Centre de Documentation Campus Montignies
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Auteur Laeticia WIGGERS |
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Effets de la surexpression du microARN-126 dans le contexte de la maladie de Marek / Pauline PELLIN
Titre : Effets de la surexpression du microARN-126 dans le contexte de la maladie de Marek Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Pauline PELLIN, Auteur ; Isabelle Gennart, Directeur de la recherche ; Laeticia WIGGERS, Directeur de la recherche Année de publication : 2017 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Université de Namur Unité de recherche vétérinaire intégrée. Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières
REMERCIEMENTS
Présentation du lieu de stage ............................................................................................................ 12
Introduction ....................................................................................................................................... 14
Contexte général ................................................................................................................................ 18
1. La maladie de Marek ............................................................................................................... 18
1.1 Généralités ....................................................................................................................... 18
1.2 Le virus de la maladie de Marek ...................................................................................... 19
1.3 Cycle viral ......................................................................................................................... 20
2. Les microARN .......................................................................................................................... 22
2.1 Notions théoriques .......................................................................................................... 22
2.2 MiR-126............................................................................................................................ 25
Objectifs et stratégie .......................................................................................................................... 30
Matériels et méthodes ....................................................................................................................... 32
1. Culture cellulaire ..................................................................................................................... 32
1.1 La lignée cellulaire MSB-1 ................................................................................................ 32
2. Design d’amorces .................................................................................................................... 33
3. Système Tet ON ....................................................................................................................... 34
3.1 Les plasmides ................................................................................................................... 34
3.2 Système Tet-REX ou Tet-On ............................................................................................. 37
3.3 Construction plasmidique ................................................................................................ 38
3.4 Les antibiotiques .............................................................................................................. 38
4. Transfection de cellules eucaryotes........................................................................................ 40
5. Extraction et quantification d’ARN ......................................................................................... 43
6. Reverse-transcription-quantitative-PCR (RT-Q-PCR) .............................................................. 44
7. Etude du métabolisme cellulaire ............................................................................................ 46
8. Apoptose ................................................................................................................................. 48
8.1 Généralités ....................................................................................................................... 48
8.2 Perte d’asymétrie de la membrane plasmique ............................................................... 49
8.3 Fragmentation de l’ADN .................................................................................................. 51
Résultats ............................................................................................................................................. 52
1. Détermination de la concentration en blasticidine et zéocine nécessaire à la sélection cellulaire des MSB-1 ....................................................................................................................... 52
2. Etablissement de la lignée cellulaire stable avec les plasmides pcDNA6/TR et pcDNA4/T0 (Tet On system) .............................................................................................................................. 54
2.1 Etude de la transfection avec pcDNA6/TR ...................................................................... 54
2.2 Quantification relative de Tet R par RT-Q-PCR ................................................................ 56
2.3 Etude de la transfection avec pcDNA4/T0 ....................................................................... 57
3. Mise au point des conditions d’études de l’effet de miR-126 ................................................ 59
3.1 Etude de la prolifération et du métabolisme cellulaire ................................................... 59
3.2 Etude de l’apoptose ......................................................................................................... 62
Conclusion et perspectives ................................................................................................................ 70
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65848 Effets de la surexpression du microARN-126 dans le contexte de la maladie de Marek [TFE / Mémoire] / Pauline PELLIN, Auteur ; Isabelle Gennart, Directeur de la recherche ; Laeticia WIGGERS, Directeur de la recherche . - 2017.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Université de Namur Unité de recherche vétérinaire intégrée. Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières
REMERCIEMENTS
Présentation du lieu de stage ............................................................................................................ 12
Introduction ....................................................................................................................................... 14
Contexte général ................................................................................................................................ 18
1. La maladie de Marek ............................................................................................................... 18
1.1 Généralités ....................................................................................................................... 18
1.2 Le virus de la maladie de Marek ...................................................................................... 19
1.3 Cycle viral ......................................................................................................................... 20
2. Les microARN .......................................................................................................................... 22
2.1 Notions théoriques .......................................................................................................... 22
2.2 MiR-126............................................................................................................................ 25
Objectifs et stratégie .......................................................................................................................... 30
Matériels et méthodes ....................................................................................................................... 32
1. Culture cellulaire ..................................................................................................................... 32
1.1 La lignée cellulaire MSB-1 ................................................................................................ 32
2. Design d’amorces .................................................................................................................... 33
3. Système Tet ON ....................................................................................................................... 34
3.1 Les plasmides ................................................................................................................... 34
3.2 Système Tet-REX ou Tet-On ............................................................................................. 37
3.3 Construction plasmidique ................................................................................................ 38
3.4 Les antibiotiques .............................................................................................................. 38
4. Transfection de cellules eucaryotes........................................................................................ 40
5. Extraction et quantification d’ARN ......................................................................................... 43
6. Reverse-transcription-quantitative-PCR (RT-Q-PCR) .............................................................. 44
7. Etude du métabolisme cellulaire ............................................................................................ 46
8. Apoptose ................................................................................................................................. 48
8.1 Généralités ....................................................................................................................... 48
8.2 Perte d’asymétrie de la membrane plasmique ............................................................... 49
8.3 Fragmentation de l’ADN .................................................................................................. 51
Résultats ............................................................................................................................................. 52
1. Détermination de la concentration en blasticidine et zéocine nécessaire à la sélection cellulaire des MSB-1 ....................................................................................................................... 52
2. Etablissement de la lignée cellulaire stable avec les plasmides pcDNA6/TR et pcDNA4/T0 (Tet On system) .............................................................................................................................. 54
2.1 Etude de la transfection avec pcDNA6/TR ...................................................................... 54
2.2 Quantification relative de Tet R par RT-Q-PCR ................................................................ 56
2.3 Etude de la transfection avec pcDNA4/T0 ....................................................................... 57
3. Mise au point des conditions d’études de l’effet de miR-126 ................................................ 59
3.1 Etude de la prolifération et du métabolisme cellulaire ................................................... 59
3.2 Etude de l’apoptose ......................................................................................................... 62
Conclusion et perspectives ................................................................................................................ 70
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65848 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire Mise au point d’une technique d’extraction permettant la séparation de protéines nucléaires et cytoplasmiques / Olivier PONCELET
Titre : Mise au point d’une technique d’extraction permettant la séparation de protéines nucléaires et cytoplasmiques Type de document : TFE / Mémoire Auteurs : Olivier PONCELET, Auteur ; Benoit MUYLKENS, Directeur de la recherche ; Laeticia WIGGERS, Directeur de la recherche Année de publication : 2017 Note générale : Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur. Langues : Français (fre) Mots-clés : biologie médicale Université de Namur Unité de recherche vétérinaire intégrée. Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières :
PRÉSENTATION DU LIEU DE STAGE 6
INTRODUCTION 7
CONTEXTE GÉNÉRAL 8
LE VIRUS DE SCHMALLENBERG 8
ORIGINE ET DÉCOUVERTE 8
TAXONOMIE 8
PATHOLOGIES INDUITES SUITE À L’INFECTION PAR LE SBV 8
HÔTES DU SBV 9
EPIDÉMIOLOGIE DE L’INFECTION PAR LE SBV 10
STRUCTURE DU SBV 10
CYCLE VIRAL 12
STRUCTURE DES ARNM VIRAUX 14
BIOSYNTHESE PROTEIQUE 15
TRANSCRIPTION CHEZ LA CELLULE EUCARYOTE 16
RÉPLICATION ET TRANSCRIPTION VIRALE 18
DIFFÉRENCE ENTRE TRANSCRIPTION CHEZ LES EUCARYOTES ET CHEZ LES SIMBUVIRUS 20
TRADUCTION CHEZ LA CELLULE EUCARYOTE 21
TRADUCTION VIRALE 23
DIFFÉRENCES ENTRE TRANSCRIPTION EUCARYOTE ET VIRALE 23
DESCRIPTION DU PROJET 26
OBJECTIFS ET STRATÉGIE 28
MATÉRIELS ET MÉTHODES 30
CULTURE CELLULAIRE DES CELLULES BHK-21 30
INFECTION DES CELLULES BHK-21 30
EXTRACTION PROTÉIQUE SUR CELLULES BHK-21 30
EXTRACTION PAR LYSE CHIMIQUE À PARTIR DE FLASQUES 30
EXTRACTION PAR LYSE CHIMIQUE À PARTIR D’EPPENDORF 31
EXTRACTION PAR LYSE MÉCANIQUE 32
CULTURE CELLULAIRE DES CELLULES KC 32
INFECTION DES CELLULES KC 33
EXTRACTION PROTÉIQUE SUR CELLULES KC 33
DOSAGE PIERCE 33
WESTERN BLOT 34
RÉSULTATS ET DISCUSSION 36
EXTRACTION À PARTIR DE CELLULES BHK-21 36
EXTRACTION À PARTIR DE CELLULES KC 48
CONCLUSION ET PERSPECTIVES 54
BIBLIOGRAPHIE 56
ANNEXES 60
ANNEXE 1 : ANALYSE DES RÉSULTATS D’UN DOSAGE PIERCE 60
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65849 Mise au point d’une technique d’extraction permettant la séparation de protéines nucléaires et cytoplasmiques [TFE / Mémoire] / Olivier PONCELET, Auteur ; Benoit MUYLKENS, Directeur de la recherche ; Laeticia WIGGERS, Directeur de la recherche . - 2017.
Le fichier numérique de ce document est disponible uniquement pour les membres de la Haute Ecole Louvain-en-Hainaut ainsi que ses étudiants. Veuillez vous connecter pour accéder à votre compte lecteur.
Langues : Français (fre)
Mots-clés : biologie médicale Université de Namur Unité de recherche vétérinaire intégrée. Index. décimale : TFE Bio Med TFE Biologie médicale Note de contenu : Table des matières :
PRÉSENTATION DU LIEU DE STAGE 6
INTRODUCTION 7
CONTEXTE GÉNÉRAL 8
LE VIRUS DE SCHMALLENBERG 8
ORIGINE ET DÉCOUVERTE 8
TAXONOMIE 8
PATHOLOGIES INDUITES SUITE À L’INFECTION PAR LE SBV 8
HÔTES DU SBV 9
EPIDÉMIOLOGIE DE L’INFECTION PAR LE SBV 10
STRUCTURE DU SBV 10
CYCLE VIRAL 12
STRUCTURE DES ARNM VIRAUX 14
BIOSYNTHESE PROTEIQUE 15
TRANSCRIPTION CHEZ LA CELLULE EUCARYOTE 16
RÉPLICATION ET TRANSCRIPTION VIRALE 18
DIFFÉRENCE ENTRE TRANSCRIPTION CHEZ LES EUCARYOTES ET CHEZ LES SIMBUVIRUS 20
TRADUCTION CHEZ LA CELLULE EUCARYOTE 21
TRADUCTION VIRALE 23
DIFFÉRENCES ENTRE TRANSCRIPTION EUCARYOTE ET VIRALE 23
DESCRIPTION DU PROJET 26
OBJECTIFS ET STRATÉGIE 28
MATÉRIELS ET MÉTHODES 30
CULTURE CELLULAIRE DES CELLULES BHK-21 30
INFECTION DES CELLULES BHK-21 30
EXTRACTION PROTÉIQUE SUR CELLULES BHK-21 30
EXTRACTION PAR LYSE CHIMIQUE À PARTIR DE FLASQUES 30
EXTRACTION PAR LYSE CHIMIQUE À PARTIR D’EPPENDORF 31
EXTRACTION PAR LYSE MÉCANIQUE 32
CULTURE CELLULAIRE DES CELLULES KC 32
INFECTION DES CELLULES KC 33
EXTRACTION PROTÉIQUE SUR CELLULES KC 33
DOSAGE PIERCE 33
WESTERN BLOT 34
RÉSULTATS ET DISCUSSION 36
EXTRACTION À PARTIR DE CELLULES BHK-21 36
EXTRACTION À PARTIR DE CELLULES KC 48
CONCLUSION ET PERSPECTIVES 54
BIBLIOGRAPHIE 56
ANNEXES 60
ANNEXE 1 : ANALYSE DES RÉSULTATS D’UN DOSAGE PIERCE 60
Permalink : ./index.php?lvl=notice_display&id=65849 Exemplaires
Cote Support Localisation Section Disponibilité aucun exemplaire