.1.2 La justesse ou l’exactitude ................................................................................ 25
4.1.3 Incertitude de mesure ....................................................................................... 25
4.1.4 Comparaison de méthode ................................................................................. 25
Objectifs et stratégie ........................................................................................................... 26
Matériel et méthodes.......................................................................................................... 27
1 Matériel ........................................................................................................................... 27
1.1 Kits commerciaux .................................................................................................... 27
1.2 Méthode « home made » (LHUB-ULB) .................................................................... 28
1.3 Appareillages ........................................................................................................... 29
1.4 Matériel de laboratoire ........................................................................................... 29
1.5 Echantillons ............................................................................................................. 30
5
2 Méthodes ........................................................................................................................ 31
2.1 Méthode bêta-carotène ChromSystems ® .............................................................. 31
2.2 Méthode vitamine A/E ChromSystems ® ................................................................ 31
2.3 Méthode « home made » (LHUB-ULB) .................................................................... 31
2.4 Conditions chromatographiques des méthodes ..................................................... 33
Résultats et discussion ........................................................................................................ 34
1 Mise en place des méthodes sur le système HPLC ......................................................... 34
2 La vérification des performances analytiques ................................................................ 39
2.1 La répétabilité.......................................................................................................... 40
2.2 La fidélité intermédiaire .......................................................................................... 41
2.3 L’exactitude ............................................................................................................. 43
2.4 La corrélation........................................................................................................... 45
2.5 La robustesse ........................................................................................................... 47
2.6 Etendue de mesure ................................................................................................. 50
2.7 Les interférences ..................................................................................................... 50
2.8 La stabilité (demi-volume)....................................................................................... 52
3 Comparaison des méthodes Chromsystems avec la méthode « home made »............. 53
Conclusion générale et perspectives................................................................................... 58
Liste des abréviations .......................................................................................................... 59
Liste des figures ................................................................................................................... 60
Liste des tableaux ................................................................................................................ 61
Bibliographie........................................................................................................................ 62
Annexes ............................................................................................................................... 67
Résumé ................................................................................................................................ 76
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=105753 Vérification des performances analytiques de 2 kits commerciaux pour le dosage des vitamines A/E et du bêta-carotène par chromatographie liquide (HPLC-UV) [TFE / Mémoire] / Cemile Develi, Auteur ; Luc Blockx, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2022.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Langues : Français (fre)
Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Les vitamines A et E sont des substances organiques qui font parties des vitamines liposolubles. Le bêta-carotène est un précurseur de vitamine A. il s’agit de la principale provitamine A qui se transforme dans l’organisme via des processus métaboliques. Ces trois molécules sont synthétisées en faible quantité ou non synthétisés par l’homme, elles sont fournies par l’alimentation. Elles sont indispensables à la vie et participent à différentes fonctions de l’organisme. Leur dosage dans le sang permet de diagnostiquer une carence ou un excès vitaminique.
La méthode de référence du dosage de ces composés est la chromatographie liquide à haute pression. Le secteur de biochimie spéciale du Laboratoire Hospitalier Universitaire de Bruxelles – Universitair Laboratorium van Brussel (LHUB-ULB) utilise une méthode HPLC couplé à un détecteur UV-Visible de type DAD, qui a été développée au sein même du laboratoire selon les procédures internes du LHUB-ULB.
Cependant, une nouvelle réglementation IVDR, Règlement Diagnostic In Vitro, de type Européen qui entrera bientôt en vigueur, impose les laboratoires de biologie médicale d’utiliser des méthodes commerciales marquées CE-IVD s’ils en existent sur le marché.
En vue de cette future réglementation, le laboratoire de Biochimie spéciale est tenu de remplacer la méthode non commerciale dite « home made » par deux méthodes commerciales qui existe sur le marché. Ces méthodes sont fournies par la firme Chromsystems®.
Afin de voir si les performances analytiques de ces méthodes commerciales sont satisfaisantes, le laboratoire réalise une vérification des performances analytiques qui consiste le sujet principal de ce travail. La vérification s’effectue en évaluant certains critères comme la répétabilité, la fidélité intermédiaire, la robustesse, l’exactitude et la corrélation. D’autres tests qui ne sont pas censés être réalisés lors d’une vérification des performances analytiques et une comparaison entre les méthodes commerciales et la méthode « home made » du laboratoire ont également été réalisés.Note de contenu : 4
Tables des matières
Remerciements ..................................................................................................................... 3
Tables des matières ............................................................................................................... 4
Présentation du lieu de stage................................................................................................ 6
Introduction générale............................................................................................................ 7
Contexte général ................................................................................................................... 9
1 Les vitamines ..................................................................................................................... 9
1.1 Généralités ................................................................................................................ 9
1.2 La vitamine A ........................................................................................................... 10
1.3 Le bêta-carotène ..................................................................................................... 11
1.4 La vitamine E ........................................................................................................... 12
2 La chromatographie ........................................................................................................ 14
2.1 Définition ................................................................................................................. 14
2.2 La chromatographie liquide .................................................................................... 15
2.2.1 Méthode de séparation ..................................................................................... 15
2.2.2 La chromatographie liquide à haute/ultra performance .................................. 17
3 Traitement des échantillons ............................................................................................ 20
3.1 Contexte .................................................................................................................. 20
3.2 Les techniques de préparations des échantillons ................................................... 20
4 La validation et la vérification ......................................................................................... 23
4.1 La vérification des performances analytiques ........................................................ 24
4.1.1 La fidélité ........................................................................................................... 24
4.1.2 La justesse ou l’exactitude ................................................................................ 25
4.1.3 Incertitude de mesure ....................................................................................... 25
4.1.4 Comparaison de méthode ................................................................................. 25
Objectifs et stratégie ........................................................................................................... 26
Matériel et méthodes.......................................................................................................... 27
1 Matériel ........................................................................................................................... 27
1.1 Kits commerciaux .................................................................................................... 27
1.2 Méthode « home made » (LHUB-ULB) .................................................................... 28
1.3 Appareillages ........................................................................................................... 29
1.4 Matériel de laboratoire ........................................................................................... 29
1.5 Echantillons ............................................................................................................. 30
5
2 Méthodes ........................................................................................................................ 31
2.1 Méthode bêta-carotène ChromSystems ® .............................................................. 31
2.2 Méthode vitamine A/E ChromSystems ® ................................................................ 31
2.3 Méthode « home made » (LHUB-ULB) .................................................................... 31
2.4 Conditions chromatographiques des méthodes ..................................................... 33
Résultats et discussion ........................................................................................................ 34
1 Mise en place des méthodes sur le système HPLC ......................................................... 34
2 La vérification des performances analytiques ................................................................ 39
2.1 La répétabilité.......................................................................................................... 40
2.2 La fidélité intermédiaire .......................................................................................... 41
2.3 L’exactitude ............................................................................................................. 43
2.4 La corrélation........................................................................................................... 45
2.5 La robustesse ........................................................................................................... 47
2.6 Etendue de mesure ................................................................................................. 50
2.7 Les interférences ..................................................................................................... 50
2.8 La stabilité (demi-volume)....................................................................................... 52
3 Comparaison des méthodes Chromsystems avec la méthode « home made »............. 53
Conclusion générale et perspectives................................................................................... 58
Liste des abréviations .......................................................................................................... 59
Liste des figures ................................................................................................................... 60
Liste des tableaux ................................................................................................................ 61
Bibliographie........................................................................................................................ 62
Annexes ............................................................................................................................... 67
Résumé ................................................................................................................................ 76
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=105753 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Vérification de l’utilité des tests b-lacta et PBP2a afin de prédire la présence de mécanismes de résistances aux antibiotiques : Étude rétrospective et prospective / Julien Brasseur
Titre : Vérification de l’utilité des tests b-lacta et PBP2a afin de prédire la présence de mécanismes de résistances aux antibiotiques : Étude rétrospective et prospective Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Julien Brasseur ; B. Marchetti, Promoteur du mémoire ; S.E. Lali, Promoteur du mémoire ; J. Schmitz, Promoteur du mémoire Editeur : Montignies-sur-Sambre : Haute Ecole Louvain en Hainaut Année de publication : 2023 Importance : 63p. Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur . Langues : Français (fre) Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’antibiorésistance regroupe divers mécanismes mis en place par les bactéries pour résister à l’action des antibiotiques. L’importance de réagir vite face à des bactéries résistantes permet d’augmenter les chances de survie des patients qui sont atteints d’infection bactérienne. En commençant par une partie théorique qui nous permet de définir les hémocultures, montrer les différents types de bactéries et d’antibiotiques. Tout en détaillant l’antibiorésistance, les mécanismes mis en place par les bactéries et les solutions apportées pour la combattre.
Dans la pratique, nous présenterons les différents tests, les principes, les modes opératoires et les résultats qui ont été obtenus pendant l’étude et ailleurs.
Ce travail a pour but de répondre à la question de travail suivante : Vérification de l’utilité des tests b-lacta et PBP2a afin de prédire la présence de mécanismes de résistances aux antibiotiques : étude rétrospective et prospectivePermalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=114744 Vérification de l’utilité des tests b-lacta et PBP2a afin de prédire la présence de mécanismes de résistances aux antibiotiques : Étude rétrospective et prospective [TFE / Mémoire] / Julien Brasseur ; B. Marchetti, Promoteur du mémoire ; S.E. Lali, Promoteur du mémoire ; J. Schmitz, Promoteur du mémoire . - Montignies-sur-Sambre : Haute Ecole Louvain en Hainaut, 2023 . - 63p.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur .
Langues : Français (fre)
Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : L’antibiorésistance regroupe divers mécanismes mis en place par les bactéries pour résister à l’action des antibiotiques. L’importance de réagir vite face à des bactéries résistantes permet d’augmenter les chances de survie des patients qui sont atteints d’infection bactérienne. En commençant par une partie théorique qui nous permet de définir les hémocultures, montrer les différents types de bactéries et d’antibiotiques. Tout en détaillant l’antibiorésistance, les mécanismes mis en place par les bactéries et les solutions apportées pour la combattre.
Dans la pratique, nous présenterons les différents tests, les principes, les modes opératoires et les résultats qui ont été obtenus pendant l’étude et ailleurs.
Ce travail a pour but de répondre à la question de travail suivante : Vérification de l’utilité des tests b-lacta et PBP2a afin de prédire la présence de mécanismes de résistances aux antibiotiques : étude rétrospective et prospectivePermalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=114744 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Vers une identification "plus claire" et plus rapide des Candida ... et la réalmisation à portée de tous d'un antifongigramme / SEYNHAEVE Lolita
PermalinkUn vieux test revisité : la prothrombine résiduelle / Melinda Esen
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