Centre de Documentation Campus Montignies
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Auteur Jean-Pierre Montenez |
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Optimisation de la méthode de titrage de Parapoxvirus ovis sur cellules BK-KL3A / Bertrand Cornet
Titre : Optimisation de la méthode de titrage de Parapoxvirus ovis sur cellules BK-KL3A Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Bertrand Cornet, Auteur ; Jean-Pierre Montenez, Directeur de la recherche Année de publication : 2018 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=66076 Optimisation de la méthode de titrage de Parapoxvirus ovis sur cellules BK-KL3A [TFE / Mémoire] / Bertrand Cornet, Auteur ; Jean-Pierre Montenez, Directeur de la recherche . - 2018.
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Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=66076 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Optimisation d’une méthode de titrage viral par standardisation de la concentration cellulaire / Aaron Niaz
Titre : Optimisation d’une méthode de titrage viral par standardisation de la concentration cellulaire Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Aaron Niaz, Auteur ; Jean-Pierre Montenez, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2020 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Zoetis est une firme pharmaceutique qui fabrique principalement des vaccins pour différents espèces d’animaux. Afin de déterminer si les vaccins produits au sein de Zoetis sont conformes à ce qui est attendu, le contrôle qualité réalise divers tests afin de s’en assurer. L’un d’eux est réalisé par le laboratoire de virologie, c’est la méthode du titrage viral. Celui-ci consiste à inoculer le vaccin, contenant le ou les agents infectieux, à différentes concentrations sur des cellules et ainsi mettre en évidence des effets cytopathiques.
Cependant, la SOP en vigueur au laboratoire de virologie impose un ratio ne prenant pas en compte la concentration cellulaire, en effet, celui-ci est d’1 nunc de 175 cm² pour 10 microplaques ; or d’une semaine à l’autre, celle-ci peut varier. Afin d’obtenir une méthode plus standardisée, l’objectif de ce stage est de définir pour chacun des 4 virus bovins, à savoir, le PI3, l’IBR, le Coronavirus et le Rotavirus, une concentration cellulaire en BK4 adéquate.
Pour ce faire, il a fallu réaliser différents titrages et analyser leurs résultats afin de connaitre l’impact de la concentration cellulaire sur le titre viral. Après une formation aux méthodes de titrages, ainsi qu’à la mise en culture des cellules BK4, des microplaques avec différentes concentrations cellulaires ont été réalisées. Lors de cette étape, un premier problème est apparu lors du comptage des cellules. Il a donné lieu à une investigation et une première piste d’amélioration pour le laboratoire.
Les microplaques ont ensuite été utilisées pour les titrages viraux. Bien que la durée du stage n’ait pas permis de réaliser suffisamment de titrages, les résultats obtenus permettent de mieux comprendre l’impact de la concentration cellulaire sur le titre obtenu. Cette compréhension pourra permettre au laboratoire de diminuer la variabilité du test, et donc d’augmenter la robustesse de la méthode.Note de contenu : Table des matières
1 Présentation du lieu de stage ............................................................................. 8 Historique
..................................................................................................... 8 Présentation de Zoetis et du site de Louvain-La-Neuve ............................ 10
1.2.1 Zoetis .................................................................................................... 10
1.2.2 Site de Louvain-La-Neuve .................................................................... 11 Objectif du stage ........................................................................................ 12
2 Introduction....................................................................................................... 13
3 Partie théorique [1-2] ........................................................................................ 14 Les CGMP ................................................................................................... 14
La vaccination ............................................................................................ 14
Cellules BK4 ................................................................................................ 15
Les virus ...................................................................................................... 16
3.4.1 Composition et structure des virus ...................................................... 16
3.4.2 Multiplication virale ............................................................................. 16 Parainfluenza virus de type 3 bovin (PI3) .................................................. 24
L’IBR (Herpèsvirus bovin de type 1) ........................................................... 25
Rotavirus bovin .......................................................................................... 26
Coronavirus ................................................................................................ 27
3.8.1 Coronavirus Bovin [30-32] ................................................................... 27
3.8.2 COVID 19 .............................................................................................. 28
4 Partie Pratique .................................................................................................. 30 Formation ................................................................................................... 30
Mise en culture et microplaques des cellules BK4 .................................... 32
Méthodes de comptage cellulaire ............................................................. 35
Contrôle ..................................................................................................... 38
Titrage viral ................................................................................................ 38
Méthode de titrage du PI3 et de l’IBR ....................................................... 39
Méthode de titrage du coronavirus et du rotavirus .................................. 41
Lecture ....................................................................................................... 42
Résultats ..................................................................................................... 44
4.9.1 Comptages ........................................................................................... 44
4.9.2 Microplaques et Titrages ..................................................................... 48
5 Conclusion ......................................................................................................... 53
6 Lexique .............................................................................................................. 54
7 Table des illustrations ....................................................................................... 55
8 Table des tableaux ............................................................................................ 56
9 Bibliographie ..................................................................................................... 57
10 Annexes ......................................................................................................... 61Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89120 Optimisation d’une méthode de titrage viral par standardisation de la concentration cellulaire [TFE / Mémoire] / Aaron Niaz, Auteur ; Jean-Pierre Montenez, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2020.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Zoetis est une firme pharmaceutique qui fabrique principalement des vaccins pour différents espèces d’animaux. Afin de déterminer si les vaccins produits au sein de Zoetis sont conformes à ce qui est attendu, le contrôle qualité réalise divers tests afin de s’en assurer. L’un d’eux est réalisé par le laboratoire de virologie, c’est la méthode du titrage viral. Celui-ci consiste à inoculer le vaccin, contenant le ou les agents infectieux, à différentes concentrations sur des cellules et ainsi mettre en évidence des effets cytopathiques.
Cependant, la SOP en vigueur au laboratoire de virologie impose un ratio ne prenant pas en compte la concentration cellulaire, en effet, celui-ci est d’1 nunc de 175 cm² pour 10 microplaques ; or d’une semaine à l’autre, celle-ci peut varier. Afin d’obtenir une méthode plus standardisée, l’objectif de ce stage est de définir pour chacun des 4 virus bovins, à savoir, le PI3, l’IBR, le Coronavirus et le Rotavirus, une concentration cellulaire en BK4 adéquate.
Pour ce faire, il a fallu réaliser différents titrages et analyser leurs résultats afin de connaitre l’impact de la concentration cellulaire sur le titre viral. Après une formation aux méthodes de titrages, ainsi qu’à la mise en culture des cellules BK4, des microplaques avec différentes concentrations cellulaires ont été réalisées. Lors de cette étape, un premier problème est apparu lors du comptage des cellules. Il a donné lieu à une investigation et une première piste d’amélioration pour le laboratoire.
Les microplaques ont ensuite été utilisées pour les titrages viraux. Bien que la durée du stage n’ait pas permis de réaliser suffisamment de titrages, les résultats obtenus permettent de mieux comprendre l’impact de la concentration cellulaire sur le titre obtenu. Cette compréhension pourra permettre au laboratoire de diminuer la variabilité du test, et donc d’augmenter la robustesse de la méthode.Note de contenu : Table des matières
1 Présentation du lieu de stage ............................................................................. 8 Historique
..................................................................................................... 8 Présentation de Zoetis et du site de Louvain-La-Neuve ............................ 10
1.2.1 Zoetis .................................................................................................... 10
1.2.2 Site de Louvain-La-Neuve .................................................................... 11 Objectif du stage ........................................................................................ 12
2 Introduction....................................................................................................... 13
3 Partie théorique [1-2] ........................................................................................ 14 Les CGMP ................................................................................................... 14
La vaccination ............................................................................................ 14
Cellules BK4 ................................................................................................ 15
Les virus ...................................................................................................... 16
3.4.1 Composition et structure des virus ...................................................... 16
3.4.2 Multiplication virale ............................................................................. 16 Parainfluenza virus de type 3 bovin (PI3) .................................................. 24
L’IBR (Herpèsvirus bovin de type 1) ........................................................... 25
Rotavirus bovin .......................................................................................... 26
Coronavirus ................................................................................................ 27
3.8.1 Coronavirus Bovin [30-32] ................................................................... 27
3.8.2 COVID 19 .............................................................................................. 28
4 Partie Pratique .................................................................................................. 30 Formation ................................................................................................... 30
Mise en culture et microplaques des cellules BK4 .................................... 32
Méthodes de comptage cellulaire ............................................................. 35
Contrôle ..................................................................................................... 38
Titrage viral ................................................................................................ 38
Méthode de titrage du PI3 et de l’IBR ....................................................... 39
Méthode de titrage du coronavirus et du rotavirus .................................. 41
Lecture ....................................................................................................... 42
Résultats ..................................................................................................... 44
4.9.1 Comptages ........................................................................................... 44
4.9.2 Microplaques et Titrages ..................................................................... 48
5 Conclusion ......................................................................................................... 53
6 Lexique .............................................................................................................. 54
7 Table des illustrations ....................................................................................... 55
8 Table des tableaux ............................................................................................ 56
9 Bibliographie ..................................................................................................... 57
10 Annexes ......................................................................................................... 61Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=89120 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire