Centre de Documentation Campus Montignies
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Mardi : 8h-18h30
Mercredi 9h-16h30
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2 résultat(s) recherche sur le mot-clé 'Notre-Dame de Grâce'
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Analyse comparative de deux panels d’immunophénotypage cinq et dix couleurs en cytométrie en flux / Coleen Delatte
Titre : Analyse comparative de deux panels d’immunophénotypage cinq et dix couleurs en cytométrie en flux Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Coleen Delatte, Auteur ; Louise-Marie Vincent, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2021 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : Notre-Dame de Grâce Gosselies Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Ce travail de fin d’études fut réalisé au sein du laboratoire d’hématologie à l’hopital Notre-Dame de Grâce de Gossselies.Le sujet est l’analyse comparative de deux panels d’immunophénotypage cinq et dix couleurs en cytométrie en flux. Ces dernières années, la cytométrie en flux a beaucoup évoluée et permet à ce jour de diagnostiquer et de suivre de nombreuses hémopathies malignes et, plus particulièrement au laboratoire, les lymphomes. Cette technique est utilisée en complément d’une numération et d’un examen cytologique des cellules. Le cytomètre en flux permet d’obtenir différentes informations sur les cellules en passant devant un laser. Les données récoltées donnent des caractéristiques telles que la taille, la granularité ainsi que certains marqueurs antigéniques de chaque cellule individuellement. Lors de mon arrivée au sein du laboratoire, le cytomètre en flux Beckman Coulter Navios EX, fonctionnait avec un panel de cinq couleurs et un seul laser était utilisé. Mon travail de fin d’étude a permis, en complément du travail de Klara Kara de l’an dernier, de mettre au point un panel d’anticorps avec dix fluorochromes différents permettant de réaliser l’exploration simultanée de douze paramètres analysés avec 3 lasers. Ce présent travail compare l’ancien panel 5 couleurs et le nouveau panel 10 couleurs, étudie la répétabilité et la stabilité de ce panel. Note de contenu : Table des matières
Présentation du lieu de stage............................................................................................. 7
Introduction générale ........................................................................................................ 8
1. La cytométrie en flux : ................................................................................................ 9
1.1. Principe général ..............................................................................................................9
1.1.1. Principe de focalisation hydrodynamique .....................................................................................10
1.1.2. Principe optique ............................................................................................................................11
1.1.3. Principe électronique ....................................................................................................................13
1.1.4. Les fluorochromes .........................................................................................................................14
1.1.5. Le chevauchement et les compensations spectrales ....................................................................15
1.1.6. Les marqueurs de différenciation..................................................................................................16
2. Automate Beckman Coulter Navios EX...................................................................... 17
3. Quand doit-on réaliser un immunophénotypage ? .................................................... 18
4. Comment interpréter un histogramme de cytométrie en flux ? ................................. 19
5. Les pathologies ........................................................................................................ 20
5.1. La lymphocytose B monoclonale ...................................................................................21
5.2. La leucémie lymphoïde chronique (LLC) ........................................................................21
5.3. La leucémie à tricholeucocytes......................................................................................25
6. Marqueurs utilisés pour le diagnostic des syndromes lymphoprolifératifs des cellules B
chroniques ....................................................................................................................... 26
6.1. Modification du phénotypage à la suite d’un traitement...............................................29
7. Objectifs du travail de fin d’étude............................................................................. 30
8. Matériel et méthode de travail pour réaliser un immunophénotypage ..................... 31
8.1. Matériel utilisé..............................................................................................................31
8.2. Méthode.......................................................................................................................31
8.2.1. Mode opératoire[26] .......................................................................................................................32
9. Mise en place d’un panel dix couleurs....................................................................... 33
10. La répétabilité de la méthode ............................................................................... 36
11. La stabilité de la méthode..................................................................................... 38
12. Comparaison et discussion des résultats ............................................................... 43
13. Conclusion ............................................................................................................ 57
Glossaire.......................................................................................................................... 58
Abréviations .................................................................................................................... 59
Table des figures.............................................................................................................. 60
Table des tableaux........................................................................................................... 60
Bibliographie : ................................................................................................................. 61
Annexes ........................................................................................................................... 65Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=100318 Analyse comparative de deux panels d’immunophénotypage cinq et dix couleurs en cytométrie en flux [TFE / Mémoire] / Coleen Delatte, Auteur ; Louise-Marie Vincent, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2021.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Langues : Français (fre)
Mots-clés : Notre-Dame de Grâce Gosselies Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Ce travail de fin d’études fut réalisé au sein du laboratoire d’hématologie à l’hopital Notre-Dame de Grâce de Gossselies.Le sujet est l’analyse comparative de deux panels d’immunophénotypage cinq et dix couleurs en cytométrie en flux. Ces dernières années, la cytométrie en flux a beaucoup évoluée et permet à ce jour de diagnostiquer et de suivre de nombreuses hémopathies malignes et, plus particulièrement au laboratoire, les lymphomes. Cette technique est utilisée en complément d’une numération et d’un examen cytologique des cellules. Le cytomètre en flux permet d’obtenir différentes informations sur les cellules en passant devant un laser. Les données récoltées donnent des caractéristiques telles que la taille, la granularité ainsi que certains marqueurs antigéniques de chaque cellule individuellement. Lors de mon arrivée au sein du laboratoire, le cytomètre en flux Beckman Coulter Navios EX, fonctionnait avec un panel de cinq couleurs et un seul laser était utilisé. Mon travail de fin d’étude a permis, en complément du travail de Klara Kara de l’an dernier, de mettre au point un panel d’anticorps avec dix fluorochromes différents permettant de réaliser l’exploration simultanée de douze paramètres analysés avec 3 lasers. Ce présent travail compare l’ancien panel 5 couleurs et le nouveau panel 10 couleurs, étudie la répétabilité et la stabilité de ce panel. Note de contenu : Table des matières
Présentation du lieu de stage............................................................................................. 7
Introduction générale ........................................................................................................ 8
1. La cytométrie en flux : ................................................................................................ 9
1.1. Principe général ..............................................................................................................9
1.1.1. Principe de focalisation hydrodynamique .....................................................................................10
1.1.2. Principe optique ............................................................................................................................11
1.1.3. Principe électronique ....................................................................................................................13
1.1.4. Les fluorochromes .........................................................................................................................14
1.1.5. Le chevauchement et les compensations spectrales ....................................................................15
1.1.6. Les marqueurs de différenciation..................................................................................................16
2. Automate Beckman Coulter Navios EX...................................................................... 17
3. Quand doit-on réaliser un immunophénotypage ? .................................................... 18
4. Comment interpréter un histogramme de cytométrie en flux ? ................................. 19
5. Les pathologies ........................................................................................................ 20
5.1. La lymphocytose B monoclonale ...................................................................................21
5.2. La leucémie lymphoïde chronique (LLC) ........................................................................21
5.3. La leucémie à tricholeucocytes......................................................................................25
6. Marqueurs utilisés pour le diagnostic des syndromes lymphoprolifératifs des cellules B
chroniques ....................................................................................................................... 26
6.1. Modification du phénotypage à la suite d’un traitement...............................................29
7. Objectifs du travail de fin d’étude............................................................................. 30
8. Matériel et méthode de travail pour réaliser un immunophénotypage ..................... 31
8.1. Matériel utilisé..............................................................................................................31
8.2. Méthode.......................................................................................................................31
8.2.1. Mode opératoire[26] .......................................................................................................................32
9. Mise en place d’un panel dix couleurs....................................................................... 33
10. La répétabilité de la méthode ............................................................................... 36
11. La stabilité de la méthode..................................................................................... 38
12. Comparaison et discussion des résultats ............................................................... 43
13. Conclusion ............................................................................................................ 57
Glossaire.......................................................................................................................... 58
Abréviations .................................................................................................................... 59
Table des figures.............................................................................................................. 60
Table des tableaux........................................................................................................... 60
Bibliographie : ................................................................................................................. 61
Annexes ........................................................................................................................... 65Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=100318 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Dosage de l’hémoglobine glyquée par électrophorèse capillaire : évaluation d’un automate et comparaison avec l’HPLC / Aurélie Van den Heuvel
Titre : Dosage de l’hémoglobine glyquée par électrophorèse capillaire : évaluation d’un automate et comparaison avec l’HPLC Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Aurélie Van den Heuvel, Auteur ; Jérôme Cornil, Directeur de la recherche Editeur : Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale Année de publication : 2021 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur Langues : Français (fre) Mots-clés : Notre-Dame de Grâce hémoglobine glyquée diabète : dosage Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Le diabète étant une maladie touchant de plus en plus de monde, il est important pour le milieu hospitalier d’assurer le suivi des patients touchés par cette maladie. Le paramètre dosé pour assurer le suivi de ces patients est l’hémoglobine glyquée. A la Clinique de Notre-Dâme [SIC] de Grâce, ce dosage s’effectue via une chromatographie à haute performance par le biais de l’automate Arkray 8180-V de Menarini. Cependant, l’installation du Capillarys 3 Octa par Sebia (pour effectuer l’électrophorèse des protéines sériques principalement) a soulevé un potentiel intérêt pour le dosage de l’hémoglobine glyquée (HbA1C) par l’électrophorèse capillaire. Une évaluation de cette automate a donc vu le jour, afin d’évaluer les performances du Capillarys 3 Octa et de comparer les résultats obtenus sur les deux automates.
Les performances évaluées sont la reproductibilité, la répétabilité et l’efficacité du cycle de nettoyage des capillaires.
Un intérêt sera également apporté sur la capacité du Capillarys 3 Octa a apporté des renseignements supplémentaires (comme la présence d’un variant de l’hémoglobine, un taux d’HbA2 important). Le dernier point sera consacré aux avantages et inconvénients rencontrés lors de l’utilisation de ces deux automates.
Les résultats de cette évaluation permettront d’effectuer un changement de méthode de manière sereine si tel serait le choix de la clinique.Note de contenu : Table des matières
Remerciements
Présentation du lieu de stage :................................................................................................... 7
Introduction................................................................................................................................ 9
Partie théorique : ..................................................................................................................... 10
1) Le diabète sucré ............................................................................................................... 11
1.1) Le diabète de type I .................................................................................................. 11
1.2) Le diabète de type II...................................................................................................... 12
1.3) Le diabète gestationnel ................................................................................................ 13
1.4) Causes et facteurs favorisants ...................................................................................... 13
1.5) Les complications dues au diabète ............................................................................... 15
1.6) Critères de l’Organisation Mondiale de la Santé de diagnostic du diabète ................. 15
2) L’hémoglobine glyquée ........................................................................................................ 16
2.1) L’hémoglobine............................................................................................................... 16
2.1.1) Structure................................................................................................................. 16
2.2) L’hémoglobine glyquée ................................................................................................. 18
2.2.2) L’HbA1c.................................................................................................................... 19
2.2.3) Intérêt du dosage de l’hémoglobine glyquée ........................................................ 20
3) Standardisation des résultats et valeurs de référence IFCC ................................................ 22
4) Méthodes de dosages .......................................................................................................... 22
4.1) HPLC : ............................................................................................................................ 24
4.1.1) Principe général ..................................................................................................... 24
4.2) Electrophorèse capillaire .............................................................................................. 26
4.2.1) Principe général ..................................................................................................... 26
7) Objectifs et stratégies .......................................................................................................... 29
Partie pratique :........................................................................................................................ 31
Matériel : Automates ............................................................................................................... 32
1)L’automate Arkray 8180-V Menarini ................................................................................ 32
2) L’automate Capillarys 3 Octa de Sebia............................................................................. 36
Evaluation des performances de la méthode capillaire........................................................... 40
1) Reproductibilité ............................................................................................................... 40
1.1) Contrôles du Capillarys 3 Octa............................................................................... 41
1.2) Contrôles de l’Arkray 8180-V ................................................................................. 43
2) Répétabilité ..................................................................................................................... 45
3) Contamination inter-échantillons ................................................................................... 48
4) Stabilité des échantillons au cours du temps .................................................................. 50
5) Comparaison de méthodes .............................................................................................. 52
6) Comparaison des tracés des deux automates pour les échantillons présentant un
variant de l’hémoglobine ou un taux d’hémoglobine glyquée supérieur à 1 % .................. 55
6.1) Discordances entre les alarmes des deux automates dû à un taux d’HbF supérieur à
1 % .................................................................................................................................... 55
6.2) Discordance pour échantillons possédant un variant de l’hémoglobine migrant au
même endroit que l‘Hb D :.............................................................................................. 56
6.3) Détection d’HbA2 supérieure à 3% ........................................................................... 58
6.4) Hb S/ Hb C ................................................................................................................. 58
7)Interférence analytique : Hb F ......................................................................................... 61
Evaluation pratique des automates ......................................................................................... 63
Automates et mises en route :............................................................................................. 63
Conclusion : .............................................................................................................................. 64
Bibliographie ............................................................................................................................ 70
Annexes : .................................................................................................................................. 73
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=100298 Dosage de l’hémoglobine glyquée par électrophorèse capillaire : évaluation d’un automate et comparaison avec l’HPLC [TFE / Mémoire] / Aurélie Van den Heuvel, Auteur ; Jérôme Cornil, Directeur de la recherche . - Montignies-sur-Sambre : Helha. Paramédical - Biologie médicale, 2021.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez-vous connecter pour accéder à votre compte lecteur
Langues : Français (fre)
Mots-clés : Notre-Dame de Grâce hémoglobine glyquée diabète : dosage Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Résumé : Le diabète étant une maladie touchant de plus en plus de monde, il est important pour le milieu hospitalier d’assurer le suivi des patients touchés par cette maladie. Le paramètre dosé pour assurer le suivi de ces patients est l’hémoglobine glyquée. A la Clinique de Notre-Dâme [SIC] de Grâce, ce dosage s’effectue via une chromatographie à haute performance par le biais de l’automate Arkray 8180-V de Menarini. Cependant, l’installation du Capillarys 3 Octa par Sebia (pour effectuer l’électrophorèse des protéines sériques principalement) a soulevé un potentiel intérêt pour le dosage de l’hémoglobine glyquée (HbA1C) par l’électrophorèse capillaire. Une évaluation de cette automate a donc vu le jour, afin d’évaluer les performances du Capillarys 3 Octa et de comparer les résultats obtenus sur les deux automates.
Les performances évaluées sont la reproductibilité, la répétabilité et l’efficacité du cycle de nettoyage des capillaires.
Un intérêt sera également apporté sur la capacité du Capillarys 3 Octa a apporté des renseignements supplémentaires (comme la présence d’un variant de l’hémoglobine, un taux d’HbA2 important). Le dernier point sera consacré aux avantages et inconvénients rencontrés lors de l’utilisation de ces deux automates.
Les résultats de cette évaluation permettront d’effectuer un changement de méthode de manière sereine si tel serait le choix de la clinique.Note de contenu : Table des matières
Remerciements
Présentation du lieu de stage :................................................................................................... 7
Introduction................................................................................................................................ 9
Partie théorique : ..................................................................................................................... 10
1) Le diabète sucré ............................................................................................................... 11
1.1) Le diabète de type I .................................................................................................. 11
1.2) Le diabète de type II...................................................................................................... 12
1.3) Le diabète gestationnel ................................................................................................ 13
1.4) Causes et facteurs favorisants ...................................................................................... 13
1.5) Les complications dues au diabète ............................................................................... 15
1.6) Critères de l’Organisation Mondiale de la Santé de diagnostic du diabète ................. 15
2) L’hémoglobine glyquée ........................................................................................................ 16
2.1) L’hémoglobine............................................................................................................... 16
2.1.1) Structure................................................................................................................. 16
2.2) L’hémoglobine glyquée ................................................................................................. 18
2.2.2) L’HbA1c.................................................................................................................... 19
2.2.3) Intérêt du dosage de l’hémoglobine glyquée ........................................................ 20
3) Standardisation des résultats et valeurs de référence IFCC ................................................ 22
4) Méthodes de dosages .......................................................................................................... 22
4.1) HPLC : ............................................................................................................................ 24
4.1.1) Principe général ..................................................................................................... 24
4.2) Electrophorèse capillaire .............................................................................................. 26
4.2.1) Principe général ..................................................................................................... 26
7) Objectifs et stratégies .......................................................................................................... 29
Partie pratique :........................................................................................................................ 31
Matériel : Automates ............................................................................................................... 32
1)L’automate Arkray 8180-V Menarini ................................................................................ 32
2) L’automate Capillarys 3 Octa de Sebia............................................................................. 36
Evaluation des performances de la méthode capillaire........................................................... 40
1) Reproductibilité ............................................................................................................... 40
1.1) Contrôles du Capillarys 3 Octa............................................................................... 41
1.2) Contrôles de l’Arkray 8180-V ................................................................................. 43
2) Répétabilité ..................................................................................................................... 45
3) Contamination inter-échantillons ................................................................................... 48
4) Stabilité des échantillons au cours du temps .................................................................. 50
5) Comparaison de méthodes .............................................................................................. 52
6) Comparaison des tracés des deux automates pour les échantillons présentant un
variant de l’hémoglobine ou un taux d’hémoglobine glyquée supérieur à 1 % .................. 55
6.1) Discordances entre les alarmes des deux automates dû à un taux d’HbF supérieur à
1 % .................................................................................................................................... 55
6.2) Discordance pour échantillons possédant un variant de l’hémoglobine migrant au
même endroit que l‘Hb D :.............................................................................................. 56
6.3) Détection d’HbA2 supérieure à 3% ........................................................................... 58
6.4) Hb S/ Hb C ................................................................................................................. 58
7)Interférence analytique : Hb F ......................................................................................... 61
Evaluation pratique des automates ......................................................................................... 63
Automates et mises en route :............................................................................................. 63
Conclusion : .............................................................................................................................. 64
Bibliographie ............................................................................................................................ 70
Annexes : .................................................................................................................................. 73
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=100298 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire